Феромоны насекомых - Лебедева К.В.
Скачать (прямая ссылка):
Таблица 4
Альдегиды, идентифицированные масс-фрагментографией в продуктах озонолиза феромона листовертки A. semiferanus
Сканирование Альдегиды Диагностические фраг
менты
I СН3СНО 29
СН3СН2СНО 29 5В
СН3 (СН2 2СНО 29 72
СН3 (СН2 3СНО 29 86
II СН5 (СН2 4СНО Щ
СНЭ (СН, 5СНО 57(70
СН3 (СН2 „сно 57Ц?
СН3 (СН2 .СНО 57 70 ш
СН3 (СН2 „сно 57 70 96 112
III СНЭ (СН2 ,сно 110
СН3 (СН2 10сно 110 140
и имели tfi и масс-спектры, близкие к таковым в активной фракции. Для проведения масс-фрагментографии активной фракции было запрограммировано сканирование только тех ионов, которые характерны для насыщенных и моно-ненасыщенных ацетатов с 14 атомами углерода: т/е 196 (М -60) 194 (М -60) 166 (194-28) 61 (СН3СООН2)+ . На рис. 4 можно видеть, что в пике с номером спектра 300 содержится TDA, в пике с номером 345 содержатся TDOL и тетрадеценолы, в пике с номером 355—400 содержатся изомеры тетрадеценилацетата и, как видно из рис. 5, Z10TDA является одним из компонентов сложной смеси тетрадеценилацетатов. Авторам не удалось разделить изомеры этих ацетатов [228]. Поэтому был предпринят микроозонолиз ацетатной фракции, и продукты озонолиза исследованы масс-фрагментографией. Для этой цели было запрограммировано сканирование только тех фрагментов, которые характерны для низших альдегидов (обведены в рамку для каждого идентифицированного альдегида в табл. 4).
Как видно из масс-фрагментограммы сканирования II на рис. 6, в продуктах озонолиза феромона листовертки есть все альдегиды от гексаналя до нонаналя. Таким образом в экстракте самки A. semiferanus были найдены ацетаты: 2TDA, 3TDA, 4TDA, 5TDA, 6TDA, 7TDA, 8TDA, 9TDA, 10TDA, 11TDA и 12TDA [228]. Можно, таким образом, считать, что последняя ступень идентификации феромонов чешуекрылых доведена до такого совершенства, при котором достаточно феромона от двух—пяти особей. Остается задача — довести феромон от насекомого до идентификации самым коротким путем с минимальным количеством потерь. И здесь, возможно, уместно обратить внимание на те ухищрения, к которым удачно прибегали некоторые исследователи, чтобы решить эту задачу.
Увлекающая содистилляция летучих веществ сырого экстракта помогает освободиться от тяжело-летучих веществ и делает возможным провести сразу анализ с помощью ГЖХ—МС. Для этой цели аликвоту, содержащую 50—150 самок-эквивалентов, растворяют этиловым эфиром до 0,5 мл и медленно вводят в колонку для очищающей кодистилляции (рис. 7). В испаряющей части колонки (4) поддерживается при этом температура около 180 и пропускается азот. Летучие вещества увлекаются потоком
50
Номер сканирования
Рис. 4. Масс-фрагментограмма привлекающей фракции феромона дубовой листовертки на колонке с 10% DEGS при 170° С
Номер сканирования Рис. 5. Масс-фрагментограмма Z10TDA на колонке с 10% DEGS при 160° С
азота в стеклянную ловушку (5), охлаждаемую до — 15°С, и конденсируются в ней вместе с растворителем. Для вымывания конденсата из повушки в держатель пробы (§) необходимы три дополнительные инъекции по 0,5 мл этилового эфира с интервалом в 1 мин. Перед анализом проба упаривается до 5—10 мкл, но ни в коем случае не досуха [267, 268, 271|.
51
Номер спектра
Рис. 6. Масс-фрагментограмма продуктов озонолиза феромона дубовой листовертки
Рис. 7. Аппарат для содистилляции
/—блок испарителя, 180°; 2 — прокладка; 3 — N3, 15 мл/мин; 4 — испаритель (стекло, внешний диаметр 6 мм, внутренний — 4 мм) с силанизированной стеклянной ватой; 5 — ловушка (стеклянная трубка 60 см, 6 мм — внешний диаметр, 1 мм — внутренний); 6 — тефлоновый уплотнитель; / — баня (—15°С), лед с солью; 8 — держатель пробы
Использование твердого ввода в хроматограф представляется удобным методом, позволяющим анализировать летучие вещества кончиков брюшка или желез насекомых введением их в устройство для твердого ввода газового хроматографа [272,275]. Железы насекомых помещают в капилляр, запаянный с одного конца; в свою очередь капилляр помещают в тонкостенную трубку из натриевого стекла (1,5 см X 2,5 мм) и замораживают сухим льдом. Трубка запаивается, помещается в инжектор для твердого ввода и загружается в обогреватель ввода при 210 С. После 5 мин. выдерживания разбивают поршнем сосуд и вводят пробу. Этим способом можно исследовать вещества желез до 100 особей [273, 275]. Такая техника анализа позволяет одновременно проводить РГХ с летучими веществами, добавляя реагенты непосредственно в капилляр с железами или пропуская поток летучих веществ через петлю с реагентами [274]. Вместо стеклянных ампул для ввода желез в хроматограф можно использовать ампулы из алюминия [272].
