Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
бактериоскопические, бактериологические, серологические методы
исследования, биопробы. Кроме того, ставятся кожно-аллергические пробы.
Тема 31. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА
ЗООНОЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Программа занятия
1. Изучение схем микробиологической диагностики чумы, туляремии,
бруцеллеза, сибирской язвы, лептоспироза.
2. Бактериологические и серологические исследования при зоонозных
инфекциях.
3. Диагностические, профилактические и лечебные препараты, применяемые
при зоонозных инфекциях.
Демонстрация
1. Мазки, приготовленные из органов зараженных животных и чистых культур
возбудителей зоонозных инфекций.
2. Препарат из культуры лептоспиры в темном поле зрения.
3. Рост Вас. anthracoides на питательных средах.
4. Реакция агглютинации - лизиса лептоспир.
5. Реакция Хсддлсона для серодиагностики бруцеллеза.
6. Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Микробиологическое исследование при чуме. Материал для исследования:
гной из бубона, органы погибших грызунов с подозрением на чумную
инфекцию. Микроскопировать готовые мазки. Поставить предварительный
диагноз. Наметить ход дальнейшего исследования с учетом использования
тестов для дифференциации возбудителя чумы от бактерий псевдотуберкулеза
грызунов,
2. Серодиагностика туляремии. Материал для исследования: сыворотка крови
больного с подозрением на туляремию. Провести учет результатов реакции
агглютинации с парными сыворотками. Сделать заключение.
3. Серологическая диагностика бруцеллеза. Материал для исследования:
сыворотка крови больного с подозрением на бруцеллез. Провести учет
результатов реакции агглютинации Райта. Сделать заключение.
4. Микробиологическое исследование при сибирской язве. Материал для
исследования: содержимое везикул и пустул,- отделяемое карбункула и язвы:
а) микроскопировать готовый препарат. Поставить предварительный диагноз.
Наметить ход бактериологического исследования; б) определить наличие
сибиреязвенного антигена в исследуемом материале (шерсти погибшего
животного) реакцией кольцепреципитации Асколи.
5. Микробиологическая диагностика лептоспироза. Отметить результаты
реакции агглютинации - лизиса лептоспир и сделать заключение.
Микробиологическая диагностика чумы
Возбудитель чумы Yersinia pestis относится к роду Yersinia, сем.
Enterobacteriaceae, в который также включена группа бактерий, вызывающих
иерсиниозы, - Y. pseudotuberculosis,
199
Схема 14. Микробиологическое исследоиавие при чуме
I
Е
3
ё
И
5
S
(X
5 2
о
6 о 2
и
о
X
о
& 3
Ui 2 ° X
2
Я
X
200
Окончательный ответ
Y. enterocolitica. В естественных условиях Y. pestis содержатся у
грызунов, вызывая у них эпизоотии со смертельным исходом. Исключительную
важность приобретает выделение культур чумных бактерий от больных людей,
так как первые случаи заболевания нуждаются в бактериологическом
подтверждении для своевременного принятия эффективных
противоэпидемических мер.
Методические указания
Бактериоскопическое исследование (схема 14). Из исследуемого материала
готовят мазки, окрашивают по Граму и водным раствором метиленового
синего. Бактерии чумы имеют вид палочек овоидной формы (0,5 X 1,7 мкм),
грамотрицатель-ны. В мазках, окрашенных метиленовым синим, хорошо заметно
биполярное распределение краски (рис. 76). Встречаются полиморфные формы.
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки с
питательным агаром. Посевы инкубируют при 25-28°С. Первичное изучение
посевов производят через 10-12 я К этому сроку появляются колонии в виде
"батистового платочка", которые образуют вирулентные R-формы микроба.
Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы колоний. Идентификацию
чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру
роста, антигенным и биохимическим свойствам, чувствительности к
специфическому фагу и биопробе.
На бульоне бактерии чумы образуют пленку со спускающимися нитями,
напоминающими сталактиты; ферментируют многие сахара до кислоты, индола
не образуют, желатин не разжижают. Бактерии чумы содержат групповой
термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный
капсульный антиген, который обнаруживается только у вирулентных штаммов.
В случае исследования материала, взятого у погибших грызунов, проводится
дифференциальная диагностика с бактериями псевдотуберкулеза грызунов
Yersinia pseudotuberculosis на основании характера роста на специальных
средах, ферментации рамнозы, адонита и других признаков (табл. 40).
Биопроба. Проводится для выделения чистой культуры из материала,
загрязненного посторонней микрофлорой. Наиболее чувствительными
лабораторными животными являются морские свинки, которым материал вводят
подкожно. Внутрибрюшинно материал вводят в том случае, если он не
загрязнен другими бактериями. Загнивший материал
201
Таблица 40. Дифференциально-диагностические признаки нозбудителей чумы и
псевдотуберкулеза
