Индукция ферментов в норме и патологии - Крицман М.Г.
Скачать (прямая ссылка):
увеличения у обработанных кортизоном животных фонда свободных
аминокислот, а не только результатом ускорения синтеза тирозин-
аминотрансферазы.
Для выявления предела специфичности индуцированного образования
аминотрансфераз Kenney, Flora (1961) изучали влияние 11 аминокислот и
ряда неорганических соединений на активность тирозин-аминотрансферазы.
Полученные ими данные свидетельствовали о том, что у интактных животных
триптофан в большей мере, чем тирозин, способен вызвать повышение
активности у казан-
55
ного выше фермента печени, причем триптофан, подобно тирозину, не
индуцировал активность этого фермента у адреналэктомированных крыс.
На основании полученных данных авторы пришли к заключению об отсутствии
узкой специфичности индукции исследованного фермента. Ими было высказано
предположение, что обнаруженное повышение активности тирозин-
аминотрансферазы обусловлено действием различных нерастворимых соединений
на надпочечники, приводящим к их гиперфункции. Это предположение
основывалось на наблюдениях, показавших аналогичное повышение активности
исследованного фермента, индуцированное введением суспензии
неорганических веществ - целита и бентонита.
Для расшифровки механизма, лежащего в основе индуцирующего действия этих
неспецифических веществ, Kenney и Flora исследовали посредством меченного
С14 гидрокортизона накопление последнего в печени крыс, получавших в
качестве индуктора целит. У подопытной группы крыс радиоактивность
экстрагированных из печени метилен-хлоридом веществ была в 2-3 раза выше,
чем в контроле. На основании этого авторы пришли к выводу, что
индуцированное повышение активности тирозин-аминотрансферазы в данном
случае тесно связано с действием гидрокортизона.
В опытах с изолированной перфузированной печенью крыс (Goldstein, Stella,
Knox, 1962; Feigelson, Greengard, 1962) обнаружено индуцированное под
влиянием гидрокортизона повышение активности тирозин-аминотрансферазы.
Судя по приведенным данным, степень выраженности этого процесса в
значительной степени зависела от длительности и способа перфузии гормона.
Р1аиболее выраженное повышение активности исследованного фермента
наблюдалось через 2 часа при добавлении гидрокортизона в начале перфузии;
повторное через 2 часа добавление гормона сопровождалось дальнейшим, но
менее интенсивным нарастанием активности фермента (рис. 9).
Природу этой ответной реакции изолированной печени авторы изучали
посредством удаления кортизона из пер-фузионпой жидкости после
двухчасового опыта, а также путем добавления пуромицина.
При перфузии печени новой порцией крови без добавления гидрокортизона
наблюдалось снижение ферментативной активности.
56
Перфузия печени при добавлении пуромпцина (рис. 10) полностью
предупреждала индуцированное гидрокортизоном повышение активности
тирозин-аминотрансферазы; содержание тотальных белков печени также не
менялось.
9. Изменение активности тирозин-аминотрансферазы изолированной
перфузировапной печени под влиянием гидрокортизона (Goldstein, Stella,
Knox, 1962):
1 - без добавления гидрокортизона (контроль); гидрокортизон добавлен; 2 -
в начале опыта (3 мг)\
3 - через 15 минут (3 мг); 4 - в начале опыта (1,5 мг) п по 0,25 мг
каждый час на протяжении 6 часов.
Интересно, что в этих условиях пуромицин не оказывал ингибирующего
влияния на активность лактатдегидрогеназы.
Повышение активности тирозин-аминотрансферазы изолированной печени,
индуцированной гидрокортизоном, было того же порядка, что in vivo (в 3-5
раз). Это активирующее действие гидрокортизона авторы рассматривали как
его непосредственное влияние на ферменты, и что в изолированной печени
имеет место процесс длительного и постоянного образования активных
ферментов, в первую очередь ферментов с быстрым кругооборотом.
Однако в опытах in vitro (Goldstein, Stella, Knox, 1962; Feigelson,
Greengard, 1962) при использовании переживаю-
57
щих срезов печени вызвать индуцированного гидрокортизоном повышения
активности тирозин-аминотрансферазы не удалось.
Schimke, Sweeney, Berlin (1965) считали, что исследование in vitro в
простой биологической системе процесса распада фермента может
способствовать изучению механизма, лежащего в основе индуцированного
образования
10. Влияние гидрокортизона и пуромицина на активность тирозин-
аминотрансферазы изолированной перфузированной печени (Goldstein,
Stella, Knox, 1962):
/ - добавлен гидрокортизон (3 мг); 2 - в начале опыта добавлен
гидрокортизон (3 мг), через 2 часа перфузируемая кровь заменена на свежую
(без гидрокортизона): 3 - в начале опыта добавлены 1,5 мг гидрокортизона
и 15 мг пуромицина, через 1 час повторно добавлен гидрокортизон (0,25 мг)
и по 15 мг пуромицина через 1 час на протяжении б часов.
аминотрансфераз. С этой целью были поставлены опыты с использованием
гомогенатов печени крыс, у которых прижизненно путем парентерального
введения гидрокортизона было вызвано значительное повышение активности
