Воспаление руководство для врачей - Серов В.В.
ISBN 5-25-02111-5
Скачать (прямая ссылка):
Начальное прикрепление и распластывание тромбоцитов на суб-
56
Рис. 3.4. Взаимодействие фактора Виллебранда (ФВ), фибриногена (ФБ), тромбоспондина (ТС) и фибронектина с гликопротеидными комплексами (ГП Ib/IX и ГП Ilb/IIIa) поверхности тромбоцитов.
эндотелии регулирует синтезируемый клетками эндотелия белок ФВ, служащий кофактором адгезии тромбоцитов к субэндотелию артерий и сосудов микроциркуляции, а также переносчиком фактора VIII свертывания крови. При воспалении освобождение ФВ из активированных клеток нарушается: освобождаемый моноцитами медиатор воспаления ИЛ-1 снижает уровень мРНК, кодирующий ФВ, И, соответственно, уровень этого белка во всех компартментах.
Функции ФВ обусловлены существованием в его структуре нескольких доменов, отвечающих за связывание фактора с белками и рецепторами клеток, ФВ — типичный пример модулярных гликопротеидов (ГП), характеризующихся тем, что они имеют функ-
57
циональные единицы, соответствующие структурным доменам, относительно устойчивым к протеиназам, но соединенным участками, чувствительными к протеолизу. В структуре ФВ найдены домены, определяющие способность белка связываться с фактором VIII свертывания крови, клеточными рецепторами-гликопротеидами (ГП) — lb и Ilb/IIIa, гепарином, коллагеном, клетками (Girina J. P. et al., 1987]. Домены состоят из нескольких пептидных блоков с гомологичной последовательностью. В структуре домена, связывающего ФВ с рецепторным комплексом гликопротеида Ilb/IIIa, обнаружен уникальный трипептид, состоящий из остатков аргинина (Apr), глицина (Гли) и аспарагиновой кислоты (Асп), идентичный «узнающему» гликопротеид Ilb/IIIa реактивному центру в структуре других адгезивных белков — фибриногена, фибронектина и тромбоспондина.
Рецептор ФВ на поверхности тромбоцитов — ГП lb — гетеродимер, который образует на мембране клетки комплексы с ГП IX, а также актинсвязывающим белком (АСБ) и филаментами актина цитоскелета тромбоцита. Благодаря доменной структуре ФВ способен связывать коллаген субэндотелия и рецептор ГП lb тромбоцитов, выполняя функции «мостика» между клетками и стенкой сосуда на ранней, контактной, стадии адгезии (рис. 3.4). За этой стадией следует вторая — распластывание тромбоцитов на субэндотелии, что обусловлено изменением цитоскелета клеток. Эта стадия обеспечивается взаимодействием ФВ с комплексом ГП Ilb/IIIa, организуемым на поверхности клеток, активированных тромбином (или АДФ). Активация тромбоцитов индуцируется связыванием агониста (трЬмбина) с рецептором ГП lb на поверхности клетки и осуществляется в результате генерации внутриклеточных сигналов в цикле реакций, опосредованных гидролизом фосфоинозитидов с образованием вторичных мессенджеров — диацилглицерина, активирующего протеинкиназу С, и инозитол-1,4,5-трифосфата, мобилизирующего внутриклеточный кальций. Происходят быстрая полимеризация и реорганизация актина, как мембранного скелета, так и цитоплазматического, образование филоподий, централизация гранул, которая обеспечивается взаимодействием актина с фосфорилированным миозином.
При активации клеток активируются кальцийзависимые протеази, происходят кластерирование комплексов ГП Ilb/IIIa, перераспределение их в филоподии и экспрессия на мембране, нарушение связывания ГП lb с мембранным скелетом, потеря способности ГП lb связывать лиганды (ФВ, тромбин) и в конце / концов разрушение мембранного скелета и распластывание тромбоцитов [Fox J. Е. В., 1987]. Структурные изменения тесно связаны с реакцией высвобождения содержимого «-гранул, которые секре-тируют ФВ, фибриноген, тромбоспондин, фактор V свертывания крови, а также тромбоцитарный фактор роста (ТФР) — хемоат-трактант для эозинофилов и индуктор миграции и пролиферации гладкомышечных клеток из медии в интиму; тромбоцитарный фактор 4 (ТФ4) и р -тромбоглобулин с провоспалительными свой-, ствами. Из плотных гранул секретируются АДФ и серотонин.
58
Арахидоновая кислота под влиянием циклооксигеназ превращается в тромбоксан Аг — мощный индуктор необратимой агрегации, а липоксигеназ — в 12-гидроксиейкозатетраеновую кислоту (12-НЕТЕ) — хемоаттрактант нейтрофилов, включающихся в микро-тромбы в очаге воспаления [Marcus A. J., 1988 ]. Кроме того, освобождается ФАТ — индуктор необратимой агрегации и медиатор воспалительных процессов и аллергических реакций (см. ниже).
Таким образом, для связывания ФВ с тромбоцитами существуют два механизма: один опосредованный ГП lb и другой — ГП Ilb/IIIa. Особенность последнего механизма в том, что в ответ на действие индуктора мобилизуется Са , ингибируется цАМФ и из гранул секретируется АДФ. Зависимое от АДФ и Са2+ функционирование рецепторного комплекса ГП Ilb/IIIa характерно для связывания другого адгезивного белка — фибриногена.
Фибриноген — крупный модулярный димер, который состоит из трех пар неидентичных полипептидных цепей, соединенных на аминоконцевом участке в центральный домен Е. Этот домен связан с двумя концевыми D-доменами гибкими участками, образованными скрученными вместе Аа-, By?- и у-цепями [Doolittle R. F., 1984]. Превращение фибриногена в фибрин завершает процесс свертывания крови и требует значительно больших количеств тромбина, чем активация тромбоцитов (см. табл. 3.2). Очень низкие концентрации тромбина (10 нМ), которые образуются за несколько секунд эндо-телийзависимым механизмом, взаимодействуют с рецептором на тромбоците (ГП lb) и индуцируют экспрессию на поверхности клеток рецептора фибриногена — комплекса ГП Ilb/IIIa. Экспрессия комплекса ингибируется агентами, которые увеличивают концентрацию цАМФ в клетке и подавляют метаболизм арахидоновой кислоты, ведущей к синтезу тромбоксана Аг. Фибриноген плазмы и секре-тируемый а-гранулами тромбоцитов взаимодействует с комплексом ГП Ilb/IIIa определенными участками в доменах D и Е. В Аа-цепи локализован уникальный пептид Арг-Гли-Асп, который отвечает за связывание фибриногена и других адгезивных белков с рецептором. Фибриноген выполняет функции зависимого от кальция мостика в связывании активированных тромбоцитов, опосредуя их первичную обратимую агрегацию (см. рис. 3.4).
