Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом - Крылова А.Н.
Скачать (прямая ссылка):
1 мл 0,01 н. раствора комплексона III соответствует содержанию 0,56 мг кадмия.
Формула для расчета:
„„ а /С-0,56-1/-100 j~l ’
где х — количество кадмия в 100 г органа, мг; а--объем 0,01 н. раствора комплексона III, мл; К — по-
1 При большом количестве кадмия производят исчерпывающую экстракцию.
2 В случае одновременного обнаружения кадмия н цинка количественное определение их проводят в одном объеме минерализата: цинк определяют в подпой фракции, оставшейся после отделения кадмия, как описано ниже,
правка к 0,01 н. раствору комплексона III; V — объем минерализата, полученного после разрушения, мл; V\ — объем минерализата, взятого для определения, мл; п — навеска органа, г. Кадмий определяется при содержании его в количествах I —100 мг и более в 100 г органа.
СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКАЯ ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Дробным методом кадмий может быть обнаружен как продукт накопления в организме вследствие попадания его из внешней среды. В органах погибших вследствие травмы было определено кадмия 0,64— 6,68 мг в 100 г печени и 1,32—8,48 мг в 100 г почек. Возрастных и половых различий нами не обнаружено.
По литературным данным1, кадмий может накапливаться в количестве до 10 мг в 100 г почек, но обнаружение 1 мг кадмия в 100 г почек свидетельствует о его токсическом действии.
При судебно-медицинской оценке результатов анализа на кадмий основное внимание следует уделять данным количественного определения с учетом того, что границы накопления кадмия, поступившего в организм из окружающей среды, сильно колеблются.
ИССЛЕДОВАНИЕ НА ЦИНК
Оптимальные условия экстракции: pH 8,5, присутствие не более 50 мг железа в экстрагируемом объеме, комплексированис кадмия тиомочевиной (или тиосульфат-ионом) при качественном исследовании. Реэкстрак-ii.iiя: 1 п. HCI, время реэкстракцпп 30 с.
КАЧЕСТВЕННОЕ ОБНАРУЖЕНИЕ
Для обнаружения цинка в реэкстракте использованы реакции образования: сульфида цинка (чувствитель-
ность 1,5-10-3 мг), гексацианоферроата цинка (чувствительность 3-Ю_3мг), дитизоната цинка (чувствительность 2,5-10-5 мг/мл) и микрокристаллическая реакция
1 S. Alan, Curry, Poison detection in human Organs. Stringfield — Illinois, 1963.
87
образования тетрароданомеркуроата цинка (чувствительность 2-10~4 мг).
Оптимальные условия: первых двух реакций — pH 5,0, избыток свежеприготовленных реактивов; третьей реакции — pH 7,0—7,5, экстрагент — хлороформ, избыток дитизона; четвертой реакции—уксуснокислая среда.
Количество минимально обнаруживаемого цинка в экстрагируемом объеме — 0,012 мг. Это позволяет обнаруживать 0,25 мг цинка в 200 мл исследуемого минерализата, если для экстракции берут 10 мл его.
Цинк содержится в органах человека в значительном количестве как естественная составная часть.
Чтобы, не обнаруживать постоянно цинк, содержащийся в органах в естественном количестве, производят предварительную реакцию, позволяющую исключать до
5 мг цинка в 100 г органа (средняя граница естественного содержания цинка). В качестве такой реакции, имеющей отрицательное значение, используют реакцию
образования дйтизоната....цинка — Zn (HDz) 2. Реакция
производится при -pH 4,5—5,0 в присутствии комплек-сообразователей — тиосульфат-иона или тиомочевины. В этих условиях чувствительность реакции образования Zn(HDz)2 понижается до 1,25-10~2 мг/мл цинка.
Оптимальные условия: 0,5 мл минерализата, маскирование посторонних ионов 0,25 мл насыщенного раствора тиомочевины или тиосульфата; pH 4,5—5,0 при использовании в качестве экстрагента ССЦ; pH 5,0—-5,5 при использовании СНС13.
Реакции не мешают элементы, содержащиеся в организме в естественном количестве, и элементы, являющиеся предметом судебно-медицинского исследования.
Методика: к 0,5 мл минерализата прибавляют0,25 мл насыщенного раствора Na2S203, устанавливают рН = = 4,5 — 5,0, добавляют 1 мл ацетатного буфера, 2 капли 0,0.1% раствора дитизона в СС14(СНС13)1 и 1 мл CCI4. Смесь энергично встряхивают: зеленый цвет слоя органического растворителя в зависимости от количества цинка переходит в розовый или красно-фиолетовый.
Реакция позволяет обнаруживать цинк в количестве, большем или равном 5 мг в 100 г органа. При отрицательном результате реакции образования Zn(HDz)j
1 При использовании хлороформа pH мннерализата устанавливают 5,0—5,5.
88
При положительном результате реакции с дитизоном следует провести основные реакции.
(зеленое окрашивание ССЦ) исследование заканчивают и дают за-
ключение ”~6. том, что цинк не обнаружен!
К 10 мл минерализата добавляют 4 мл раствора К, Na-тартра-та (или 20% раствора лимонной кислоты), 1 мл насыщеного раствора тиомочевины
Рис. 15. Кристаллы ZnHg(SCN)i
(или МагБгОз), добавляют 2,5 н. КОН до появления розовой окраски в присутствии нильского голубого, а затем 2 и. H2SO4 до pH 8,5 по универсальной индикаторной бумаге. Смесь энергично встряхивают с 3 мл 1% раствора №(ДДТК) и 5 мл СНС13. Хлороформный экстракт отделяют, промывают водой и встряхивают с Змл
