Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
не менее 10 проростков.
Отрезки листьев длиной 1 см раскладывают в кювету на слой ваты, смоченной
раствором бензимидазола. Каждый сорт представлен отдельной группой
отрезков также с соответствующей этикеткой. В разных местах кюветы
помещают отрезки листьев универсально восприимчивого сорта для контроля
успешности заражения. В одну кювету можно поместить отрезки не менее 100
сортов. Заражение производят опрыскиванием суспензией спор,
представляющих либо популяцию, либо отдельный штамм, в зависимости от
задачи опыта. Кювету закрывают стеклом и через сутки ставят на свет.
Через 8 дней учитывают тип инфекции. Сорта с типом инфекции 0, 1, 2
считаются устойчивыми; с типом 3, 4, X - восприимчивыми.
XY.6.2. ОЦЕНКА СПЕЦИФИЧЕСКОЙ УСТОЙЧИВОСТИ
ЯЧМЕНЯ К ВОЗБУДИТЕЛЮ СЕТЧАТОЙ ПЯТНИСТОСТИ
Растения ячменя подготавливают для оценки специфической устойчивости к
возбудителю сетчатой пятнистости так же, как и для оценки устойчивости к
возбудителю бурой ржавчины. Отрезки листьев инокулируют пастеровской
пипеткой, нанося каплю суспензии на каждый отрезок. Размер отрезков
листьев ячменя, подготовленных к инокуляции, 1,5-2 см. Для инокуляции
используют суспензию концентрацией около 5000 спор/мл. Учет типа реакции
проводят на 4-5-е сут по описанной выше шкале (см. раздел XV.4.2).
Для определения эффективности источника устойчивости к определенной
популяции паразита проводят тестирование к нему большого количества
клонов по вирулентности.
XV.6.3. ОЦЕНКА НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ УСТОЙЧИВОСТИ
РАСТЕНИЙ И АГРЕССИВНОСТИ ШТАММОВ ГРИБА
Критериями неспецифической устойчивости растений и агрессивности паразита
служат показатели его репродуктивной способности. К ним относится урожай
спор на единицу листовой поверхности растения,
3G9
выраженный в количестве пустул (или инфекционных пятен) и в количестве
спор на пустулу (пятно). Другим показателем неспецифической устойчивости
и агрессивности является длительность латентного периода.
XV.6.3.1. ОЦЕНКА НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ УСТОЙЧИВОСТИ
К БУРОЙ РЖАВЧИНЕ
Неспецифическая устойчивость растений проявляется как в стадии
проростков, так и в стадии взрослых растений. В процессе онтогенеза
уровень неспецифической устойчивости меняется. Это изменение происходит
разными темпами и выражено в разной степени у разных сортов, поэтому
иногда оказывается, что сорта, устойчивые в стадии проростков, утрачивают
это свойство в стадии взрослых растений и наобо-
Та блица 32. Оценка неспецифической устойчивости пшеницы сорта Моцинаве к
бурой ржавчине
Среднее количество пустул па газон Количесво спор в
пустуле Индекс устойчи- вости
Сорт абсо- лютное по отношению к стандарту абсо- лютное по
отношению к стандарту
Моцинаве Саратовская 29 (проростки) - стандарт 200 1555 0,16 1,0
256 493 0,52 1 0,083 1
рот. Поэтому для определения неспецифической устойчивости следует
пользоваться растениями в фазе флаг-листа. При этом большое значение
имеет выбор инфекционного материала. Таковым могут служить споры одного
штамма гриба, одинаково вирулентного ко всем испытуемым сортам. Поскольку
неспецифическую устойчивость определяют лишь при сравнении сортов,
необходимо иметь сорт-стандарт, который удобно использовать в стадии
проростков.
Растения выращивают в климатической камере или в оранжерее. Для опыта
используют флаг-листья 2-3-дневного возраста. Листья укладывают в чашки
Петри, как это описано в разделе XV.3.1. Каждый сорт должен быть
представлен 7-10 газонами. Каждый газон опрыскивают 0,5 мл споровой
суспензии. Концентрация суспензии (5-10) • 103 живых спор/мл. Через 9
дней учитывают количество пустул на газон и урожай спор на пустулу. Для
учета последнего показателя аккуратно отсекают части листьев с пустулами
и погружают их в пробирку. Желательно, чтобы общее количество пустул было
не менее 300. Затем к отрезкам листьев приливают 2 мл раствора Твина-80 и
каждую пробирку энергично встряхивают в течение 2 мин. После этого в
камере Горяева подсчитывают концентрацию спор в 1 мл полученной
суспензии. Зная число пустул, приходящееся на 1 мл суспензии, и
концентрацию спор в суспензии, легко подсчитать число спор в одной
пустуле. Среднее число пустул выражают в относительных единицах к
соответствующим данным сорта-стандарта. Произведение полученных
относительных показателей и является индексом устойчивости. В качестве
примера приве-
370
дено вычисление индекса неспецифической устойчивости сорта Моцина-ве
(табл. 32). Стандартом при оценке служил сорт Саратовская 29 в стадии
проростков.
XV.6.3.2. ОЦЕНКА АГРЕССИВНОСТИ ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ
БУРОЙ РЖАВЧИНЫ И СЕТЧАТОЙ ПЯТНИСТОСТИ ЯЧМЕНЯ
Агрессивность штаммов оценивают по показателям эффективности
клонирования, урожаю спор в одной пустуле и продолжительности латентного
периода по отношению к одному и тому же сорту растения. При оценке
агрессивности штаммов суспензии их спор, приготовлен-
Таблица 33. Характеристика агрессивности штаммов возбудителя бурой
ржавчины
Мутантный штамм Латентный период, ч Число спор в пустуле
