Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
4, то удаление сайта сплайсинга в экзоне 4 должно способствовать
использованию сайта сплайсинга на экзоне 5 и таким образом приводить к
образованию мРНК CGRP.
Напротив, мутант, у которого в экзоне 4 отсутствует сайт
полиаденилирования, может, по-видимому, преимущественно соединять экзон 3
с экзоном 4 и в результате образовывать аберрантную РНК, содержащую
четвертый интрон наряду с экзо-нами 5 и 6. (Как будет показано в пункте
Г, хотя аберрантная РНК и образуется, но не такая, какую следовало бы
ожидать исходя из этих простых соображений.)
Г. Результаты, полученные для этих двух мутантов, лучше всего можно
объяснить отбором сайта сплайсинга. Как объяснялось в пунктах Б и В,
гипотеза отбора сайтов сплайсинга правильно объясняет тот факт, что
мутант, у которого отсутствует сайт сплайсинга в экзоне 4, образует мРНК
CGRP. И напротив, предположение об отборе сайтов полиаденилирования
неправильно предсказывает, что мРНК CGRP будет образовываться у мутанта,
лишенного сайта полиаденилирования в экзоне 4. Следовательно, эти
результаты свидетельствуют в пользу гипотезы об отборе сайтов сплайсинга,
ибо она хорошо объясняет
422 Глава 10
способность линии клеток
лимфоцитов образовывать мРНК кальцитонина вместо мРНК CGRP.
Однако ни по одной из этих
простых моделей нельзя предсказать структуру аберрантной РНК,
образующейся в том случае, если линию клеток лимфоцитов трансфицировать
мутантом, дефектным по сайту полиаденилирования в экзоне 4. В аберрантной
РНК сохраняется как третий, так и четвертый интроны, даже если в экзоне 3
присутствует 5'-сайт сплайсинга, а в экзонах
4 и 5 - З'-сайты сплайсинга. Ни
одна из простых моделей альтернативного процессинга не предсказывает
подобного результата. В связи с этим полагают, что альтернативный
процессинг транскрипта кальцитонина/CGRP идет по более сложному пути
отбора сайтов сплайсинга, детали которого еще неясны.
Литература: Leff, S. Е.; Evans,
R. М.; Rosenfeld, М. G. Splice commitment dictates neuron-specific
alternative RNA processing in calcitonin/CGRP gene expression. Cell 48,
517-524, 1987.
10-24
А. Сколько процентов составляет
синтез ферритина от суммарного синтеза белка для каждого образца можно
определить, разделив показатель синтеза ферритина на показатель синтеза
суммарного белка клетки. Для первого препарата эти цифры составляют
700/750000 = 0,093%. Все остальные данные приведены в табл. 10-6.
Таблица 10-6. Синтез ферритина у крысы после различных вариантов
воздействия (ответ 10-24)
Добавка Актиномицин D Фракция Суммарный Синтез Доля
Приведенный Распределение
синтез ферритина ферритина
ферритин ферритина
Физиологиче Отсутствует Полисомы 750000 700 0,093
0,079 49%
ский раствор Супернатант 255000 1400 0,549
0,082 51%
0,161
Железо Отсутствует Полисомы 500000 900 0,180
0,153 89%
Супернатант 400000 500 0,125
0,019 11%
0,172
Физиологиче Полисомы 800000 800 0,100
0,085 53%
ский раствор Присутствует Супернатант 600000 3000 0,500
0,075 47%
0,160
Железо Присутствует Полисомы 780000 1380 0,177
0,150 89%
Супернатант 550000 700 0,127
0,019 11%
0,169
Чтобы определить распределение
мРНК ферритина между фракцией полисом и супернатантом, необходимо
вычислить уровень синтеза ферритина в каждом препарате исходя из
распределения суммарной мРНК между фракцией полисом и супернатантом. Для
этого следует умножить долю синтеза ферритина во фракции полисом на 0,85,
а долю синтеза его в супернатанте-на 0,15. Эти значения приведены в табл.
10-6 в столбце "Приведенный ферритин". Доля суммарной мРНК ферритина во
фракции полисом равна частному от деления значения в столбце "Приведенный
ферритин" на сумму значений в стобце "Приведенный ферритин". Для первого
препарата она равна
Контроль генной экспрессии 423
0,079/0,161 = 49%. Остальные значения приведены в последнем .
столбце табл. 10-6.
Б. Две особенности приведенных данных со всей очевидностью указывают на
