Индукция ферментов в норме и патологии - Крицман М.Г.
Скачать (прямая ссылка):
уридина в РНК.
Характерно, что актиномицин D задерживал повышение активности тирозин-
аминотрансферазы при его введении крысятам через 1 час после рождения, но
он сравнительно мало действовал на активность исследованного фермента при
инъекции актиномицина D крысятам через 3 часа после их рождения.
Авторы полагают, что их данные служат доказательством того, что в периоде
эмбрионального развития повышение активности тирозин-аминотрансферазы
связано с синтезом мРНК.
Сравнительные исследования индуцированного образования тирозин-
аминотрансферазы и аланин-аминотрансфе-разы при введении специфических
субстратов или гормонов коры надпочечников выявили различие путей,
приводящих к реализации этого сложного явления (Rosen, Harding,
Milholland, Nichol, 1963).
Однократная инъекция кортизона интактпым крысам сопровождалась повышением
на 50% активности тирозин-аминотрансферазы; введение гормона
адреналэктомирован-ным животным повышало активность фермента в 5-6 раз.
При исследовании аланин-аминотрансферазы было обнаружено одинаковое
индуцированное гормоном повышение активности фермента у интактных и
адреналэктомирован-
53
ных крыс. Авторами установлено также, что тирозин-амино-трансфераза
индуцируется специфическим субстратом, в то время как аланин-
аминотрансфераза не активируется аланином или глутаминовой кислотой.
Согласно данным Rosen, Roberts, Nichol (1959), вызванное инъекцией
гидрокортизона повышение активности ала-нин-аминотрансферазы при
голодании и содержании животных на диете, богатой белками, продолжает
прогрессивно нарастать. После введения кортизона активность аланин-
аминотрансферазы нарастала на протяжении 5 дней, в то время как
максимальная активность тирозин-аминотрансферазы выявлялась уже через 5
часов, а к 12 часам снижалась до исходного уровня. Авторы полагают, что
это явление обусловлено различной скоростью кругооборота исследованных
ферментов.
Действительно, согласно имеющимся данным (Harding, Rosen, Nichol, 1961;
Segal, Hopper, 1963), период полу-жизни аланин-аминотрансферазы
составляет 40-48 часов, в то время как для тирозин-аминотрансферазы
период полужизни исчисляется 2-3 часами (Lin, Knox, 1958).
Сравнительные исследования радиоактивности препаратов тирозин-
аминотрансферазы печени интактных крыс и животных после инъекции
гидрокортизона показало определенную зависимость между энзиматической
активностью и количеством иммунологически реактивного белка при
отсутствии различий радиоактивности препаратов белков (Kenney, 1960).
Полученные данные авторы приводят как доказательство существования
неактивного белкового предшественника исследованного фермента в
неиндуцированном состоянии.
Продолжая эти исследования, Kenney (1962а) провел сравнительный анализ
повышения активности тирозин-аминотрансферазы, уровня радиоактивности в
суммарных банках растворимой фракции печени и в комплексе, образовавшемся
между ферментом и антителами. При этом он обнаружил, что в результате
индукции кортизоном энзиматическая активность повышается в 12-14 раз;
радиоактивность в индуцированном комплексе аминотрансфераза -
антиаминотрансфераза была в 2-2,4 раза выше, чем в тотальных белках
растворимой фракции печени, причем в неиндуцированном препарате это
отношение оказалось практически идентичным (2,2).
54
Несмотря на резкое несоответствие между величинами возросшей
энзиматической активности и радиоактивности при гормональной индукции
этого фермента, автор приходит к выводу, что повышение активности
аминотрансферазы отражает ее синтез de novo из аминокислот.
Автор, однако, не принимает во внимание то обстоятельство, что не
исключена возможность образования индуцированного фермента из
иммунологически неактивного предшественника и что появление
ферментативной активности может происходить параллельно с образованием
иммунологически активного белка из бел к а-предшественника.
Далее Kenney (1962b) пытался доказать, что обнаруженное им
иммунологическим методом увеличение количества комплекса фермент -
антиген при индукции гидрокортизоном тирозин-аминотрансферазы не является
следствием замедления скорости распада этого фермента. Использовав С14-
лейцин, он после однократного введения последнего определял в различные
отрезки времени радиоактивность тирозин-аминотрансферазы, выделенной из
надосадочной жидкости печени контрольных животных и животных, которым
вводили индуктор. Не приводя данных по скорости включения метки и
основываясь только на том, что падение радиоактивности фермента,
полученного из печени обработанных крыс, происходило скорее, чем в
ферментном препарате контрольных животных, автор (даже не сопоставляя
высоту и время достижения пиков) делает вывод, что при индукции
отсутствует торможение процесса распада этого белка и что повышение
активности фермента обусловлено ускорением его синтеза.
Следует отметить, что автор не фиксирует внимания на том, что
обнаруженная им быстрая потеря радиоактивности может быть следствием
