Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 62

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 56 57 58 59 60 61 < 62 > 63 64 65 66 67 68 .. 101 >> Следующая

типами вируса полиомиелита, а также вирусом Коксаки (Аккер-манн, 1957).
Аналогичные результаты были получены Гинзбергом (1957) при культивировании клеток HeLa, зараженных аденовирусом типа III или IV, в среде, содержащей 40% иммунной сыворотки человека. До 5% клеток этих культур обнаруживали изменения ядер, характерные для аденовирусной инфекции. Получение клонированных культур и исследования с флуоресцирующими антителами, несомненно, подтвердили инфицирование небольшого числа клеток культур. При длительном пассировании инфицированных клеток вирус всегда обнаруживался в отмытых клетках. При удалении из состава питательной среды иммунной сыворотки человека наблюда-1 лась специфическая дегенерация клеток.
При применении кроличьей иммунной сыворотки, содержащей значительно большую концентрацию антител, чем сыворотка человека, латентная форма инфекции не была получена. Предполагают, что в данном случае решающее значение имеет высокая концентрация в питательной среде белков сыворотки человека, а неспецифических антител. Сыворотка человека очень активизирует клеточный метаболизм, что в свою очередь ограничивает размножение вируса и, вероятно, повреждение клеток. Вирус может переживать потому, что занимает благоприятное внутриклеточное положение и это способствует его стабильности при неблагоприятных условиях. Неинфицированные клетки остаются чувствительными к вирусу, и когда культуральные условия становятся менее благоприятными, размножение вируса увеличивается и клетки разрушаются.
Благоприятные условия культивирования могут привести клетки к большей резистентности к вирусной инфекции и ее воздействию, так же как плохое питание клеток может сделать их менее способными поддерживать вирусную инфекцию.
Наблюдения, подтверждающие эту концепцию, изложены в ряде статей Моргана с сотрудниками [Морган, 1959; Хигги, Морган (Heggie, Morgan, 1956); Джонсон, Морган (Yohnson, Morgan, 1956); Морган, Бедер (Morgan, Bader, 1957)]. Исследования эти проводили с вирусом пситтакоза в культурах высокочувствительных к нему клеток куриной эмбриональной ткани и штамма L. Инфекция культур наблюдалась непродолжительное время —• всего от 7 до 28 дней.
_ При недостатке в среде питательных веществ клетки инфицировались вирусом, но вирус не мог быть обнаружен до тех пор, пока в среду не вводили недостающие компоненты. Через 24 часа после восстановления питательности среды вирус в этих культурах достигал высоких концентраций. Он мог поддерживаться в культурах в неинфекционном состоянии в голодающих клетках в течение 15 дней, после чего синтез вируса мог быть стимулирован добавлением питательных веществ. Для получения в культурах вируса в относительно высоких титрах требовалось введение в со-
став питательных сред водорастворимых витаминов, глюкозы и определенных аминокислот. Для репродукции вируса пситтакоза в клетках требовались следующие аминокислоты: треонин, метионин, изолепцин, фенилаланин, триптофан, лейцин, валин, цистин и тирозон. Для репродукции вируса в культуре куриных эмбриональных клеток были необходимы фенилаланин и триптофан.
Чемберс (Chambers, 1957) установила, что при инфицировании клеток штамма L вирусом западного лошадиного энцефаломиелита возникает состояние хронической инфекции. Клетки эти становятся резистентными к суперинфекции тем же вирусом. В связи с тем, что хроническая инфекция возникает лишь при заражении культур большой дозой вируса, предполагают, что ее вызывает множественная вирусная инфекция, включающая активные, неактивные и неполные вирусные частицы. Заражение клеток неинфекционным вирусом вызывает аутоинтерференцию, в результате которой вирус утрачивает способность к завершению своего цикла размножения и к цитопатогенному действию. Наличие инфекционного вируса в культуре, по предположению автора, объясняется тем, что небольшое число клеток периодически утрачивает способность к интерференции, а это способствует росту вируса, разрушению клеток и освобождению из них инфекционного вируса. Клетки, содержащие интерферирующий компонент, размножаются, чем поддерживается существование клеточной популяции. Таким образом, устанавливается равновесие между вирусом и клеточной популяцией.
Разная степень чувствительности клеток культуры к вирусу также может привести к развитию латентной формы инфекции. В одних случаях в культурах могут преобладать резистентные к цитопатогенному действию клетки, в других — их может быть немного, но за счет разрушительного действия вируса чувствительные клетки погибают и в пассажах инфицированных культур, таким образом, селекционируются клетки, резистентные к цитопатогенному действию.
Так, Феллер, Эндерс и Уеллер (Feller, Enders, Weller, 1940) описали размножение вируса вакцины в смешанных культурах ткани куриного эмбриона, длившееся 9 недель. Вирусную инфекцию культур доказывало наличие типичных цитоплазматических включений в клетках. Несмотря на вирусную инфекцию, фрагменты ткани росли, как в контролях. Полученные результаты свидетельствуют, что вирус вакцины может переживать и длительно инфицировать новые клетки и размножаться в течение всего опыта.
Предыдущая << 1 .. 56 57 58 59 60 61 < 62 > 63 64 65 66 67 68 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed