Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Насонов Е.Л. -> "Антифосфолипидный синдром" -> 88

Антифосфолипидный синдром - Насонов Е.Л.

Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром — М.: Литтерра, 2004. — 440 c.
ISBN 5-98216-010-5
Скачать (прямая ссылка): antisindrom2004.pdf
Предыдущая << 1 .. 82 83 84 85 86 87 < 88 > 89 90 91 92 93 94 .. 184 >> Следующая

В ряде случаев коммерческие препараты могут подвергать-
ся частичному расщеплению на уровне фрагмента Lys317-Thr318, находящегося рядом с фосфолипидсвязывающим сайтом Cys281-Cys288 V домена, что приводит к существенной потере функциональной активности р2-ГП-Р7. Наряду с этим обнаружена способность плазмина и фактора Ха расщеплять данный фосфолипидсвязывающий участок Р2-ГП-Р8. Хотя ар2-ГПЛ являются главным образом низкоаффинными антителами, которые проявляют функциональную активность при условии бивалентного связывания и высокой плотности антигена, иммобилизированного на поверхности облученных микроплат, имеется небольшое количество высокоаффинных антител, взаимодействующих с человеческим или бычьим р2-ГП-Г адсорбированным на необработанных микроплатах39. По данным R.A.S. Roubey и соавт.36, связывающая активность человека проявляется при концен-
трации р2-ГПЛ от 1 до 5 мкг/мл, в то время как J. Guerin и соавт.40 и R.R. Forastiero и соавт.41 использовали концентрацию в 20 раз
выше. По мнению T. Koike и E. Matsuura42, высокоаффинные мыши-
SHS-OOO4.qxd 21.11.2006 16:56 Page 21
ГЛАВА 8. Клиническое значение антифосфолипидных антител
ные моноклональные антитела одинаково эффективно связываются с ?2-ГП-I, адсорбированным на поверхности необработанных и облученных микроплат, а а?2-ГП-I человека не взаимодействуют с ?2-ГП-I, покрывающим лунки необработанных микроплат. Для эффективного связывания с антителами важное значение имеют распределение и плотность ?2-ГП-I на твердой фазе, обеспечивающие оптимальное расстояние и корректную пространственную ориентировку каждого его эпитопа относительно молекул а?2-ГП-I. Показано, что димериза-ция ?2-ГП-I вызывает выраженное повышение аффинности поликло-нальных а?2-ГП-I у больных АФС, при этом Fab' фрагменты а?2-ГП-I не реагируют с нативным и димеризованным ?2-ГП-I35, 43. С другой стороны, нельзя исключить экспрессию ранее скрытых эпитопов ?2-ГП-I в результате конформационных изменений, индуцированных связыванием с а?2-ГП-I42.
Результаты иммуноферментного анализа а?2-ГП-I могут варьировать в зависимости от типа буферного раствора, применяемого для нанесения антигена на поверхность микроплат. При разведении ?2-ГП-I карбонатным буфером наблюдается более высокая чувствительность определения а?2-ГП-I, чем при использовании Трис-буфера44. Выявление низкого и неспецифического связывания а?2-ГП-I обусловлено реагированием антител больных АФС не только с ФЛ и ?2-ГП-I, но и с широким спектром белков (протромбин, аннексин V, белок С, белок S), которые могут присутствовать в тестируемых сыворотках и связываться с незаблокированными участками на дне лунок. Однако в целом данная проблема имеет большее значение для иммуноферментного анализа аКЛ, при котором указанные сывороточные факторы могут содержаться как в исследуемых сыворотках, так и в фетальной бычьей сыворотке. Наряду с этим связывающая активность а?2-ГП-I зависит от количества и продолжительности отмывок, так как каждый цикл отмывки может приводить к кумулятивному снижению числа связавшихся низкоаффинных а?2-ГП-I и общему уменьшению чувствительности ИФМ определения а?2-ГП-I.
Популяционные исследования предсказательной ценности положительных результатов иммуноферментного анализа аКЛ и а?2-ГП-I для
SHS-OOO4.qxd 21.11.2006 16:56 Page 22
20
Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром.
диагностики АФС показали, что аКЛ в целом имеют низкую чувствительность и специфичность, а ар2-ГПЛ — низкую чувствительность, но высокую специфичность относительно вероятности возникновения тромбозов при АФС1.
Таким образом, лабораторная диагностика АФС должна основываться на определении аФЛ в сыворотке крови с обязательным использованием комплекса методов, включая иммуноферментный анализ аКЛ, исследование ВА с помощью коагулологических тестов и иммуноферментный анализ ар2-ГП-Т аКЛ — чувствительный, но неспецифический маркер АФС, уровень которого может варьировать из-за низкой межлабораторной сопоставимости результатов и различий в используемых тест-системах. Наличие у больных АФС связи между повышением уровня аКЛ и увеличением риска развития тромбозов не исключает значения низкопозитивных, ложнополо-жительных результатов тестирования аКЛ как потенциальных тромбоген-ных факторов при атеросклерозе и других заболеваниях, не связанных с АФС. Предсказательная ценность положительных результатов исследования ар2-ГПЛ для постановки диагноза АФС выше, чем у аКЛ и ВА, однако для широкого использования в качестве лабораторного критерия
диагностики АФС необходима дальнейшая стандартизация ИФМ определения данного показателя на международном уровне. Общепринятым лабораторным методом диагностики АФС по-прежнему остается стандартный ИФМ, выявляющий р2ГП-!-зависимые аКЛ (глава 9).
аКЛ класса IgA
Поскольку данные, касающиеся клинического значения IgA аКЛ при АФС, противоречивы, а метод не стандартизован45-47, определение IgA аКЛ не рекомендуют использовать для диагностики АФС. Увеличение концентрации IgA может вести к ложноположительным результатам при определении IgA аКЛ48. В целом IgA аКЛ, как и аКЛ других изотипов, связываются с кардиолипином при участии р2-ГП-Р9. Хотя при наличии в крови IgA аКЛ обычно определяются и IgM аКЛ, и IgG, иногда возможно изолированное выявление IgA аКЛ14, 50-52. Частота обнаружения IgA аКЛ при СКВ колеблется от 1 до 44%, а при первичном АФС — от 20 до 30%.
Предыдущая << 1 .. 82 83 84 85 86 87 < 88 > 89 90 91 92 93 94 .. 184 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed