Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
Поскольку канцерогенные вещества обладают способностью флуоресцировать, напрашивалось предположение, что эти два свойства взаимно связаны. Известную аналогию этому можно усмотреть в явлении сенсибилизации некоторых реакций флуоресцирующими веществами**). По-видимому, •однако, флуоресценция не является отражением свойств, специфических для канцерогенных веществ. Брюс (1941 г.) [2] сопоставляет флуоресценцию и канцерогенные свойства ряда производных метилхолантрена - вещества, являющегося одним из наиболее канцерогенных из числа всех ¦синтезированных, и приходит к выводу, что между снижением канцерогенных свойств высших гомологов холантрена и их способностью флуоресцировать нельзя уловить параллелизм, если только сравнивать растворы в ¦ эквимолекулярных концентрациях.
Во всяком случае возможность использования флуоресцентных наблюдений для обнаружения канцерогенных веществ бесспорна [3], и применение для этого спектрально-люминесцентного метода теперь общепринято (ср. гл. V, стр. 60). Несмотря на дискретный характер спектров люминесценции этих веществ, надежная идентификация по ним отдельных
*) Структурная формула 3,4-бензпирена:
**) В этой связи интересны данные, приведенные в работах:
1) М. G. F е г г i, Фотодезактивация флуоресцирующими веществами гормона растений - индолилуксусной кислоты, Nature 168, 334 (1951).
2) М. G. F е г г i, R. G u i d о 1 i п, Флуоресценция и фотоинактивация зме-
иного яда, Science 113, № 2933, 300 (1951).
.3) Э. Я. Граевский, Г. К. О ч и н с к а я, М. В. Ш а а к, К вопросу
<о природе фотодинамического процесса, Журн. общ. биол. 13, 211 (1952).
1]
БИОЛОГИЧЕСКИ ВАЖНЫЕ ВЕЩЕСТВА
199
углеводородов представляет трудности из-за сходства спектров некоторых из них, а также из-за относительно большой ширины спектральных полос, что обусловливает возможность их перекрытия. В настоящее время эти трудности успешно преодолеваются. Ильиной [4] детально разработана методика обнаружения 3,4-бензпирена, сильно канцерогенного углеводорода, часто встречающегося даже в пищевых продуктах. Ею было применено замораживание растворов исследуемых веществ в парафиновом масле. Наиболее интенсивная полоса в спектре бензпирена (4035 А) начинает проявляться при концентрации 10'3%, а при концентрации 5-10"3% становятся заметными и следы полосы 4320 А. При условиях наблюдения, примененных Ильиной, полосы в спектре люминесценции сужены и выявляются особенно отчетливо; тем самым значительно повышается чувствительность анализов. Дальнейшее усовершенствование метода осуществляется Дикуном [5]. У анализировавшихся им замороженных при -196° С (77° К) гексановых растворов спектры люминесценции были квазилинейчатыми, и он надежно идентифицировал бензпирен по длинам волн главных линий снектра. До замораживания вещества подвергались хроматографированию. Богомолов применил этот же метод для анализа дыма из заводских труб; по его данным бензпирен можно было обнаружить даже при концентрации 10-9 г/г [6]. Ранее Томсоном [7] спектрально люминесцентным методом было показано, что в смолистых веществах,
¦ выделенных из дымовых газов, содержание бензпирена не превышало 10~6 г/г. Обнаружены следы бензпирена и в экстрактах типографской краски из газет.
В работе [8] сообщается о выделении бензпирена и других канцерогенных углеводородов из остатков выкуренных папирос. Канцерогенные углеводороды обнаружены в морских "уточках" (отряд усоногих), которые живут, прикрепляясь ко дну кораблей, утесам и т. д.; показано, что углеводороды попадают в животное извне, случайно, а не являются продуктами метаболизма [9]. Описан интересный факт уничтожения хиноном и канцерогенных свойств, и способности люминесцировать у растворов •бензатрена и метилхолантрена [10]. Люминесцентно-спектрографические •определения (на фотоэлектрическом фотометре) использованы для изучения степени канцерогенной активности различных углеводородов, а также их судьбы в живом организме 111]; на подопытных животных показано, что только сильно канцерогенные углеводороды длительно, на 3-3,5 месяца, сохраняются под кожей в области инъекции.
В работе [12] описаны опыты, произведенные на мышах, которым впрыскивали антрацен. Оказалось, что и этот углеводород канцерогенен, но латентный период у него очень длителен, достигает 27-29 месяцев. Отмечается, что в табачном пёке (Tabakteer) найден антрацен; это первое обнаруженное здесь канцерогенное вещество.
б) Эстрогенные вещества. Эстрогенные вещества, половые гормоны, представляют биологически важную группу соединений с конденсированными ароматическими ядрами. Многие из них обладают способностью флуоресцировать и для их определения тоже используют прием I. Свечение соединений этой группы лежит в большинстве случаев в коротковолновой части видимого спектра, и при измерениях интенсивностей свечения для количественных определений пользуются фотоэлектрическим фотометром. В некоторых случаях проводят дополнительные реакции.
Фолликулин. При растворении фолликулина в спирте получаются растворы, флуоресцирующие сине-фиолетовым светом. При стоя-
