Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Бактериемия при этих заболеваниях, как правило, не возникает.
Лабораторная диагностика проводится бактериологическим методом.
Материалом для исследования являются как испражнения, рвотные массы,
промывные воды желудка больных людей, так и остатки пищи и продуктов, из
которых она была приготовлена. Это необходимо для установления источника
инфекции.
Пищевые интоксикации бактериальной природы возникают при попадании с
пищей в желудочно-кишечный тракт бактериальных токсинов, из которых
наибольшую опасность представляют энтеротоксины Staph, aureus, Cl.
perfringens и особенно ботулонейротоксин Cl. botulinum. Для возникновения
пищевой интоксикации не обязательно присутствие в пищевом продукте живых
возбудителей, так как это заболевание может быть воспроизведено при
помощи чистых токсинов.
Микробиологическая диагностика пищевых отравлений проводится методом
выявления токсинов, а также выделения чистых культур возбудителей -
продуцентов токсинов в остатках пищи и материале, взятом от больных.
Программ" занятая
1. Бактериологическая диагностика пищевых токсикоинфекций, вызванных
сальмонеллами, шигеллами Зонне, эшерихиями и протеем.
2. Определение токсинов Cl. perfringens и Cl. botulinum.
3. Диагностические, профилактические и лечебные препараты, применяемые
при указанных заболеваниях.
Демонстрация
1. Мазки' из чистых культур сальмонелл, шигелл Зонне, эшерихий и протея,
окрашенные по Граму.
2. Мазки из чистых культур токсигенного штамма Staph, aureus, окрашенные
по Граму, Cl. perfringens и Cl. botulinum, окрашенные по Граму и Ожсшко.
3. Реакции нейтрализации токсина Cl. botulinum моновалентными
антитоксическими сыворотками А, В и Е.
4. Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Бактериологическое исследование. Описать характер колоний, выросших на
чашках с дифференциально-диагностической средой после посева испражнений
больного и остатков пищи - возможных источников пищевой токсикоин-фекции.
2. Поставить реакцию агглютинации на стекле с монорецепторными саль-
монеллезными сыворотками.
194
3. Отметить результаты изучения биохимических свойств исследуемой
культуры сальмонелл по ранее засеянному "пестрому" ряду. Сделать
заключение на основании полученных данных.
4. Отметить характер роста посева на питательный агар по Шукевнчу и на
основании данных ранее засеянного "пестрого" ряда определить вид простея.
Сделать заключение.
Методические указания
Пищевые токсикоинфекции. Материал для исследования: фекалии, рвотные
массы, промывные воды желудка больного и остатки пищевых продуктов -
возможные источники и факторы передачи инфекции.
Бактериологическое исследование. Производится путем посева материала на
дифференциально-диагностические среды (Эндо, Плоскирева и др.) для
выделения чистой культуры сальмонелл, шигелл или эшерихий, а также в
конденсационную воду скошенного питательного агара для выделения протея.
После инкубации посевов при 37° С в течение 20-24 ч отмечают цвет колоний
на чашках с дифференциальной средой и наличие "ползучего" роста,
характерного для протея, в пробирке со скошенным питательным агаром.
Подозрительные колонии пересевают на скошенный питательный агар для
получения чистых культур и одновременно ставят с ними реакцию
агглютинации на стекле, используя смеси диагностических сывороток к
разным сероварам сальмонелл. Затем, в зависимости от результатов реакции,
ставят повторную реакцию с тем же материалом и с соответствующими
монорецепторными сыворотками к определенным сероварам сальмонелл. На
следующий день с чистой культурой сальмонелл ставят развернутую реакцию
агглютинации с соответствующей монорецепторной сывороткой и делают посев
на среды "пестрого" ряда. При выделении одного и того же серовара
сальмонелл из организма больных людей и пищевого продукта делают
окончательное заключение об этиологии пищевой токсикоинфекции и источнике
заболевания. Важнейшие биохимические признаки и антигенная структура ряда
сальмонелл приведены в табл. 38Л
При наличии ползучего роста на скошенном питательном агаре из
конденсационной воды петлей берут материал для приготовления препарата
"висячая" капля с целью установления подвижности и для мазка, который
окрашивают по Граму и микроскопируют. Вид протея устанавливают на
основании биохимических признаков после посева выделенной чистой культуры
на среды "пестрого" ряда и других признаков (табл. 39).
Пищевые интоксикации. Материал для исследования: рвотные массы, промывные
воды желудка больных и
8* 195
Таблица 38. Биохимические свойства и антигенная структура сальмонелл
j Группа Вид Ферментация Образо-
вание Антигены
s n О u -s R u лактозы i маннита | ксилозы s r> О & g
О дульцита рамнозы индола HjS H - жгутиковые
О " is 0
ы v> 1 О Я "в •& фаза 2
S. typhimurium + + ± + ± +
1,4 i U
5,12
В S. derby. + + + + + + 1,4
f, g
12
