Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
Методика определений. Содержание азотистых веществ устанавливают по следующей схеме.
Общий азот. К 5 лл молока добавляют воду до метки 100 мл в мерной колбе 5 мл отмеривают в колбу Кьельдаля, добавляют кристаллический медный купорос (около 0,5 г) и 10 мл концентрированной H2SO4. Смесь сжигают по методу Кьельдаля. После охлаждения стенки колбы ополаскивают минимальным количеством воды и содержимое колбы вновь нагревают 30 мин. Содержимое колбы смывают 25 мл воды в колбу перегонного аппарата, в которую затем добавляют около 25 мл 40%-ного
300
раствора едкого натра и 3--5 капель 1%-ного раствора фенолфталеина.
Перегоняют смесь около 10 мин. Выделившийся аммиак собирают в колбу, содержащую 20 мл 0,05 н. раствора соляной кислоты и несколько капель индикатора Таширо (реактив 80). Приемную колбу отсоединяют и содержимое титруют 0,05 н. раствором NaOH.
Содержание общего азота в 100 г молока рассчитывают по формуле
Р.О,7-20
A =---— мг,
G
где V — количество 0,05 н. HCl, связанной аммиаком, мл; 0,7 — количество азота, соответствующее 1 мл связанной 0,05 н. HCl, мг; G — количество молока, взятого для анализа, г. v/ Небелковый азот. 10 мл молока разбавляют в мерной колбе емкостью 50 мл 15%-ным раствором трихлоруксусной кислоты до метки. Содержимое хорошо перемешивают и через 10 мин фильтруют через сухой фильтр. Отмеряют в колбу Кьельдаля (100 мл) 20 мл фильтрата, прибавляют 1 мл концентрированной H2SO4 и выпаривают на водяной бане приблизительно до 10 мл. Затем прибавляют 10 мл концентрированной H2SO4, 0,5 г медного купороса и сжигают но Кьельдалю. Далее поступают как при определении содержания общего азота. Количество небелкового азота в 100 г молока рассчитывают по формуле
u-(j ,7-250
Неказенно віл й азот. В мерную колбу емкостью 100 мл наливают пипеткой 40 мл молока, добавляют около 40' мл и нагревают до 35е С. Затем вносят 4 мл 10%-ной уксусной кислоты и через 5—10 мин 4 мл 1 и. раствора ацетата натрия. Смесь охлаждают до 20° С, доводят водой до метки 100 мл, перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр. Отмеривают в колбу Кьельдаля 10 мл фильтрата, сжигают его и перегоняют аммиак в 10 мл 0,05 и. соляной кислоты. Количество неказеинового азота в 100 г молока вычисляют по формуле
98 V
X = V-OJ-IO-—--=—-Є8Є мг, GG
301
где 10 — разведение навески молока; G— навеска моло-98
ка, г; —--поправка на объем осадка.
С
Альбуминный и небелковый а з о т. В мерную колбу емкостью 100 мл отмеривают пипеткой 40 мл молока, нагревают до 40° С на водяной бане, добавляют 40 мл раствора сульфата натрия (40°С). Содержимое колбы перемешивают и оставляют до снижения температуры до 20° С. Объем смеси доводят до метки водным раствором сульфата натрия (20 г/100 мл), осторожно перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр № 4. 10 мл фильтрата отмеривают в колбу Кьельдаля, добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты, сжигают как обычно.
Раствор переносят в перегонную колбу (ополаскивая колбу Кьельдаля небольшим количеством воды), приливают 3—5 капель 1%-ного раствора фенолфталеина и около 25 мл 40%-ного раствора NaOH. Перегонку ведут в колбу с 20 мл 0,05 н. соляной кислоты. Не вступившую в реакцию кислоту оттитровывают 0,05 и. раствором NaOH и определяют, какое количество ее связано аммиаком. Содержание общего азота альбумина и небелкового азота в 100 г молока рассчитывают по формуле
98 V
X = «•0,7-10-— =—-080 мг.
a G
Азот бета-лактоглобулина и небел kofi ьт й. В полученном фильтрате для определения альбуминного азота можно осадить все белки, за исключением бета-лактоглобулина, если довести реакцию фильтрата до pH 2. В коническую колбу емкостью 50 мл отмеривают пипеткой 40 мл фильтрата, прибавляют 10 мл раствора HCl (разбавляют 15 мл HCl плотностью 1,18 до 100 мл водой). Содержимое колбы перемешивают и оставляют на 30 мин, фильтруют через складчатый фильтр диаметром 7 см. 10 мл фильтрата отмеривают в колбу Кьельдаля и сжигают как обычно. В приемную колбу отмеривают 10 мл 0,05 и. HCl.
Содержание азота бета-лактоглобулина и небелкового в 100 г молока вычисляют по формуле
41 98 V X = f-0.7-10--- —= — 703 мг.
40 G G
302
Не к азе и новый азот, за вычетом про-т е о з о - п е п т о н н о г о. В коническую колбу вносят 50 мл бесказеинового фильтрата, полученного при определении содержания неказеинового азота, добавляют 6 г безводного сульфата натрия (реактив 39). Для растворения соли смесь слегка подогревают,- дают остыть, фильтруют через складчатый фильтр; 10 мл фильтрата сжигают и перегоняют аммиак в колбу с 10 мл 0,05 н. раствора HCl. Содержание неказеинового азота, за выче-
V
том протеозо-пептонного, в 100 г молока Х~ — ¦ 700 мг.
Неказеиновый белковый азот. Его содержание определяют, вычитая из количества неказеинового азота количество небелкового азота.
Казеиновый азот. Количество его находят, вычитая из общего количества азота неказеиновый азот.
Общий альбуминовый азот. Для установления его содержания вычитают из общего количества азота казеиновый и бета-лактоглобулиновый.
Б е г а - л а к г о г л о б у л и н о в ы й азот. Его содержание определяют, вычитая из количества бета-лак-тоглобулинового с небелковым азотом количество небелкового азота.
