Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
вибрионов дают через 36-48 ч на основании комплексного изучения основных
биологических признаков возбудителя.
Трудности при оценке результатов бактериологического исследования
встречаются при выделении атипичных холерных вибрионов и в первую очередь
не агглютинирующихся холерной О-сывороткой (НАГ-вибрионы). НАГ-вибрионы
могут визироваться одним из специфических холерных фагов и обладать
другими свойствами, сходными с холерными вибрионами.
191
Таблица 37. Тесты для дифференциации холерных вибрионов
Тест Классический холерный вибрион Холерный вибрион Эль-Тор
Неагглютн- нирующнеся вибрионы
Агглютинация О-сывороткой + +
Агглютинация типовыми сыворотками Огава и Инаба + +
Лизис фагами: холерный фаг С (фаг IV) + ±
фаг Эль-Тор II - + ±
Агглютинация куриных эритроцитов - + ±
Гемолиз эритроцитов барана - ± ±
Рост иа агаре с 50 ЕД полимиксина - + ±
Гексаминовый тест - + ±
Реакция Фогеса - Проскауэра (образование ацетилметилкарбинола) -
+ ±
Условные обозначения: + наличие признака; - отсутствие признака; ±
признак непостоянный.
Ускоренные методы обнаружения холерных вибрионов. 1.
Иммобилизация вибрионов холернымисыворот-ками и типовыми холерными
фагами. Капли испражнений или материала с поверхности пептонной воды
обрабатывают холерной О-сывороткой, типовыми сыворотками Огава и Инаба
или типовыми холерными фагами. Готовят из них препараты "раздавленная"
капля, которые исследуют в микроскопе, снабженном темнопольным или
фазово-контрастным устройством. В положительном случае через 3-*т5.мин
движение вибрионов прекращается.
2. И.ммунофлюоресцентный метод. Препараты из исследуемого материала
обрабатывают флюоресцирующей противохолерной сывороткой и исследуют в
люминесцентном микроскопе. Положительным результатом считается
обнаружение в препарате даже единичных вибрионов с ярким желто-зеленым,
свечением в виде блестящего ободка по периферии клетки. Положительный
результат можно получить через 1-2 ч после начала исследования при
концентрации вибрионов не менее 10е клеток в 1 мл, поэтому рекомендуется
предварительное подращивание материала на питательных средах.
Серодиагностика. Серологическое исследование является вспомогательным и
применяется для ретроспективной диагностики холеры, выявления
вибриононосителей и оценки напряженности постинфекционного и
поствакцинального иммунитета. Для этого обычно ставят реакцию
агглютинации или РПГА, а также определяют вибриоцидные антитела в реакции
лизиса in vitro.
192
Диагностические, профилактические и лечебные
препараты
Противохолерная агглютинирующая О-сыворотка, типовые сыворотки Огава и
Инаба. Получены из крови кроликов, иммунизированных холерными вибрионами.
Применяются для серологической идентификации и типирования холерных
вибрионов в реакции агглютинации.
Холерный фаг. Типовые холерные фаги применяются для идентификации и
типирования холерных вибрионов. Поливалентный холерный бактерйофаг
используется для лечебнопрофилактических целей.
Холерная вакцина. Взвесь убитых холерных вибрионов. Применяется для
активной иммунизации против холеры. Готовится из вибрионов Эль-Тор и
классических холерных вибрионов серотипов Инаба и Огава.
Холероген-анатоксин. Взвесь убитых холерных вибрионов, выращенных в
жидкой питательной среде. Препарат очищен от балластных веществ,
выпускается в сухом виде. Применяется для специфической профилактики
холеры.
Антибиотики: тетрациклин, морфоциклин, сигмамицин.
Тема 30. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА
ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ И ИНТОКСИКАЦИЙ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПРИРОДЫ
Наиболее распространенными возбудителями пищевых токси-коинфекций
являются сальмонеллы - Salmonella typhimurium, S. enteritidis, S.
choleraesuis, S. heidelberg, S. anatum, S. derby. Реже эти заболевания
вызываются Е. coii, Proteus vulgaris, Proteus morganii и другими
энтеробактериями.
Патогенез и клиническая картина пищевых токсикоинфекций определяются
проникновением в желудочно-кишечный тракт большого количества
соответствующих бактерий с зараженными пищевыми продуктами (мясо, рыба),
подвергшимися недостаточной термической обработке. При этом сохранившие
жизнеспособность бактериальные клетки быстро размножаются в благоприятных
условиях. Одновременное проникновение в кишечник массивной дозы
возбудителя, его последующее размножение и разрушение бактериальных
клеток приводят к освобождению значительного количества эндотоксина,
оказывающего воздействие на интрамуральный нейрорецепторныи аппарат
тонкой кишки, периферические сосуды брюшной полости. Это сопровождается
нейродистрофическими изменениями в стенке кишки и поражением клеток
других органов. При пищевых токсикоинфекциях освобождение желудочно-
кишеч-
8-639
193
ного тракта от возбудителей во многих случаях происходит довольно быстро,
иногда через несколько часов после начала заболевания. Однако в ряде
случаев сальмонеллы длительно, в течение нескольких недель и месяцев,
сохраняются в кишечнике, выделяясь с испражнениями бактерионосителя
