Феромоны насекомых - Лебедева К.В.
Скачать (прямая ссылка):
Феромон кислой природы был выделен также из кожееда Attagenus megatoma. Для выделения пользовались подщелачиванием дистиллята бензольного экстракта самок A. megatoma, регенерацией свободной кислоты хроматографией на СГ, этерификацией диазометаном и ГЖХ метилового эфира. Анализ ИК-, УФ-, масс- и ЯМР-спектроскопией и синтез пространственных изомеров указали на то, что феромон кожееда коврового представляет собой Е-3, Z-5-тетрадекановую кислоту, названную мегатомовой кислотой [310].
Феромоны высокой степени чистоты и активности у щелкунов степного Agriotes gurgustanus, кубанского A. litigiosus и полосатого A. lineatus были выделены из феромонных желез с помощью стеклянного капилляра. Без предварительной очистки проводили анализ ГЖХ (стеклянная колонка 2 м X 2 мм с 1,5% OV-101; 15% NPGS; 15% FFAP) и ГЖХ—МС (стеклянная капиллярная колонка 25 м с SE-30). Идентификация проведена с использованием таких микроаналитических реакций, как гидрирование и гидрогенолиз в системе ввода в хроматограф на Pd-катализаторе в токе водорода. Положение двойных связей установили микроозонолизом. Феромоны омыляли 10%-ным раствором NaOH в этаноле при комнатной температуре в течение 24 ч. Геометрию двойной связи устанавливали сравнением tR продуктов щелочного гидролиза и стандартных терпеновых спиртов с помощью ГЖХ на колонке с 15% Карбовакс 20М. В омыляемой фракции феромона степного щелкуна выделена н-мас-ляная кислота и спирт, который под действием бутирилхлорида превращается в активный феромон. Таким образом феромон—сложный эфир. Гидрогенолиз его указал на разветвление, а гидрирование — на наличие двойной связи. Сравнение феромона с бутиратами некоторых терпеновых спиртов по tK и активности указало на то, что феромон степного щелкуна — герани лбу тират. Подобным же образом был выделен и идентифицирован феромон жука-щелкуна кубанского как геранилизовалериат, а Е, Е-фарнезилацетат и нерилизовалериат как феромон щелкуна полосатого [311].
Наибольшее количество исследований проведено с хлопковым долго-
59
носиком A. grand is, феромон которого состоит из четырех (I—IV) компонентов и называется "грандлуром". Для его выделения из самцов испробованы все существующие методы (экстракция из воздуха над живыми насекомыми, экстракциями насекомых хлористым метиленом и их перегонка с паром, извлечение на адсорбционных колонках). Показано, что самым эффективным методом для этого вида насекомых является перегонка с паром пятидневых насекомых или продуктов их жизнедеятельности. Для этого экстракт хлористым метиленом 10 тыс. самцов перегоняли с паром 2 ч. Дистилляты собирали в ловушки, охлаждаемые ледяной водой и ацетоном с сухим льдом последовательно [312]. Очистка дистиллята хроматографией на колонке, заполненной СГ с нанесенным на него Карбоваксом 20М, при градиентном элюировании пентаном, эфиром, метанолом позволила выделить активные фракции смесью пентан — эфир (90 : 10) и пен-тан — эфир (5 : 50) ¦ Более тонкая очистка привела к потере фракциями активности, которая возвращалась при их рекомбинации. Активные фракции анализировали озонолизом, ГЖХ, ЯМР, ИК и ГЖХ—МС и нашли в них четыре компонента I—IV [313, 314]. Структура веществ III и IV была доказана реакцией с ДНФГ, а также превращением II в III под действием двуокиси марганца [314]. Всего за один день самец хлопкового долгоносика вырабатывает около 210 нг феромона [315]. Синтез и испытания всех четырех структур подтвердили правильность идентификации (см. в главе О синтезе феромонов). Для анализа синтетических компонентов грандлюра был предложен метод их ГЖХ-разделения одним вколом в колонку 183 см X 4 мм с 10%QF-1 при 110 С, позволявший анализировать
5 нг I, III и IV компонентов и 10 нг II компонента [316].
Интересно, что в экстрактах самок A. grandis, оЬработанных аналогично экстракту самцов, были обнаружены спирты I и II и /3-кариофилен, смесь которых привлекала исключительно самцов, а добавление к этой смеси а-пинена, мирцена и L-лимонена повышало эффективность смеси для самцов до активности грандлюра для самок. В полевых опытах смесь I, II и углеводородов привлекала особей обоего пола, но менее эффективно, чем грандлюр или смесь грандлюра с углеводородами [317]. ГЖХ—МС исследованиями в летучих веществах самок и самцов A. grandis были обнаружены 26 карбонильных соединений, 23 углеводорода, 12 спиртов,
6 фенолов, 4 эфира, 3 фуриновых соединения, лактон, 33 терпена и 24 ароматических соединения [318].
Феромон, испускаемый самками жука Costelytra zealandica, оказался фенолом, который был выделен из 1500 самок жука полосканием их брюшек в эфире, концентрированием экстракта и сублимацией в приемники, охлаждаемые сухим льдом; очистка сублимата ТСХ в двух различных системах (СНС13, 10% эфира в гексане) привела к единственному пятну с Rf, соответствующим Rf фенола [319]. Экстракт из воздуха летучих веществ над самками жуков содержал тоже только одно активное вещество — фенол [320] .
После того как было обнаружено, что после перегонки с паром самок и самцов долгоносика Cureulio сагуае в дистилляте содержатся 11 соединений, специфичных для самцов, и 4 соединения, специфичных для самок, было предпринято подробное исследование пентанового экстракта особей обоего пола. После очистки экстракта ТСХ в системе хлористый метилен— пентан (3:1) было получено пять фракций, содержащих спирты, альдегиды, триглицериды и углеводороды. Из них фракция 2 (спиртовая), активная в лаборатории, была исследована ГЖХ—МС и оказалась Z-ЗЛ-Диметил-Д1 >0-циклогексанэтанолом [321,322].
