Витамины - Девятин В.А.
Скачать (прямая ссылка):
При В2-авитаминозе наблюдается прекращение роста молодых животных и своеобразные кожные поражения, напоминающие пеллагру. В соответствии с этим витамин В2 был охарактеризован как водорастворимый, термостабильный фактор, называемый также антипеллагрическим, необходимый для нормального роста, предупреждающий заболевания кожи у мочодых крыс и предохраняющий человека от пеллагры. В ]932 г. был установлен параллелизм между наличием в растительных и животных тканях желтого пигмента и витамина В2. По этим данным, экстракты желтого красителя обладали ясно выраженной зеленой флуоресценцией. Подобные хромогены и цитохромы были выделены еще в 1879 г. из сыворотки коровьего молока в виде желто-оранжевого вязкого вещества, названного лактохромом. Подобные соединения были получены, из различных растительных и животных тканей разными исследователями. Однако в свое время к этим красителям не было привлечено должного внимания. Интерес к ним возник в связи с биологическим изучением выделенного из белков куриного яйца желтого флуоресцирующего в водном растворе красителя, названного ово-флавином (1), и выделенного аналогичным путем из молока красящего вещества, получившего название лактофлавин. Биологическое изучение этих флавинов на крысах показало, что действие их идентично с действием витамина В2; они благоприятно влияли на рост молодых крыс с экспериментальной задержкой роста на почве
В2-авитаминоза. Одновременно было установлено, что витамин В2 антипеллагрическим действием не обладает. Для того, чтобы предупредить пеллагру у животных, находящихся на В2-авитаминозном рационе, к нему необходимо было прибавлять, кроме флавина, еще дрожжевой отвар. К этому времени (2) было уже доказано, что в дрожжах содержится фермент—желтый пигмент, играющий in vivo и in vitro важную роль в окислительно-восстановительных реакциях.
В дальнейшем было установлено, что желтый фермент идентичен с открытыми ранее флавинами, а следовательно, и с витамином В2. Это знаменательное открытие имело очень большое значение для дальнейшего изучения как витаминов, так и ферментов. Дальнейшие работы привели к тому, что уже в j 935 г. была определена химическая структура лактофлавина, как трициклического 6,7-диметил-9-(й-рибитил)-бензиЛаллоксазина. Этот кристаллический препарат, вполне активный в качестве фактора роста, не оказывал, однако, лечебного действия ни при пеллагре собак «black tongue», ни при пеллагре человека. Одновременно было установлено, что пеллагра— своеобразное заболевание кожи и центральной нервной системы у человека — излечивается комплексом витаминов В2* В 1937 г. был получен бесспорный лечебный эффект при лечении пеллагры собак никотиновой кислотой, выделенной из дрожжей, оболочек риса и других объектов, а вскоре опубликован ряд клинических работ о терапевтическом действии никотиновой кислоты при пеллагре человека. Этих данных накопилось вполне достаточно для того, чтобы в дальнейшем рассматривать пеллагру как заболевание, связанное с отсутствием в организме никотиновой кислоты, а не лактофлавина. С момента получения кристаллического витамина В2—лактофлавина—дальнейшее его изучение пошло весьма интересным и своеобразным путем.
К этому времени было обнаружено, что витамин В2 широко распространен в растительном и животном мире. Кроме дрожжей, являющихся превосходным источником витамина В2, витамин был выделен из печени'и назван гепатофлавином; из почек и кишок— аналогичный ему ренофлавин; из яичного белка был выделен ово-флавин, и т. д. При дальнейшем исследовании была установлена тождественность всех этих флавинов с витамином В2. При этом было обнаружено, что часть флавина в природе находится в свободном, водорастворимом и способном к диализу состоянии, другая—иногда более значительная часть—находится в организме животных и растений в виде флавопротеина, или желтого дыхательного фермента. В 1935 г. удалось разделить флавопротеин на составные элементы и вновь синтезировать его из этих составных частей. Была предложена следующая схема строения желтого дыхательного фермента:
О — р — да — ОснАние \
II \ I Втн
О 'он — Ништа. )
•jcmmoH
Согласно этой схеме, фермент образуется из фосфорного эфира рибофлавина путем агрегирования его к белку через посредство фосфорной кислоты—с одной стороны, и кислой и основной групп молекулы протеина—с другой.
Приведем один из примеров процесса выделения витамина В2 из естественных продуктов. Классическим способом получения фла-винов является адсорбция содержащих витамин экстрактов фулле-ровой землей (в кислой среде), элюция адсорбированного витамина смесью метилового спирта и пиридина, вторичная адсорбция на подходящих гелях, удаление примесей, осаждение пикриновой кислотой и кристаллизация витамина в виде таллиевых или серебряных солей.
Для получения флавинов в качестве исходного сырья используют сырую печень, хлебные прессованные дрожжи, молочную сыворотку.
Схема Труфанова по выделению рибофлавина из дрожжей заключается в следующем. Дрожжи подвергают автолизу для отщепления флавина от белкового носителя. Автолизат экстрагируют спиртом и подкисленной водой, экстракт отделяют центрифугированием. Рибофлавин из экстракта адсорбируют на асканите, из асканита его элюируют водно-спиртово-пиридиновой смесью. Из элюата витамин В2 вновь адсорбируют сульфидом свинца, после элюции повторно осаждают азотнокислым серебром. Серебряная соль разлагается сероводородом с последующей очисткой1.
