Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение - Ригетти П.
Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение
Автор: Ригетти П.Издательство: М.: Мир
Год издания: 1986
Страницы: 399
Читать: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171
Скачать:
П. Ригетти
ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОЕ ФОКУСИРОВАНИЕ
Теория, методы и применение
Перевод с английского канд. биол. наук. Л. А. Остермана и канд. хим. наук
А. Л. Остермана
Москва "Мир" 1986
Ригетти П.
Р49 Изоэ-лектрическое фокусирование: Теория, методы и применение: Пер. с
англ. - М.: Мир, 1986. - 398 с., ил.
Монография итальянского исследователя посвящена одному из самых
эффективных современных методов разделения и анализа белков. Рассмотрены
теория и принципы метода, его возможности и ограничения, дана
характеристика амфо-литов-носителей, колонок и аппаратуры, приведено
подробное описание конкретных методов анализа и разделения белков методом
изоэлектрофокусирования (ИЭФ), а также сочетания ИЭФ с ионообменными
методами.
Для молекулярных биологов, биохимиков, иммунологов и биологов других
специальностей, занимающихся разделением и очисткой белков.
От переводчика
Читателям, использующим в своей работе изоэлектрофокусирование (ИЭФ), имя
автора этой книги должно быть хорошо знакомо. П. Ригетти и его сотрудники
разработали ряд оригинальных экспериментальных приемов, охватывающих
всевозможные аспекты метода, - от синтеза амфолитов-носителей до
регистрации сфокусированных зон. В настоящее время профессор Ригетти
возглавляет исследовательскую группу, усилия которой направлены на
решение таких актуальных методических проблем, как изоэлектрическое
фракционирование пептидов, использование иммобилизованных градиентов pH и
др.
Книга начинается кратким экскурсом в историю создания и развития ИЭФ.
Далее автор формулирует основные положения теории метода, обсуждает
природу и влияние факторов, вызывающих наблюдаемые экспериментально
отклонения от идеальной равновесной модели ИЭФ. Значительное внимание
уделено методам синтеза и сравнительному анализу характеристик различных
типов амфолитов-носителей. Во второй главе рассмотрены многочисленные
препаративные варианты ИЭФ, приведены принципиальные схемы
соответствующих аппаратов и приспособлений. Рассмотрены новые
методические подходы к фракционированию белков, такие как "амфолит-
вытеснительная хроматография" и "хроматофокусирование", основанные на
ионообменной хроматографии в сочетании с использованием амфолитов-
носителей.
По-видимому, наибольший интерес для читателей представляет третья глава,
содержащая подробный анализ проблем, связанных с аналитическим ИЭФ.
Большое внимание уделено свойствам матриц и гелевых сред для ИЭФ,
способам приготовления обычных и ультратонких гелей, методам регистрации
зон, двумерным методам фракционирования белков. Рассмотренные в этой
главе новые экспериментальные подходы (изо-
в
От переводчика
электрическое титрование, аффинное ИЭФ, крио-ИЭФ и другие) открывают
возможности к использованию ИЭФ не только для решения традиционных
аналитических задач (характеристика белкового состава препарата,
выяснение гомогенности, определение изоточки и т. п.), но и в качестве
весьма тонкого инструмента исследования структурно-функциональных
особенностей индивидуальных белков.
Из материала, вошедшего в четвертую главу, особого внимания заслуживают
разделы, посвященные электроэндосмотиче-ским и другим артефактным
явлениям, с которыми приходится сталкиваться при работе с ИЭФ. В пятой
главе наряду с разбором конкретных примеров использования обычного ИЭФ
кратко обсуждается новый метод - ИЭФ в иммобилизованном градиенте pH. В
изложении материала всех пяти глав книги широко использованы и цитируются
многочисленные публикации в периодической научной печати по 1982 г.
включительно.
Встретившиеся нам в тексте отдельные неточности и типографские ошибки
были исправлены при переводе. В целом настоящая книга является ценным
практическим руководством для широкого круга экспериментаторов,
специализирующихся в области биохимии, молекулярной биологии, генетики,
медицины и других смежных областях науки.
JI. А. Остерман
Первое посвящение
Пока история создания метода еще не подернулась тусклой патиной
беспощадного времени, пока процесс "размывания идейных истоков" еще не
успел окончательно деформировать истинную цепь событий, я хочу посвятить
эту книгу проф. X. Свенссо-ну (Рильбе), проф. А. Колину и д-ру О.
Вестербергу - "Троице" метода изо-электрического фокусирования.
Второе посвящение
Адриане, Сабине и Монике - "Троице" моей жизни.
Предисловие
Считается, что предисловие должно быть весьма формальным и
малоинформативным, ровно настолько, чтобы искушенный читатель мог,
опустив со спокойным сердцем несколько первых страниц, обратиться прямо к
тексту. Данное предисловие не очень-то укладывается в привычные рамки.
Мне остается лишь надеяться, что оно не отвратит Вас от прочтения всей
книги.
Почему именно мне выпало написать эту книгу? Почему мне, а не профессору
X. Свенссону (Рильбе) или доктору О. Вестербергу - тем, кто несет
основную долю ответственности за появление и развитие метода? Трудно
ответить определенно; может быть, просто потому, что "так уж сложились
