Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 58

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 101 >> Следующая

Рис. 30. Схема процесса взаимодействия вируса с клеткой, его репродукция в клетке и выход из нее (Морган, 1960)
/ клетка; 5--плро клетки; .? цитоплазма; 4—рс~ центсц) клетки; о^липоидиогтолисахаридная оболочка вируса; 6' — бел копая оболочка вируса; 7—куклеинован кислота вируса.
клетку вирус лишается внешней
Так, в серии весьма тонких исследований Розе и Моргана с сотрудниками [Морган, Розе, Мур (Morgan, Rose, Moore, 1956): Морган, Хов, (Howe), Розе 1961; Рифкинд, Годман и др. (Rifkind Godman et al., 1961)] показано, что нуклеиновая кислота и бело* вируса простого герпеса формируются в ядре инфицированной клетки. При больших количествах вирусного материала в ядре могут образовываться даже вирусные кристаллы. Выход сформировавшихся вирусных частиц происходит без разрушения ядра г клетки. Аденовирусы комплектуются в ядре клетки и часто кристаллизуются. При выходе вируса ядро разрушается и клеткг дезинтегрируется. Нуклеоид (растворимый антиген) вируса грип
Рис. 31. Оболочка инфицированной клетки и формирование в ней частей вируса гриппа. X 136000 (Морган, Розе, Мур)
па формируется в ядре, а гемагглютинин вируса (наружная бел ковая оболочка) синтезируется в оболочке клетки; полный виру< формируется в оболочке клетки. При выходе вируса ни ядро, hi клетка не дезинтегрируются.
Эти данные документированы микрофотографиями препаратов исследованных этими авторами в электронном микроскопе. Микро фотография (рис. 31), взятая из их работы, убедительно подтверж дает правильность их заключения. На снимке четко видна оболоч ка клетки с формирующимися в ней вирусными частицами и от деляющиеся от «ее сформировавшиеся вирусные частицы (ш снимке частицы расположены выше оболочки).
Нуклеиновая кислота и белок вируса осповакцины синтезиру ются в цитоплазме инфицированной клетки. Там же, в цитоплазме формируется полный вирус.
Таким образом, в определенных случаях выделение вируса и: зараженной клетки может происходить в течение нескольких часо]
без разрушения или лизиса клетки. Выделение вируса западного лошадиного энцефаломиелита и везикулярного стоматита из инфицированных клеток протекает так быстро, что накопления сформированных вирусных частиц в клетке ме происходит.
С. Я. Гайдамович, Н. Г. Титова (1961) считают, что вирус клещевого энцефалита освобождается из инфицированных клеток по мере созревания. На основании наблюдений в электронном микроскопе клеток, инфицированных вирусом гриппа, предполагают, что с выделением вирусных частиц связано ограниченное вытеснение из клеток цитоплазмы.
Выделение вируса полиомиелита из инфицированных клеток HeLa и клеток почки обезьян также связано с уменьшением протоплазмы клеток, наблюдаемым одновременно с появлением вируса в питательной среде культуры.
Аккерманн (1958) предложил для этого процесса термин «цитотранссудация».
Интересно отметить, что выделение вируса гриппа из инфицированных клеток хорион аллантоисной оболочки развивающегося куриного эмбриона подавляется АМР. Это вещество, как указывалось выше, препятствует первой фазе—адсорбции вируса на клетке.
Задержка вирусных частиц в клетке не препятствует их воспроизведению; в результате наблюдается накопление вируса в клетке. Его можно легко обнаружить после механического разрушения клеток.
Выделение вируса полиомиелита из зараженных клеток может быть заторможено путем понижения температуры инкубирования культур до 30°.
Определенный интерес не только в теоретическом, но и в практическом отношении представляют исследования фаз развития вирусов в системе инфицированных клеток.
Наиболее детально этот вопрос исследован на вирусе полиомиелита.
Так, по наблюдениям Ховеса и Мельника (Howes, Melnick,
1957), в культуре клеток почки обезьян, зараженных вирусом полиомиелита, только через 3 часа появляется заметное количество вируса, связанного с клеткой. В это время количество вируса быстро увеличивается. 50% произведенных вирусных частиц, связанных с клеткой, обнаруживается в последующие 2—3 часа. Еще через 3 часа или через 8—9 часов после заражения клеток наблюдается полное созревание вирусных частиц. По подсчетам с использованием титрования по методу бляшек установлено, что одна инфицированная клетка продуцирует 100 бляшкообразующих единиц вируса. Среднее время «вызревания» вируса, т. е. время с момента заражения клетки и до появления 50% зрелых вирусных частиц, связанных с клетками, составляло 5,4 часа. Свободный вирус, т. е. вирус, освободившийся из клеток и находящийся в жидкой питательной среде, в зараженной культуре появлялся
позже и в меньшем количестве. Так, даже через 11 часов в питательной среде можно было обнаружить менее 20% всех воспроизведенных вирусных частиц. Сходные результаты с вирусом полиомиелита получены и другими исследователями [Дарнелл (Darnell, 1958)].
Процесс выделения вируса из культур клеток, в которых он размножается, может протекать различное время. Так, выделение вируса полиомиелита из клеток HeLa начинается с 7-го часа после заражения и продолжается несколько часов.
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed