Антифосфолипидный синдром - Насонов Е.Л.
ISBN 5-98216-010-5
Скачать (прямая ссылка):
Согласно международным рекомендациям, при интерпретации результатов следует использовать не абсолютные значения уровня аКЛ в GPL/MPL, а уровень позитивности (таблица 8.2).
-е-
Таблица 8.2. Границы степеней позитивности при оценке результатов определения аКЛ
Степень позитивности Изотип аКЛ
IgG аКЛ (в GPL) IgM аКЛ (в MPL)
Высокопозитивные Более 65 Более 45
Умеренно позитивные 30—65 35—45
Низкопозитивные 23—30 26—35
Негативные Менее 23 Менее 26
-е-
Другой подход к анализу диагностической точности ИФМ определения аФЛ связан с построением графика характеристических кривых (ROC-curve, receiver-operator characteristic curve) на основе расчета операционных характеристик теста (чувствительность, специфичность, прогностическая ценность положительных и отрицательных результатов). При построении графика по оси абсцисс откладывают частоту ложнопо-ложительных результатов (1-специфичность, %), а по оси ординат — частоту истинно положительных результатов (чувствительность, %)14-16. Значения чувствительности и соответствующие им доли ложноположи-тельных результатов определения аФЛ, рассчитанные по всему диапазону точек разделения между нормой и патологией, наносятся на плос-
SHS-OOO4.qxd 21.11.2006 16:56 Page 21*4
14
Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром.
кость и соединяются сплошной линией. Точка, наиболее близкая к перегибу графика, рассматривается как оптимальное соотношение чувствительности и специфичности. Выбор точки разделения делается с учетом соотношения ложноположительных и ложноотрицательных результатов. В ряде случаев вычисляется коэффициент вероятности, т.е. соотношение между вероятностью наличия АФС до и после получения результатов тестирования аФЛ, который может определяться как для значений аФЛ, стратифицированных по высоким, средним, низким и нормальным титрам, так и для отдельных точек разделения ''cutoff '' (по формуле чувстви-тельность/1-специфичность)1, 14. Однако большинством авторов исследуется прогностическая ценность результатов определения аФЛ, в значительной мере зависящая от распространенности АФС в популяции. J.-C. Wasmuth и соавт.15 применяли анализ ROC-кривых у 144 больных с подозрением на АФС при изучении диагностической точности 23 коммерческих тест—систем для определения аКЛ и а?2-ГП-I. Диагностическая точность большинства методов определения аКЛ и а?2-ГП-I изотипов IgG и IgM возрастала по мере увеличения числа клинических критериев, использовавшихся для постановки диагноза АФС. В том случае когда диагноз АФС базировался на двух или трех клинических признаках, типичных для АФС, чувствительность тестирования аКЛ и а?2-ГП-I составляла не более 67%, площадь под ROC-кривой (area under curve — AUC) — от 0,60 до 0,72. Наиболее высокая диагностическая точность тест-систем для иммуноферментного анализа аКЛ и а?2-ГП-I наблюдалась при использовании четырех и более клинических критериев АФС (чувствительность — до 100%, площадь под кривой — более 0,8), что связано с уменьшением числа ложноотрицательных результатов. По данным J.M. Musial и соавт.16, анализ характеристических кривых позволяет установить оптимальные критериальные значения аФЛ, связанные с основными клиническими симптомами АФС. При исследовании клинического значения аФЛ у 204 больных АФС положительные результаты тестирования ВА ассоциировались с высоким риском развития тромбозов (OF: 3,04; 1,5—6,2; доверительный интервал — ДИ — 95%) и рецидивирующих потерь плода (OF: 8,7; 2,8—26,7; ДИ — 95%). Анализ ROC кривых показал, что для прогнозирования тромбозов наиболее точным тестом является
SHS-OOO4.qxd 21.11.2006 16:56 Page 2155
15
ГЛАВА 8. Клиническое значение антифосфолипидных антител
исследование IgG аКЛ ("cutoff>17,2 GPL; OP: 3,69; 1,8—7,4; ДИ — 95%); рецидивирующих потерь плода — IgG аФИ (фосфатидилинозитол) ("cut-off">22,1 ед.; OR: 6,21; 2,1—18,5; ДИ — 95%), IgG abUI и IgG ар^ГП-I; тромбоцитопении — IgM аФИ ("cutoff>6,7 ед.; OP: 1,9; 1,04—3,4; ДИ — 95%). При этом у 6,6% больных с клиническими признаками АФС и негативными результатами тестирования на ВА и аКЛ обнаружены другие субтипы аФЛ, главным образом IgM аФИ.
В настоящее время предложено большое количество "home made" методик и коммерческих тест-систем для иммуноферментного анализа аКЛ. Несмотря на стандартизацию основных методических аспектов ИФМ определения аКЛ, полученные результаты нередко имеют противоречивый характер. Так, по данным многоцентрового исследования, частота обнаружения аКЛ в популяции при использовании 9 различных коммерческих тест-систем варьировала от 31 до 60% для IgG аКЛ и от 6 до 50% для IgM аКЛ. При этом наклон графика линейной регрессионной зависимости результатов измерения концентрации аКЛ в единицах GPL и MPL с помощью стандартов, предоставленных Antiphospholipid Standartisation Laboratory, и калибраторов тест-систем составлял 0,159— 0,93 для IgG аКЛ и 0,236—0,836 для IgM аКЛ17. Имеются также данные о более высокой вариабельности операционных характеристик шести коммерческих и одной "home made" тест-систем для определения IgG и IgM аКЛ по сравнению с пятью коммерческими тест-системами на IgG- и IgM ар2-ГП-Р8. Хорошая воспроизводимость результатов в значительной степени зависит от четкого выполнения ряда рекомендаций, разработанных для иммуноферментного анализа аКЛ. Перед внесением в лунки полистироловых микроплат КЛ растворяют в этаноле либо в смеси этанола и хлороформа. Для иммобилизации КЛ на твердой фазе лунки планшета высушивают в вакууме либо в течение 18 часов при 4°С. Предотвращение липидного окисления с помощью азота на данном этапе является спорным вопросом, так как окисление КЛ в целом способствует увеличению его отрицательного заряда и связывающей активности.
