Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение - Ригетти П.
Скачать (прямая ссылка):
обстоятельства"... В 1968 году, когда я работал в Массачусетском
технологическом институте, мне довелось попасть на один семинар, где
некий японский ученый делал сообщение об очистке тканевых ферритинов с
помощью изоэлектрофокусирования. Семинар проходил на редкость спокойно -
без вопросов и оживленных дискуссий. Все впервые слышали об этом методе,
и никто, кажется, так и не понял, как он на самом деле работает. 1968 год
оказался во многих отношениях революционным. Студенческие волнения,
начавшиеся в Париже, прокатившиеся по всей Франции, а затем и по всей
Западной Европе, столь основательно сотрясали академические и
университетские своды, что революция в области методов разделения и ее
восходящая звезда - метод изоэлектрофокусирования - оказались едва
замеченными.
В этом предисловии мне хотелось бы упомянуть о некоторых событиях,
предшествовавших рождению нового биохимического метода. Это будет краткий
отчет, основанный на материалах небольшого "симпозиума" (октябрь, 1980),
который состоялся в ресторане "Тге Travare" ("Три скакуна"), что возле
ипподрома Сольвалла в Стокгольме. В качестве докладчиков присутст-
Предисловие
9*
вовали: X. Свенссон (Рильбе), О. Вестерберг, X. Хаглунд, Н. Дэвис, Б.
Бьеллквист и К. Эк. Моя роль заключалась в ведении протокола.
Итак, в 1959 году Свенссон (который в 1968 году поменял фамилию на
Рильбе) нанес визит Л. Полингу в Калифорнийский технологический институт.
Он уже наметил основные положения теории изоэлектрофокусирования, однако
был весьма разочарован тем, что даже в американских химических каталогах
так и не смог отыскать подходящих амфолитов. По возвращении в Швецию
Свенссон, работая в качестве "вольнонаемного" в Каролинском институте
(заметим, что в те времена найти место в профессуре было ничуть не легче,
чем сейчас), объединяется со студентом-медиком О. Вестербергом для
решения практических аспектов проблемы. После трех лет медленного
продвижения к цели Свенссону удается получить место профессора в
Гетенбурге, и "экспериментальное объединение ИЭФ" распадается. Тем не
менее Вестерберг в Стокгольме продолжает поиски решения проблемы и уже
весной 1964 г. по телефону торжественно сообщает Свенссону о том, что ему
удалось наконец разработать подходящий метод синтеза амфолитов-носителей.
После тщательного изучения и проверки экспериментальных данных оба
исследователя окончательно убеждаются, что решение найдено, и обращаются
к фирме LKB Produkter с предложением наладить промышленный выпуск
реактивов и оборудования для ИЭФ. В те времена Уппсала была своего рода
Меккой методов фракционирования; фирма отсылает обоих паломников на
консультацию к "верховному жрецу" электрофоретических методов -
профессору Тизелиусу. В большом смятении выслушивают они суровый приговор
мэтра: электрофоретическое разделение макромолекул, основанное на
миграции к изоточке, осуществить невозможно ввиду их неизбежной изо-
электрической агрегации и преципитации.
И все же, несмотря на такое обескураживающее напутствие, идея обретает
еще одного преданного и настойчивого приверженца в лице X. Хаглунда,
который, как и сам Свенссон, был когда-то учеником Тизелиуса, а в то
время возглавлял небольшую группу в фирме LKB, занимавшуюся методами
разделения. Будучи в курсе опытов Свенссона и Вестерберга, равно как
10
Предисловие
и скептических прогнозов Тизелиуса, Хаглунд и его коллеги Хольмстрём и
Дэвис решились пустить "пробный шар". Им удалось вытянуть из отчаянно
сопротивлявшейся фирмы около 60 ООО шведских крон и наладить производство
первых свенссо-новых вертикальных градиентных колонок и первых партий
вестерберговых амфолитов-носителей. Свою продукцию они предлагали
экспериментаторам на бесплатную апробацию.
Кажется, что все это было только, вчера. С тех пор прошло всего лишь 15
лет, и вот уже мне приходится в поте лица своего пожинать и
перерабатывать неслыханный урожай - около 4500 научных публикаций по ИЭФ.
Мне хочется надеяться на то, что Вы все же оцените результаты этого моего
труда, воплотившиеся в настоящей книге.
Sic transit gloria mundi Милан, 1 апреля 1982 г.
Пьер Джорджио Ригетти
Nihil obstat quominis imprimatur
(т. e. прочитано и одобрено X. Свенссоном и X. Хаглундом)
2nd imprimatur (д-р Т. Уорк и проф. Р. Бардон)
Благодарности
Я крайне признателен д-ру Э. Джанацца, чей энтузиазм и преданность делу
имели огромное значение для успешного хода исследовательских работ в
нашей лаборатории. Хочу поблагодарить г-жу Тюдор, которой удалось с
честью пройти сквозь суровые испытания, разбирая мой почерк, печатая и
выправляя рукопись всей книги. Фирма LKB Produkter АВ снабдила меня
ценнейшим библиографическим сборником - полной подшивкой Acta Ampholinae.
Теоретические выкладки и уравнения, приведенные в тексте, по большей
части основаны на принципах, разработанных профессором Свенссоном
(Рильбе), которому я очень признателен за неоценимую помощь. Я многим
обязан проф. Р. Бардону и д-ру Т. Уорку, которые терпеливо и
