Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
Ретровирусный мутагенез показан и in vitro: вирус Mo-MuLV использовали как инсерционный 'мутаген, вызывающий реверсию фенотипа крысиных клеток, трансформированных RSV [190]. У многих ревертантов геном Mo-MuLV оказался интегрированным с провирусом RSV.
Патогенность у-опс~-вирусов
Способные к репликации ретровирусы, не имеющие онкогенов (\-onc~), обычно вызывают развитие болезни после длительного латентного периода [179]. Как правило, при этом .индуцируются одна или несколько форм неопластических заболеваний, хотя иногда возможна .и другая патология — например, истощение или .неврологические нарушения. Наиболее детально изучены опухолевые процессы, индуцируемые ALV у кур. Нео-плазии возникают через несколько месяцев после заражения, несмотря на постоянно высокое образование вируса в организме. Это ‘свидетельствует о том, что трансформация — редкое событие. Моноклональность возникающих опухолей также говорит в пользу этого предположения. Можно предложить два объяснения наблюдаемым результатам: либо клетки-мишени редко заражаются вирусом, либо трансформация — многоступенчатый процесс. Недавние исследования указывают на справедливость второго объяснения.
Определенные штаммы онкогенных ALV вызывают преимущественно В-клеточшые лимфомы. В подавляющем большинстве случаев в геноме лейкозных клеток обнаруживается провирус ALV, интегрированный вблизи гена с-туе [77]. Вероятно, эта сайт-специфическая интеграция — случайное событие, редко происходящее при заражении клеток-мишеней. Однако клетки с провируоами в этом сайте получают селективные преимущества. Провирус в таких опухолях часто содержит протяженные деле-ции, однако последовательности LTR ALV в нем сохраняются [133]. Интеграция провируса обычно ведет примерно к 50-кратному повышению уровня экспрессии с-туе за счет влияния вирусного LTR. В большинстве случаев транскрипция онкогена инициируется .в обычном месте внутри LTR — это явление называют инсерцией промотора. Оно наблюдается также в В-лимфо-мах кур, индуцированных REV [124]. В редких случаях провирус, включенный перед с-туе, находился в обратной, относительно направления транскрипции онкогена ориентации, а в одной опухоли провирус включался за с-туе. Повышенная транскрипция онкогена в этих случаях была связана с действием вирусного энхансера. Ряд штаммов ALV вызывает эритробластоз: при
этом наблюдается интеграция П'ровируса вблизи онкогена c-erb В [57].
Другим важным шагом на пути к пониманию особенностей патогенеза ALV-индуцировайных лейкозов стали эксперименты по трансфекции ДНК из лейкозных клеток в клепки NIH ЗТЗ. Такая трансфекция регулярно приводила к образованию фокусов трансформации, однако вызывающий эту трансформацию-ген Blym не сцеплен с с-туе и не несет вирусных последовательностей [65] *. (В отличие от большинства других онкогенов Blym до сих пор не найден в составе генома ретровируса). Эти данные показывают, что для злокачественной трансформации необходима реализация по крайней мере двух событий, лишь одно из которых прямо связано с ALV.
Обнаруженная связь между местам интеграции провируса и активацией онкогенов в ходе возникновения опухолей определила поиск сходных явлений для ретровирусного канцерогенеза у млекопитающих. Повышенные уровни экспрессии с-туе характерны для ряда линий мышиных плазмацитом, индуцированных приставом или A-MuLV [123]. Механизм индукции этой экспрессии неизвестен. 'В отличие от птиц у млекопитающих в-опухолях в большинстве случаев не удалось обнаружить транскрипции онкогенов, инициированной вирусными LTR. Однако в. опухолях, индуцированных MMTV [126, 135] и MuLV [185, 208], выявлены сходные сайты интеграции провирусов 2. Эти сайты не сцеплены с известными онкогенами, а их размер значительно превышает сайты интеграции провирусов ALV вблизи с -туе в В-лимфомах кур. Биологический смысл этого явления еще предстоит выяснить. В клетках неоплазий 'коров, индуцированных вирусом бычьего лейкоза, и неоплазий человека, ассоциированных с HTLV, не было найдено сайтов закономерной интеграции провирусов. Возможно, и в этих случаях в трансформации участвует несколько онкогенов. Например, в мышиных лимфомах,. индуцированных различными агентами, часто наблюдается три-сомия по участку хромосомы 15, несущему онкоген с-туе [94], а в вирусных лимфомах мышей показана активация клеточных онкогенов [29].
Помимо влияния вирусной инфекции на активацию клеточных онкогенов, изучаются и другие аспекты ретровирусного патогенеза [179]. Установлено, что в возникновении заболевания
1 Позже установлено, что сложившиеся представления о Blym и Tlym ошибочны. Они являются результатом некорректно проведенных экспериментов. — Прим. перев.
2 Клеточные гены, расположенные в местах преимущественной интеграции-ДНК MMTV называют int-1, 2, 3... я относят к клеточным онкогенам. — Прим. перев.
важную роль играет ген env, Ш-область LTR и некоторые другие участки генома [145].
У мышей линии AKR, у которых спонтанная активация эндогенного MuLV ведет к развитию лейкозов, для появления опухоли необходимо предварительное изменение в гене env и U3-o6-ласти LTR MuLV [21, 22, 25, 39, 179]. Оба этих изменения происходят в результате двух независимых актов рекомбинации геномов MuLV—активированного экотропного и неэкотропного провируса. При этом вирус MuLV получает ген env вируса MCF [22, 73]. Как отмечалось выше, вирусы с такими генами env и экотропные вирусы используют разные рецепторы для проникновения в клетку [141]. Вероятно, ген env MCF-типа позволяет рекомбинантному вирусу проникать в клетки-мишени [24]. Возможно также, что продукты гена env-MCF могут непосредственно вызывать опухолевую трансформацию, воздействуя на клеточную мембрану или стимулируя деление тех лимфоцитов, которые несут специфические -рецепторы продукта гена env [117]. В этой связи интересно отметить, что -продукт частично делегированного гена env вируса Френд, вызывающего образование фокусов в селезенке (SFFV), обладает сходными 'биологическими свойствами [108]. Хотя этот у-опс~~-вирус с внутренней делецией в гене env и неспособен трансформировать фибробласты в культуре, он индуцирует образование макроскопических фокусов делящихся клеток в селезенках зараженных мышей уже через неделю после заражения. Генетический анализ позволил связать этот эффект с геном env и LTR SFFV, и следовательно с прямым действием укороченного генного продукта.
