Феромоны насекомых - Лебедева К.В.
Скачать (прямая ссылка):
Безсплиттерный ввод позволяет ввести пробу через капиллярную колонку полностью без сброса и без каких бы то ни было потерь вещества. Специальное устройство, выполненное в металле или стекле [276, 277], позволяет почти полностью освободиться от растворителя и тем самым свести к минимуму объем инъецируемого раствора. При этом стеклянный ввод эффективнее, так как исключает разложение летучих органических соединений, неизбежное при контакте с нагретым металлом. Стеклянный ввод используется также при внесении твердых проб биоматериала, содержащих летучие вещества [276].
Ввод пробы с капиллярной колонки прямо в ионный источник, минуя сепаратор, также позволяет'избежать потерь и расплывания хроматограммы. Такой ввод достигается применением специального устройства, состоящего из гибкого платинового капилляра (50 см X 0,15 мм), нагреваемого до 170 С нихромовой спиралью. Это устройство помещается между колонкой и ионным источником. Один конец платинового капилляра спаян с капилляром колонки, на другом конце — стеклянная трубка, которая вставляется в устройство для прямого ввода пробы [278] , скорость гелия при этом 25 см/сек, а давление 1,2 атм.
Перечисленные усовершенствования с успехом применяются в исследованиях феромонов [267, 268]. Таким образом, задача выделения летучих компонентов феромонов с наименьшими потерями и их доведения до идентификации кратчайшим путем находится в стадии успешного решения.
Подводя итоги достижениям в выделении и идентификации феромонов чешуекрылых, необходимо обратить особое внимание на то, что успех быстрого использования этих феромонов в защите растений будет зависеть от успеха в идентификации минорных компонентов феромона, от установления их геометрической, реже оптической, конфигурации. Учитывая важность минорных компонентов в повышении эффективности и специфичности феромона [11, 53, 58, 117, 219], пересматриваются исследования феромонов некоторых видов насекомых. Так, Z9TDA, ранее считавшийся основным компонентом феромона S. frugiperda, рассматривается теперь как вторичный, минорный компонент (2—10%), являющийся си-нергистом к Z9DDA, теперь считающимся основным компонентом [81].
По результатам идентификации феромонов чешуекрылых можно заметить, что многие виды имеют в своем феромоне одинаковые компоненты. Это неоднократно подтверждено испытаниями в полей ЭАГ-исследова-ниями. Тем не менее четкая специфичность является абсолютным фактом, и немаловажную роль тут может играть, с одной стороны, разное соотно-
53
шение основных компонентов, с другой — присутствие минорных компонентов в феромоне.
Разное соотношение основных компонентов — простейший случай изоляции видов. Например, два европейских вида листоверток А. огапа и С. spectrana используют в качестве основного компонента смесь одинаковых веществ (Z9TDA и Z11TDA), но в разном соотношении (9:1 и 1: 9 соответственно [259]). Смесь одинаковых веществ, но в разном соотношении используют в качестве основных компонентов рас кукурузного мотылька О. nubilalis, обитающих в разных климатических зонах [34, 279] : Z11TDA : Е11TDA = 97 : 3 и Z11TDA : Е11TDA = 3 : 97.
Присутствие третьего или четвертого минорного компонента — уже достаточно сложный случай. Так, в самке A. velutinana, основной компонент которой — смесь Z11TDA и Е11TDA (91 : 9), найден минорный компонент — DDA, играющий роль синергиста, обеспечивающего специфичность феромону этого вида [28]. В отсутствие DDA феромон привлекает также самцов С. rosaceana, в феромоне самки которого близкое соотношение тех же самых Z11TDA и E11TDA (92: 8), но есть свой синергист — Z11TDOL (3—10%), придающий своему феромону строгую специфичность [219].
Или, например, в тутовом шелкопряде В. mori, основной компонент феромона которого E10Z12HDDOL [205], найдены были дополнительно E10Z12HDDAL [83] и E10E12HDDOL [109]. При этом Е, Е-изомер спирта составлял 3—5% от Е, Z-изомера и не мог быть обнаружен ГЖХ, а только биотестированием фракции ГЖХ с tR -изомера.
Или, например, для двух видов — G. molesta и G. prunivora малейшие изменения в соотношении Z, Е-изомеров 8DDA от 98: 2 до 93:7 уменьшает привлечение самцов G. prunivora на 80%, а привлечение самцов G. molesta увеличивает [280]. Это привлечение усиливается еще больше, если добавить третий компонент — DDOL [281]. Вполне возможно, что полный набор компонентов феромона G. molesta будет непривлекателен для G. prunivora, и наоборот.
Поскольку минорные компоненты составляют 1—5% от основного компонента, необходимо найти удобные методы поиска минорных компонентов в экстракте феромона. Одним из таких методов может служить метод сочетания ГЖХ с ЭАГ. Чувствительность этого метода такова, что при столь малых количествах минорных компонентов, которые не чувствует газовый хроматограф, возможен сигнал ЭАГ на вещество, выходящее из хроматографа с невидимым пиком. По времени выхода этого вещества из хроматографа можно сделать предварительное заключение о его структуре. Разделение экстракта на полярных и неполярных колонках позволяет получить хороший сигнал антенны самца на основной компонент и меньшие сигналь! — на минорные компоненты экстракта. Поиск минорных компонентов поведенческим биотестом неэффективен, так как может привести к дезинформации; индивидуальный минорный компонент может быть при этом неактивен.
