Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Вопросы приведенной выше дискуссии необходимы для интерпретации данных ЯМР. Молекулярные механизмы различия значений ЯМР, полученных для культур нормальных, HAN и опухолевых клеток, не установлены. Более того, не известен вклад определенных субпопуляций клеток культуры, которые они вносят в эти изменения. Например, интересно было бы получить данные ЯМР для отдельных популяций альвеолярных, дуктальных и миоэпителиальных клеток, выделенных из тканей молочной железы, чтобы увидеть сходство или различие значений их показателей. Недавно была предложена методика (Kraehenbuhl, 1977) для разделения паренхимальных миоэпителиальных клеток, благодаря которой такие исследования скоро можно будет осуществить. Несмотря на эти ограничения, ЯМР-исследования дали принципиально новую информацию в этой области онкологии, что обеспечит основу для будущих работ. Во-первых, полученные результаты показали, что степень гидратации клеток примерно одинакова в культурах нормальных, предопухолевых и опухолевых клеток и этот параметр, следовательно, не является ответственным за наблюдаемые различия значений ЯМР. Во-вторых, использование первичных культур дало возможность нам установить, что различия, обнаруженные в тканях, прежде всего отражают изменения, происходящие в клетках паренхимы, а не в клетках стромы или жировых клетках. В-третьих, скорость роста и число делящихся клеток во всех исследуемых культурах были одинаковыми (Das
293
et. al., 1974; Voyles, McGrath, 1976), поэтому маловероятно, что установленные различия значений ЯМР обусловлены этими факторами.
Следует отметить предостережение нескольких исследователей, указывающих на поразительные различия, существующие между свойствами клеток первичных культур нормальной ткани, предопухолевой и опухолевой тканей молочной железы и клеток стабильных линий этих тканей. Примером таких различий могут являться результаты ЯМР-исследований, в которых значения Тг и Т2 протонов воды были короче в культурах трех стабильных линий по сравнению с таковыми первичных культур (см. табл. 7). Клетки опухолевых линий также отличаются от таковых первичных культур независимо от неопластического состояния, морфологии, топографии поверхности, обнаруженных с помощью сканирующего электронного микроскопа (Medina et. al., 1979), агглютинабельности лектинами (Asch, Medina, 1978), связи с фибронектином (Asch et. al., 1980); индукции многоядерности под влиянием цитохолазина В (Medina et. al., 1980а) и др. Не ясно, обусловлены ли эти фенотипические признаки опухолевых клеток адаптацией к длительному культивированию в искусственной окружающей среде, селекцией субпопуляций клеток из исходной массы опухоли или прогрессией малигнизации клеток. Однако, когда такие свойства, как изменения ЯМР-параметра и содержания фибронектина (Asch et. al., 1980) клеток молочной железы, растущих in vivo, сравнили с таковыми клеток, культивируемых in vitro, в результате была получена сильная корреляция между характеристиками клеток в тканях и первичных культурах. Таким образом, фенотип клеток первичных культур молочной железы, растущих in vitro, и фенотип клеток ткани молочной железы, растущих in vivo, очень близки.
В настоящее время механизм изменения времени релаксации протонов воды в опухолевых клетках не известен. Современные объяснения уменьшения значений Тг и Т2 протонов воды в живых клетках по сравнению со значениями чистой воды (7^300 мс) основаны на взаимодействии молекул воды и поверхностей макромолекул внутри клеток. Мембраны, хроматин, микротрубочки, интерфиламенты, микрофи-ламенты могут взаимодействовать с водой, понижая в среднем свободу движения клеточной воды (Ranade et. al., 1975,1976; Peemoeller et. alM 1979; Rustz et. al., 1978). При иммунофлюоресцентном и электронномикроскопическом исследованиях микрофиламентов и микротрубочек в нормальных, предопухолевых и опухолевых клетках молочной железы не обнаружено никаких различий этих типов клеток (Asch et. al., 1979b). Хотя количественно нельзя определить соотношение поли-меризованного и неполимеризованного актина и тубулина, недавно проведенная серия экспериментов показала, что эти элементы цитоскелета функционально не различаются в нормальных и опухолевых клетках молочной железы (Asch et. al., 1980) (табл. 8). В противоположность этому состав белков промежуточных филаментов опухолевых клеток, который был установлен с помощью двухмерного электрофореза в геле, отличался от такового нормальных и предопухолевых клеток молочной железы. В этих элементах опухолевых
294
Таблица 8. Свойства эпителиальных клеток молочной железы in vivo и in vitro
Свойства
Результаты сравнения данных нормальных, HAN и опухолевых
клеток
Ссылка
Морфология и структура
Клеточные размеры, фор-
ма
Ядерно-цитоплазматиче-ское отношение Связывающие комплексы
Ультраструктурная характеристика Топография поверхности (по данным скенирую-щего электронного микроскопа) Микротрубочки и микрофилам еиты Содержание фибронектина
Биохимические
Г ормоночу вствитель-ность
