Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
концы на самом деле продолжаются далеко за сайты, отмеченные
диагональными линиями. Плазмиды представляют собой кольцевые молекулы, но
здесь для удобства они изображены в линейной форме. Нативные дрожжевые
последовательности, окружающие центромеру, обозначены линиями.
Последовательности бактериальной ДНК в составе плазмиды изображены как
черные прямоугольники. Дрожжевая ДНК в составе плазмиды 3, изображенная
как светлый прямоугольник, представляет собой фрагмент хромосомной
дрожжевой ДНК, отстоящий далеко от центромеры. Сайт разрезания BamHI
показан черным кружком слева от центромеры. Область гибридизации с
радиоактивным зондом указана внизу.
Нативная
хромосома
//-
CEN3
Плазмида 1
Плазмида 2
Плазмида 3
CEN3
CEN3
Зонд
для гибридизации, 627 п.н.
1 т.п.н.
-У/
Бактериальная ДНК
ДНК дрожжей Бактериальная ДНК
тываете ее микрококковой нуклеазой и затем анализируете тем ж
способом. Результаты радиоавтографии приведены на рис. 9-9.
A. Если не проводить обработку BamHI, то видны регулярные, хоп и не
очень отчетливые полосы. Почему в результате расщепленш BamHI картина
делается более четкой и легко поддающейа интерпретации?
Б. Нарисуйте схему локализации участков, чувствительных к микрс-кокковой
нуклеазе, и расположения нуклеосом вдоль хромосомы Какие особенности
отмечаются в области центромеры?
B. Почему в качестве контроля в эксперименте используется чистш ДНК?
Г. На радиоавтограмме (рис. 9-9) видно, что полосы, относящим к той
части хромосомной ДНК из дрожжей дикого типа, которая расположена за
центромерой, отличаются друг от друга на один* ковое число нуклеотидов, а
именно все полосы, начиная с 60f нуклеотидов и выше, разделены интервалом
в 160 нуклеотидо" Связана ли такая регулярность с выстраиванием нуклеосом
вблил центромеры подобно машинам при красном свете светофора? кд же эта
регулярность определяется свойством самой последователь ности ДНК?
Объясните, как ваши результаты, полученные с пла} мидами 1, 2 и 3, могут
помочь ответить на этот вопрос.
Структура хромосомы (МБК 9.2)
9-11 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Общим принципом структурной организации хромосом являете^
по-видимому, наличие в них_____________, которые представляю!
собой петли хроматина, отходящие под тем или иным углом о! основной
оси хромосомы. :
Б. На стадии метафазы в
процессе митоза две дочерние молекул! ДНК уложены каждая по отдельности в
виде двух сестрински
___________, которые соединены между собой с помощы!
центромер. j
B. Набор из 46 митотических хромосом человека называете!
___________ человека. I;
Г. Спаренные мейотические хромосомы в растущих ооцитах называ?
ют ___________, так как петли хроматина у них необычно туги!
и вытянутые. |
Д. Плотное прилегание одна к другой отдельных цепей хроматин!
1560 - *
1400- '
1240- '
1080 - 920- '
760- '
600 -
350-
190-
Рис. 9-9.
микрокс центром ча 9-10). автогра! длины (j
Клеточное ядро 137
Рис. 9-9. Результаты обработки микрококковой нуклеазой около-
центромерного участка ДНК (задача 9-Ю). На левой стороне радиоавтограммы
указаны примерные длины фрагментов ДНК (п. н.).
в____________ приводит к значительному удлинению оси хромо-
сомы и препятствует спутыванию цепей хроматина.
Е. Активно транскрибируемые области на политенных хромосомах
деконденсируются и образуют хорошо различимые-------------------.
Ж. ___________ хроматин чрезвычайно чувствителен к действию
нуклеазы. По-видимому, нуклеосомы в нем изменены таким образом, что
их упаковка становится менее плотной.
3. Небольшая фракция ДНК из клеток высших эукариот-это особо
конденсированная форма ДНК, называемая___________________Эти
участки ДНК остаются необычайно компактными в течение интерфазы и не
транскрибируются.
9-12 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а ка-кие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
__А. Петельные домены у столь несхожих организмов, как муха и человек,
судя по всему, имеют в среднем одинаковые размеры, причем типичная петля
содержит от 20000 до 100000 пар нуклеотидов.
__Б. Сверхспирализация хромосом в митозе, приводящая к уменьшению длины
ДНК примерно в 10000 раз, сопровождается интенсивным фосфорилированием
гистона Н1.
__В. Окрашивание митотических хромосом флуоресцентными красителями
позволяет в основном отличать ДНК, богатую АТ-парами нуклеотидов (G-
сегменты), от ДНК, обогащенной GC-парами (R-сегменты).
__Г. В хромосомах типа ламповых щеток большая часть хроматина
находится в составе активно транскрибируемых петель, а небольшая
