Современная генетика. Том 1. - Айала Ф.
Скачать (прямая ссылка):
образом гены определяют фенотип организма.
Литература
Bukhari A.I., Shapiro J.A., Adhya S.L., eds., 1977. DNA Insertion
Elements, Plasmids, and Episomes, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold
Spring Harbor, N.Y.
Jacob F., Wollman E., 1961. Sexuality and the Genetics of Bacteria,
Academic Press, New York.
Miller J.H., ed., 1972. Experiments in Molecular
Genetics, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y.
Yanofsky C., Lennox E. (1959). Transduction and recombination study of
linkage relationships among the genes controlling tryptophan synthesis in
Escherichia coli, Virology, 8, 425-447.
Ключевые слова и понятия
Анаболизм Ауксотроф Катаболизм Инсерция (IS)
Конъюгация
Конъюгационная трубка Конъюгационное картирование Котрансдукция
Мерозигота Неселективный маркер Общая трансдукция Перепечатывание колоний
Плазмида
Прерванная конъюгация Репликон
Селективный маркер
256
Организация и передача генетического материала
Специфическая трансдукция Эписома -'
Трансдукция Hfr-штамм
Трансдукционное картирование F-фактор
Транспозон F'-штамм
Трансформация F + -штамм
Фактор устойчивости к антибиотикам F " -штамм
Задачи
V 8.1 Последовательность передачи генов -у .различных Hfr-штаммов Е. coli
различна; для нескольких штаммов она представлена ниже. Постройте на
основе этих данных физическую карту бактериального генома.
Hfr-штамм Последовательность передачи генов
I АСЕ
II D В Е
III Е В D
IV С A D
( 8.2. Для определения взаимного расположений генов А, В, С и D на
генетической карте использовали метод прерванной конъюгации. Hfr-штамм
1еи + А + ,В + ,С +, D + Strs передающий ген leu + в самом начале
скрещивания, скрещивали со штаммом F - leu ~ А ~ ,В ~ ,С ~ ,D ~ StrR.
Определите взаимное расположение генов А, В, С и D, используя гены StrR и
leu + в качестве селективных маркеров (рис. 8.20).
\ 8.3. Для определения взаимного расположения нескольких ауксотрофных
мутаций Е. coli проводили эксперимент по прерываемому скрещиванию между
про-тотрофным штаммом Hfr Str^ и штаммом F ", А~ ,В~ ,D~ ,StrX. В
качестве селективных маркеров использовали устойчивость к стрептомицину и
прототрофность по D. Определите расположение генов А и В относительно D,
считая, что D + передается при скрещивании последним.
Генотип колоний D + StrR Доля колоний D + StrR(%)
А + В+ 22
А~В + 10
А~В~ 68
А + В~ 0
(8.4?Для определения взаимного расположения нескольких ауксотрофных
мутаций Е. coli использовали данные по транс-дукции фагом Р1.
Проанализируйте приведенную таблицу и установите порядок следующих генов:
А, В, С, D и F.
100
§ _
О, и
о о ¦-¦ и Й 02 о Я i:
& g и 50 X ю +-,
8" 2 ч
2 о -1 5 а "
* Я в
в а я
10
30
D
В
А
С
60
Продолжительность конъюгации (мин)
Рис. 8.20. Графическое представление результатов скрещивания.
Генотип донора Генотип реципи- ента Селек- тивный маркер
Котрансдукция неселективного маркера дикого типа с селективным
маркером (%)
A + G + A~G~ A + 80
A + D + A~D~ A + 30
А + Е+ A~E~ A + 0
D + E + D~E~ D + 30
D+F + D~F~ D + 5
E+F + E~F~ E + 75
8. Бактериальный геном
-f- -' ^
8.5. /При скрещивании F" -штамма с различными Hfr-штаммами
последовательность переноса генов различна. В таблице приводится порядок
переноса различными Hfr-штаммами нескольких генов, расположенных
неподалеку от точки начала (0). На основании этих данных постройте
физическую карту бактериальной хромосомы.
Hfr- штамм Порядок переноса генов
Н О-thr-leu-ari-ton-pro-lac-
-ade
4 0-thi-met-He-mtl-xyl-mal-
-str
6 0-ile-met-thi-thr-leu-azi-ton
АВ311 0-his-trp-gal-ade-lac-pro-
-ton
АВ313 0-mtl-xyl-mal-str-his
Г8.6ЛЦЛЯ того, чтобы определить поло-жение /ена агд 7 + на карте
хромосомы Е. coli,прототрофный штамм StrsHfr4 (см. условие предыдущей
задачи) скрещивали со штаммом F_,Met~ Mtl~ Str*argf7_. После того как
скрещивание прерывалось, образцы культуры высевали на чашки, содержавшие
глюкозу в качестве источника углерода, стрептомицин и аргинин (или
метионин). По приведенным в таблице данным определите расположение гена
агд 7 +.
^ Число рекомбинантов
Время до прерыва- ____________________________
ния скрещивания 4 . r %в
(?"н) Arg Str Met Str
0 0 0
6 0 0
8 3 0
10 19 4
11,5 56 28
13 126 62
14,5 217 183
\ 8.7. Студент-генетик получил задание определить положение на карте
ауксо-трофной мутации, которую он на основа-
257
нии данных по трансдукции считает тесно сцепленной с геном his. Он ставит
конъю-гационное скрещивание штамма Hfr АВ313 Strs,Ade " XIs (см. условие
задачи 8.5) с ауксотрофным штаммом F" Str ,Ade + T1R. После прерывания
конъюгации образцы суспензии он высевает на среду, содержащую глюкозу и
стрептомицин. Рекомбинантов обнаруживается очень мало, и их недостаточно
для того, чтобы установить тесное сцепление. Со своими трудностями он
обращается к преподавателю. Тот советует ему исключить из среды
стрептомицин и повторить эксперимент. Студент пользуется советом и
получает надежные данные, показывающие, что ген, положение которого он
