Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Ригетти П. -> "Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение" -> 3

Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение - Ригетти П.

Ригетти П. Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение — М.: Мир, 1986. — 399 c.
Скачать (прямая ссылка): izoelektricheskoefokusirovanie1986.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 < 3 > 4 5 6 7 8 9 .. 171 >> Следующая

добросовестно проверили всю рукопись и придали ей окончательный вид.
Наконец, хочу поблагодарить всех моих коллег, любезно предоставивших
иллюстративный материал и экспериментальные данные, которые мне удалось
включить в эту книгу.
Список сокращений и условных обозначений
АВХ - амфолит-вытесни- ПААГ - полиакриламидный
тельная хроматогра- ППО гель
oil-АТ фия - 2,5-дифенилоксазол
- а г антитрипсин ПЭГА - пентаэтиленгекс-
БАЦ - М,№-бисакрилцист- ПЭИ амин
амин - полиэтиленимии
Бис - Ы^^-метиленбисак- ТАЦТ - Ы,Ы',Ы"-триаллил-
БЭФ риламид - "буферное" электрофо- ТЕМЭД цитраттриамид - N,N,N',N'-
TeTpaMe-
БСА кусирование тилэтилендиамин
- бычий сывороточный ТММ - тетраметилмочевина
ГМТА альбумин ТЭПА - тетраэтилеипентамин
- гексаметилентетр- ТЭТА - триэтилентетрамин
ГЭОА амин Трис - трис(гидроксиме-
- гептаэтиленоктамин тил) а ми но метан
ДАТД - Г^М'-диаллилтартар- ФА - формамид
диамид ЭДА - этилендиакрилат
ДГЭБА - N,N'~ (1,2-дигидро-ксиэтилен)бисакрил- ЭДТА -
этилендиаминтетра-ацетат
амид ЭФ - электрофорез
ДДС-Na, - додецилсульфат нат- D - коэффициент диффузии
или ДСН рия
ДМАПМА - 3-диметиламинопро- НЬ - гемоглобин
ДМСО пилметакриламид Нр - гаптоглобин
- диметилсульфоксид / - ионная сила раствора
ДМФ - диметилформамид Mb - миоглобин
ИТФ - изотахофорез Mr - молекулярная масса
ИЭФ - изоэлектрофокуси- pi - изоэлектрическая точка
рование
Приводимые в тексте значения процентной концентрации растворов (%), как
это принято в биохимической литературе, отражают количество растворенного
вещества в граммах (для твердых веществ) или миллилитрах (для жидкостей),
приходящееся иа 100 мл раствора.
ГЛАВА 1
Теория и важнейшие аспекты изоэлектрофокусирования
Эта книга посвящена развитию теории и практики изоэлектрофокусирования
(ИЭФ). Она предлагает детальную методологию широко используемых
экспериментальных приемов (таких, как ИЭФ в геле) и может одновременно
служить и библиографическим указателем, и практическим руководством. В
первой части книги рассматриваются теоретические основы и развитие
техники ИЭФ. Во второй части обсуждаются тактические и практические
аспекты разнообразных препаративных и аналитических вариантов метода.
Третья часть представляет собой обзор некоторых примеров использования
ИЭФ для биологических и медицинских исследований. Предложенные примеры
призваны проиллюстрировать необычайно широкие возможности метода
изоэлектрического фракционирования.
1.1. История метода
Некоторые авторы склонны отсчитывать историю ИЭФ с момента опубликования
работы Ikeda, Suzuki, 1912, посвященной выделению глутамата натрия с
помощью электролизера, который состоял из трех отсеков, разделенных
ионопроницаемыми мембранами. В дальнейшем эта конструкция с различными
модификациями использовалась многими исследователями для разделения
аминокислот и других амфолитов (Foster, Schmidt, 1926; Сох et al., 1929;
Albanese, 1940; Theorell, Akesson, 1941; Sperber, 1946). Существенный шаг
вперед был сделан в работе Williams, Waterman, 1929. Авторы увеличили
число отсеков до 12, а также четко сформулировали принцип ступенчатого
изменения pH при переходе от одного отсека к другому с установлением
стационарного распределения pH и накоплением амфолитов при значениях pH,
соответствующих их изоэлектриче-ским точкам (pi). Примечательна глубина
проникновения авторов в сущность процесса фракционирования. В своей
статье они отмечают, что "если некое соединение является амфолитом,
14
Глава 1
то можно полагать, что значение pH в той части раствора, где это
соединение находится в максимальной концентрации, окажется близким к его
pi. При любом другом значении pH, большем (или меньшем) pi, данный
амфолит будет ионизирован преимущественно по кислотному (или
соответственно по основному) типу. Это означает, что амфолит будет
перемещаться в электрическом поле до тех пор, пока не попадет в зону со
значением pH, при котором степень его кислотной ионизации сравняется со
степенью основной ионизации, т. е. непосредственно в зону его р1".
Этот принцип был использован для выделения гормонов вазопрессина и
окситоцина из экстракта гипофиза (Du Vigneaud et al., 1938). В одной из
модификаций прибора мембранные перегородки были заменены соединением
отсеков по принципу сифона (Williams, Truesdail, 1931). В работе
Williams, 1935, описана цилиндрическая камера, состоящая из 61 отсека,
которые имели форму сегментов, отделенных друг от друга перегородками. В
еще одном варианте прибор состоял из шести колб Эр-ленмейера с боковыми
горизонтальными отводами, расположенными на половине высоты колбы. Через
эти отводные трубки колбы последовательно соединялись в ряд и
функционировали подобно многокамерному электролизеру. Эти и многие другие
подобные системы и экспериментальные приемы подробно рассмотрены в обзоре
Svensson, 1948, посвященном препаративному электрофорезу.
Другой важной вехой в истории ИЭФ можно считать работу Тизелиуса по
стационарному электролизу растворов амфоли-тов (Tiselius, 1941). В этой
Предыдущая << 1 .. 2 < 3 > 4 5 6 7 8 9 .. 171 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed