Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Степанов В.М. -> "Молекулярная биология. Структура и функция белков" -> 79

Молекулярная биология. Структура и функция белков - Степанов В.М.

Степанов В.М. Молекулярная биология. Структура и функция белков — М.: Высшая школа, 1996. — 335 c.
ISBN 5-06-002573-Х
Скачать (прямая ссылка): strukturifunkciibelkov1996.djvu
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 140 >> Следующая

СН<
+ Н2О2
CHS
s+-o-
сн2
сн2
сн2
сн2
-NH-CH-C0-
-м-сн-со-
Метионинсульфоксид
В ряде случаев эта реакция протекает даже под действием кислорода воздуха. В более жестких условиях, например при действии над-муравьиной кислоты, окисление проходит глубже и приводит к ме-тионинсульфону:
СНз
СН,
СН2
+ HC000H
Надмура-
вьиная
кислота
-NH-CH-C0-
СНз
I
0=S=fl
I
сн2
. 1
СНг
I
-NH-СИ—СО-
Метионинсульфон
Для модифицирования остатков метионина чаще, однако, применяют алкилирующие агенты, например уже упоминавшийся р-бромфен-ацилбромид или о-галоидзамещенные кислоты, в частности иодуксус-ную кислоту или ёе амид. При этом характерно, что сера метионина реагирует с такого рода соединениями даже в слвбокислой среде, когда большинство других нуклеофильных групп белка» в частности имидазольные группы гистидина, в реакцию не вступают, будучи протонированы:
191
-NH-CH-CO
-rfffl-CHHJO-
S-Карбоксиметилметионин
Аналогично протекает реакция остатков метионина с а-бромкетонами.
9.2.5, Модификация остатков цистеина
/
I*. ¦ • , _ «
Сульфгидрильные группы остатков цистеина веська реакционноспособны и могут участвовать как в реакциях замещения в качестве нуклеофильного компонента, чему благоприятствует их диссоциация с образованием тиолйт-иона (рКа около 8), так й подвергаться окислению или образовывать прочные соли с ионами тяжелых металлов.
Алкилирование таоловых групп. Тиоловые группы легко алкилиру-ются в слабощелочной среде.. Например, при действии. иодуксусной кислоты остатки цистеина превращаются в S-карбоксимётил цистеин, при действии иодац^тамида — в S-карбоксамидометилцистеин:
SH s—ch2-conh2
I I
сн2 + i-ch2-cqnh2 —. си2
I I
-NH-CH-C0- _ -NH-CH—со-
Цистеин Иодацетамид • S-Карбоксамидометил-
цистеин
Тиоловая группа цистеина легко присоединяется к двойным связям, если они активированы сопряженной карбонильной группой или другим способом:
SH
сн2
-NH-CH-CO-
Цистеин
192
СН—€=0 II ----С2Н;
сн-с=о
2И5
./V-Этилмале-
имид
сн2-с
I
СН2—s-СН—С(К
I
-NH—СН-СО—
Замещенный сукцинимид
' Окисление сульфгндрильных групп. Сульфгидрильные группы остатков цистеина могут окисляться с образованием дисульфидных групп, т.е. превращаться в остатки цистина в сравнительно'мягких условиях, в частности под действием кислорода воздуха. Эта реакция специфична и может сопровождаться лишь окислением серы в метионине. ИногДа, - в частности при ренатурации белков, для перевода остатков цистеина в остатки цистина прибегают к реакции дисульфид-ного обмена; для чего особенно подходящей считается окисленная форма глутатиона:
7~Glu~Cys"4Jly • S
Cys-
+
'I .
T~Glu—Cys“4*ly
f
Окисленная форма глутатиона
HS
us
Cys-
27—Glu—Cys-Gly +
I -
SB
1 , , r
Белок со свободными Восстановленная ' тиоловыми группами форма глутатиона
Белок с внутримолекулярной дисульфидной связью
Разумеется,' эта реакция обратима, однако равновесие может быть практически полностью сдвинуто в сторону образования дисуяьфид-ной (как правило, внутримолекулярной) связи в белке за счет большого избытка окисленной формы глутатиона. На реакции дисульфидноГо обмена основано использование так называемого реактива Эллмаиа — 5,5'-дитиобис-(2-нитробензойной) киелрты для количественного определения свободных сульфгидрильных групп в белкаХ. При взаимодействии с последними происходит восстановление дисуЛьфидной связи в реактиве. Образующаяся 5-меркапто-2ннитробензойная кислота за счет диссоциации сульфгиДрильной группы в щелочной среде дает харак-
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 140 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed