Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.
Культура ткани в вирусологических исследованиях
Автор: Анджапаридзе О.Г.Издательство: Москва
Год издания: 1962
Страницы: 207
Читать: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101
Скачать:
О. Г. Анджапаридзе, В. И. Гаврилой, Б. Ф, Семенов, Л. Г. Степанова
КУЛЬТУРА ТКАНИ
В ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО МЕДИЦИНСКОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
МОСКВА — 1962
ВВЕДЕНИЕ
Методы культивирования тканей за время своего существования значительно развивались и совершенствовались.. Широкое внедрение этих методов в практику исследовательской работы способствовало разрешению многих вопросов биологии и, в частности, вирусологии. В одних случаях объектом исследований являлась сама культура тканей, в других—тканевые культуры имели подсобное значение и их использовали для культивирования вирусов и для изучения взаимодействий между клеткой и вирусом.
Идея культивирования тканей in vitro принадлежит профессору Харьковского университета И. П. Скворцову (1886), который в
1885 г. провел опыты по культивированию клеток крови лягушки, птиц и человека во влажной камере. Он выращивал ткани в течение нескольких месяцев, добавляя к культурам свежую питательную жидкость, состоящую из 1% раствора либиховского экстракта. Свои первые работы по культивированию ткани вне организма И. П. Скворцов опубликовал в Трудах Медицинской секции Общества опытных наук при Харьковском университете в
1886 г.
В работе «Биолиз клеточных ядер» И. П. Скворцов (1889) приводит рисунок форменных элементов крови лягушки после 12-су-точного пребывания во влажной камере в 1% растворе либиховского экстракта при летней температуре и отмечает их «живучесть» в необычной среде.
Параллельно этим исследованиям Ру (Roux, 1885) провел опыты по культивированию клеток яйца лягушки в фильтрованном курином белке.
Борн (Born, 1894) описал размножение в питательной среде клеток из кусочков ткани- зародышей амфибий.
Позже, в 1897 и 1902 гг., Лебу (Leub, 1902) удалось культивировать клетки кожи эмбрионов морских свинок в сыворотке этих же животных.
Эти исследования обратили на себя внимание, но в те годы не получили дальнейшего развития. Лишь несколько лет спустя американский эмбриолог Гаррисон предложил методику культивирования тканей в свернувшейся лимфе.
Наблюдая рост нервных клеток зародыша лягушки в сгусткё лимфы, Гаррисон (Harrison, 1907) доказал, что нервные волокна вырастают из самих нервных клеток. Это сообщение было оценено учеными, и вскоре методика была принята для систематических исследований клеточного роста.
В дальнейшем исследователи различных стран усовершенствовали и развивали новую методику, применяя ее для культивирования вирусов, а также для разрешения ряда практических и теоретических вопросов, связанных с изучением живой клетки.
Берроуз (Burrows, 1910), работая в лаборатории Гаррисона, модифицировал метод тканевых культур, заменив лимфу плазмой крови, что облегчило получение подходящей питательной среды для выращивания тканей разных животных. Им были приготовлены культуры из сердца, кожи, нервов 60-часового куриного зародыша в кровяной плазме курицы. Ткань культивировали при температуре 39°. Клетки разрастались очень быстро. В 1910 г. Берроуз вместе о Каррелем (Carrel) провели целую серию опытов по культивированию самых различных тканей взрослых животных и показали, что из первой культуры можно получить путем пересева вторую, из второй третью и т. д. Таким образом, благодаря предложенной Берроузом и Каррелем методике культивирования тканей в свернувшейся плазме открылась возможность длительного выращивания тканевых элементов вне организма.
Каррель (1924) очень широко поставил исследование тканевых культур и применил этот метод для изучения самых различных проблем. Он разработал метод выращивания тканей в плоских сосудах, названных чашками Карреля. Форма этих сосудов обеспечивала стерильность культуры и создавала условия для интенсивного и длительного роста тканей.
Методика Карреля-Берроуза в дальнейшем успешно применялась для решения ряда специальных проблем. Так, А. А. Крон-товский и J1. И. Палев (1913) применили метод культур тканей для изучения жирового и липоидного обмена клеток и тем самым положили начало биохимическим и физико-химическим исследованиям тканевых культур.
А. А. Максимовым (1916) была введена методика фиксации тканевых культур ценкер-формолом, заключение культур в целлоидин и окраска гематоксилином и азур-эозином.
А. А. Максимов (1916), а в дальнейшем Г. К. Хрущев (1929), А. В. Румянцев (1932) и Н. Г. Хлопин (1940) успешно использовали метод тканевых культур в экспериментальной гистологии.
Н. Г. Хлопин (1940) ввел прижизненную окраску культур.
Метод тканевых культур нашел широкое применение в вирусологии при исследовании многих теоретических и практических вопросов.
Первые работы по использованию культур тканей для размножения вируса были выполнены Левадити (Levaditi, 1914). Он выращивал ткань ганглия обезьяны, зараженной полиомиелитом,
методом висячей капли и показал размножение вируса в четырех пассажах. Но в этих исследованиях было также установлено, что новый метод не дает возможности получить большое количество вируса и поддерживать его в культуре длительное время.
