Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лебедева К.В. -> "Феромоны насекомых" -> 25

Феромоны насекомых - Лебедева К.В.

Лебедева К.В., Миняйло В.А., Пятнова Ю.Б. Феромоны насекомых — М.: Наука, 1984. — 269 c.
Скачать (прямая ссылка): feromoninasekomih1984.djv
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 150 >> Следующая

41
20 М при 140° С. Сравнивая результаты ЭАГ-тестирования двухминутных ГЖХ-фракций экстракта и серии стандартов, нашли, что это смесь Z- и Е-тетрадеценилацетатов [123].
Аналогично в ГЖХ-фракциях сырого экстракта P. pyrusana нашли два компонента феромона. При этом для препаративного выделения ЭАГ-активной фракции использовали стеклянную колонку (1,8 м X 4 мм) с 3% OV-1 на Газхроме Q при 160°, а для выделения изомеров положения (Z11TDA и Z9TDA) из нее использовали колонку с 3% OV-101 на Газхроме Q при 140° С [108].
Экстракт третьего—четвертого сегментов брюшка девственных самок Prays citri, очищенный обработкой раствором метабисульфита натрия с последующим добавлением Na2C03, делили на трех колонках SCOT: Карбовакс 20М, Апиезон L и SP216PS при программировании температуры. Одноминутные фракции с каждой из этих колонок биотестировали ЭАГ. Для этого из пипетки с пробой экстракта в гексане (5 нг) упаривали азотом (50 мл/мин) растворитель. Пипетку помещали вертикально над антенной и 3 сек пропускали азот (500 мл/мин) с интервалом в 10 мин. Так как по результатам ГЖХ никакого пика в активной области не было, то о строении активного вещества заключили только по результатам сравнения времени удерживания активной области с временами удерживания и активностью эталонов; им оказался Z7TDA [154]. Таким же путем был найден Z7TDAL в феромоне P. oleae [128].
Анализом ГЖХ экстракта 15 кончиков брюшка самок Hedya nubiferana нашли четыре компонента, содержащиеся в нем в следующем процентном соотношении: 16,3; 10,1,30,0; 43,6 (DDA, E8DDA, Z8DDA и E8E10DDDA). Одновременно по ЭАГ проверили серию додеценолов, додеценилацетатов и додекадиенилацетатов. Максимум активности обнаружили Z8DDA и E8E10DDDA. Активными оказались также E8DDA, E10DDAn Z8E10DDDA. В 100 раз менее активными были Z8DDOL и E8E10DDDOL. По результатам полевых испытаний активность проявилась у Z8DDA и E8E10DDDA (основные компоненты феромона), a DDA и E8DDA проявили синергетические свойства [258].
Идентификация компонентов феромона при одновременном био- и ГЖХ-детектировании
Несомненно более удобным методом идентификации является прием одновременного био- и ГЖХ-детектирования. Для этого осуществляют непосредственное сочленение газового хроматографа с ЭАГ-установкой. Другими словами, хроматограф снабжен двумя детекторами — ПИД и биодетектором. В этом случае целесообразнее пользоваться капиллярной колонкой.
При анализе смывок желез 50 самок Е. ochrogaster на хроматографе с двумя упомянутыми детекторами (сплиттер 10 : 1) на двух капиллярных колонках (22 м X 0,35 мм) с Silar-1 ОС и (50 м X 0,35 мм) с OV-17 показано, что в месте выхода самого активного компонента (Z5DA; 0,3 мВ) на хроматограмме нет пика вещества, а активность второго и третьего пиков — 0,9 мВ (Z5DDA и Z7DDA). Одновременно было показано, что антенна самца из всех испытанных ацетатов лучше всего реагирует на Z5DDA.
В этой же работе был применен оригинальный метод идентификации минорных компонентов феромона с использованием антенн других видов насекомых. Так, известно, что антенна самца A. ipsilon реагирует на Z7DDA, Z8DDA и Z6DDA. Так как антенна A. ipsilon реагировала на экстракт Е.
42
ochragaster, то следует ожидать присутствия этих компонентов в экстракте. В то же время антенна Grapholitha molesta реагирует на Z8DDA, но не реагирует на экстракт Е. ochrogaster, что означает отсутствие Z8DDA в этом экстракте [12]. Этот метод идентификации был также использован при исследовании феромона озимой совки A. segetum. Обычно техникой ГЖХ— ЭАГ со сплиттером между биодетектором и ПИД были идентифицированы Z5DA, Z7DDA, Z9DDA, DDA, E5DDA, Z8DDA. Их присутствие было подтверждено реакцией антенны самца A. Ipsilon на Z7DDA, G. funebrana на Z8DDA и Eupoecilla ambiguella на Z9DDA [26]. Однако следует заметить, что такой метод идентификации не может быть достаточно надежным из-за неуловимо тонких механизмов реакции антенн насекомых на разные вещества и их пороговые концентрации, о которых нам еще пока очень мало известно.
Один из компонентов феромона Е. insulana — E10E12HDDAL был обнаружен методом прямого сочленения капиллярной колонки хроматографа с ЭАГ (51 м X 0,5 мм, SCOT). По времени удерживания на фазе Карбовакс 20М при программировании температуры 100° -*¦ 20°/мин -»¦ 180° можно было заключить, что это соединение должно быть ацетатом. Результаты определения его времени удерживания на разных колонках (Карбовакс 20М, CHDS, SE-30, Апиезон L) натолкнули на мысль о Cj 6-альдегиде с двумя двойными сопряженными связями. Так как в каждой самке меньше, чем 1 нг феромона, его дальнейшая идентификация проводилась сравнением эталонов геометрических изомеров гексадеценаля методом ГЖХ— ЭАГ. Ответы на 5 нг каждого из изомеров гексадеценаля в милливольтах (мВ) составляли: Z7 (0,54), Е7 (0,37), Z9 (0,24), Е9 (0,22), Z 10(1,25), Е10( 1,54), Z11 (2,42), Е11 (2,42), Z12(2,54), Е12(2,56), Z13(0,50), Е13 (1,13). Результаты анализа ГЖХ природного феромона и результаты полевых испытаний синтетических 9,11-, 10,12-, 11,13-и 12,14-гексадекадиена-лей подтвердили, что основной компонент природного феромона — ЕЮ, E12HDDAL [82]. Или, например, сырой экстракт кончиков брюшка яблонной плодожорки L. pomonella делили на полярной (5% CHDMS на Хромосорбе Q, 170°) и неполярной (10% JXR на Хромосорбе Q, 190° С) колонках. Каждую минуту фракции собирали в стеклянные капилляры длиной 30 см. Для проверки активности через капилляр шприцем продували 1 мл воздуха на антенну, вставленную в систему для ЭАГ-анализа. Активными считали фракции с ответом в 5 мВ в сравнении с неактивными (0,5 мВ) [260].
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 150 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed