Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Признак Y. pestis Y. pseudotube7-culosis
Подвижность + при 22°С
Рост на голодном (без пептона)3% агаре - +
Уреазная активность - +
Лизис'фагами;
Y. pestis + -
Y. pscudotuberculosis - +
Наличие бактериоциногенных (пестицино-
генных) плазмид + -
Условные обозначения те же, что и в табл. 35.
втирают морской свинке в выбритый участок кожи в области живота. После
гибели животных (на 3-7-й день, в зависимости от способа введения
материала) делают вскрытие, отмечают патологические изменения органов и
производят бактериологическое исследование по схеме 14.
Ускоренные методы лабораторной диагностики. 1. Иммунофлюоресцентный метод
позволяет обнаружить присутствие возбудителя как в патологическом
материале, так и в объектах окружающей среды (вода, воздух), а также в
пищевых продуктах и эктопаразитах. С этой целью используют люминесцентную
видоспецифическую противочумную сыворотку, люминесцентные
противокапсульную и противосо-матичес^ую сыворотки.
2. РТПГА применяется для обнаружения антигенов бактерий чумы в
исследуемом материале с помощью стандартной противочумной сыворотки,
антитела которой нагружены на эритроциты.
Микробиологическая диагностика туляремии
Возбудитель туляремии Francisella tularensis относится к роду
Francisella, не включенному в определенное семейство. В естественных
условиях встречается у грызунов, вызывая у них смертельную инфекцию. Для
диагностики туляремии у людей обычно применяют кожно-аллергическую пробу
и серологические реакции. Микробиологическая диагностика проводится в
специальных лабораториях путем заражения лабораторных животных, так как
непосредственное выделение возбудителя на питательных средах из крови или
другого материала, взятого от больных людей, удается редко.
202
Ответ
2-й n an
Вскрытие трупа
Схема 15. Микробиологическое исследование при туляремии
Материал Содержимое бубонов, кровь, органы животных Сыворотка крови
I I I
Бактериоскопи- Биопроба и бактериологическое Серодиагностика
ческое исследо- исследование -
вание I
i 1
I-й этап Мазок, окраска Заражение морской свинки Развернутая 1*ПГА
по Граму реакция аг-
глютинации
Ответ
Мазки, окраска по Граму и Романовскому - Г имзе
Ответ
3-й этап
Посевы на свернутую желточную или другие среды
Характер роста Мазок, окраска по Г раму
Реакция агглютит нации с противо-туляремийной сывороткой
Больной человек
Окончательный ответ -> кожно-аллергическая проба с тулярином
Методические указания
Бактериоскопическое исследование (схема 15). Из исследуемого материала
готовят мазки, окрашивают по Граму и метиленовым синим. Бактерии
туляремии весьма полиморфны. В чистой культуре они представляют собой
очень мелкие микроорганизмы (0,3-0,5 мкм) коккобактериальной формы (рис.
77). В мазках из органов преобладают палочковидные формы. Спор не
образуют, имеют небольшую капсулу, неподвижны, грамотрицательны, иногда
выражена биполярная окраска.
Бактериологическое исследование и биопроба. Применяются для выделения
чистой культуры бактерий туляремии. Наиболее чувствительными животными
являются белые мыши и морские свинки, которые заболевают со смертельным
исходом даже при подкожном введении единичных бактерий. Выделение
бактерий туляремии проводят на свернутой яично-желточной среде,
глюкозоцистиновом кровяном агаре. Вирулентные штаммы образуют S-формы
колоний - мелкие, гладкие, беловатого цвета с голубоватым оттенком.
203
Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных
клеток, характеру роста, биохимическим и антигенным свойствам. Бактерии
туляремии в отличие от бруцелл разлагают глюкозу, мальтозу и маннозу до
кислоты. Биохимические свойства этих бактерий выявляются на специальной
плотной среде с ограниченным содержанием белка. Бактерии туляремии
содержат оболочечный антиген, с которым связаны их вирулентные и
иммуногенные свойства, и О-соматический антиген. По антигенным свойствам
близки к бруцеллам.
Серодиагностика. Ставится реакция агглютинации с туляре-мийным
диагностикумом по типу реакции Видаля (см. с. 186). Относительно позднее
появление агглютининов в крови (на 2-й неделе болезни) затрудняет
применение этой реакции для ранней диагностики, однако их длительное
сохранение делает возможной ретроспективную диагностику. Диагностический
титр реакции равен 1:100. Обязательно прослеживается нарастание титра
агглютинации (в парных сыворотках). Наиболее чувствительным методом
серодиагностики туляремии является РПГА, которая бывает положительной в
конце 1-й -начале 2-й неделе заболевания. Титры сывороток в разгар
заболевания достигают 1:1280-1:2560 и выше.
Для ускоренной диагностики применяется кровяно-капельная реакция: кровь
из пальца больного наносят на обезжиренное- предметное стекло, добавляют
каплю дистиллированной воды (для лизиса эритроцитов), вносят каплю
диагностикума и смешивают стеклянной палочкой. При наличии в крови
агглютининов в диагностическом титре (1:100 и выше) в капле немедленно
наступает агглютинация диагностикума; при титрах ниже диагностических
