Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 78

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 72 73 74 75 76 77 < 78 > 79 80 81 82 83 84 .. 96 >> Следующая

агглютинация происходит через 2-3 мин.
Кожно-аллергическая проба. Выпускаются два вида тулярина: для
внутрикожной пробы и ддя накожной. Проба высокочувст-. вительна и дает
положительные результаты у больных, начиная с 3-5-го дня болезни, но
также и у переболевших и вакцинированных, поэтому оценка реакции должна
проводиться с осторожностью
Микробиологическая диагностика бруцеллеза
Возбудители бруцеллеза - бактерии рода Brucella, не включены в
определенное семейство. По происхождению и некоторым биологическим
особенностям различают следующие виды: Br. melitensis - возбудитель
бруцеллеза мелкого рогатого ' скота, Br. abortus - возбудитель бруцеллеза
крупного
204
Схема 16. Микробиологическое исследование при бруцеллезе
. и 0-
U
U
<
Uh
С
Рн
Я
я
О к
се 5
•& В
ет- 3:1 °
Я О D.
з g с S
HioS
О Св Он Он
6
о
X
о
а
> с о ж
Ю
X
Я X х 3 -
&S
3"

Й к * ^ о " та ? 3 о- я з се m s го о 2
Г")
a s ?| . a
с о.
- с; о и
О.'Я
я
Я О
22
Й ><
О 2 С В ___t
03
я
В
се
я
о
Е
О
Я
us
го
се
S
° 1" и се о о. я L-

о • с
п
о
К
ко

я
о,
Е
2
205
Окончательный ответ Больной человек кожно-аллергическая проба с
бруцеллином
Рис. 78. Brucella melitensis (чистая культура).
рогатого скота, Br. suis -возбудитель бруцеллеза свиней. Все три вида
патогенны для человека. Наиболее вирулентным является первый вид; третий
вид вызывает спорадические случаи заболеваний.
Микробиологическая диагностика обычно проводится путем серологических
исследований (реакция Райта и Хеддлсона). К выделению культур бруцелл
прибегают сравнительно редко.
Методические указания
Бактериологическое исследование (схема 16). Для получения гемокультуры 5-
10 мл крови, взятой из локтевой вены больного, засевают в два флакона с
50-100 мл печеночного бульона. Один из них (для выделения культур Br.
melitensis) инкубируют в обычных аэробных условиях, другой (для выделения
первичной культуры Br. abortus) - в атмосфере с 10% С02. В первых
генерациях бруцеллы растут очень медленно, поэтому посевы выдерживают в
термостате не менее месяца. В то же время рост лабораторных культур
наблюдается через 1-2 сут. На агаре бруцеллы образуют бесцветные с
перламутровым блеском колонии, в бульоне - помутнение и слизистый осадок.
В мазках, окрашенных по Граму, обнаруживаются мелкие (от 0,3-0,5 до 1,5
мкм) грамотрицательные коккобактериальные или более удлиненные формы
(рис. 78). Они неподвижны, спор не образуют, в определенных условиях
появляется видимая капсула.
Для быстрой идентификации бруцелл ставят реакцию агглютинации со
специфическими агглютинирующими сыворотками на стекле и определяют
чувствительность к специфическому фагу. Все виды бруцелл не ферментируют
углеводы. Их дифференцируют по образованию H2S, чувствительности к С02,
действию анилиновых красок (основной фуксин и тионин) и другим признакам.
Серодиагностика. Чаще всего используют реакцию агглютинации Райта с
бруцеллезным диагностикумом, которая ставится по типу реакции Видаля (см.
с. 186). Реакция доста-
206
)
точно специфична. Положительные результаты отмечаются спустя. 1-2 нед
после начала заболевания и сохраняются у переболевших многие годы.
Диагностический титр реакции равен 1:200.
Для ускоренной серодиагностики применяется реакция агглютинации
Хеддлсона, которая ставится с неразведенной сывороткой больного и с
концентрированным антигеном - диагностикумом, окрашенным метиленовым
синим.
Обезжиренное квадратное стекло размером 9 X 12 см делят на 5 квадратов, в
которые микропипеткой вносят ингредиенты, как указано в табл. 41. Капли
смешивают палочкой, начиная с минимальной дозы сыворотки. Стекло
осторожно подогревают над пламенем примерно до 37°С в течение 2 мин. При
положительной реакции в первые минуты появляются хлопья синего цвета.
Реакция положительна при наличии агглютинации на ++ в дозах сыворотки
0,02- 0,01 мл.
Кроме того, для серодиагностики бруцеллеза используют РПГА, реакцию
иммунофлюоресценции, опсонофагоцитарную реакцию, РСК, определение
неполных антител и др. Эти серологические реакции обладают достаточно
высокой чувствительностью и специфичностью. В поздние периоды заболевания
процент положительных серологических реакций (агглютинации, РПГА и РСК)
начинает снижаться и большее диагностическое значение приобретают кожно-
аллергическая проба и реакция Кумбса, поэтому комплексный
сероаллергический метод является наиболее надежным в диагностике
бруцеллеза.
Биопроба. Применяется для выделения чистой культуры из материала,
загрязненного посторонней микрофлорой или содержащего небольшое
количество бруцелл. Материал вводят морским свинкам или белым мышам
подкожно в
Таблица 41. Постановка пластинчатой реакции агглютинации Хеддлсона
Квадрат
Ингредиенты, мл 1 2 3 4 5
контроль сыворотки контроль диагностикума
Сыворотка 0,04 0,02 0,01 0,02
Диагностикум Изотонический раствор хло- 0,03 0,03 0,03 - 0,03
рида натрия - - - 0,03 0,03
Предыдущая << 1 .. 72 73 74 75 76 77 < 78 > 79 80 81 82 83 84 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed