Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
позволяют определить, какова протяженность этого домена в направлении З'-
конца. З'-конец связывающего домена можно определить точнее, если
использовать набор делеций, которые затрагивают разные по длине участки
со стороны З'-конца при том, что 5'-конец остается интактным.
B. Присутствие трех по-разному запаздывающих в геле полос, выявляемых
при анализе смеси продуктов трансляции клонов 3 и 4 кДНК, указывает на
взаимодействие данных белков. Появление одной новой полосы говорит о том,
что в норме фактор транскрипции, связывающийся с энхансером, имеет форму
димера.
Новые полосы появляются потому, что одна молекула, синтезируемая на
кДНК клона 3, взаимодействует с одной молекулой, синтезируемой на кДНК
клона 4, причем образуемый ими димер имеет промежуточную мол. массу по
сравнению с димерами, состоящими из идентичных субъединиц. Промежуточная
мол. масса определяет и то промежуточное положение, которое эта полоса
занимает в геле.
Литература: Treisman, R.
Identification and purification of a polypeptide that binds to the c-fos
serum response element. EM BO J. 6, 2711-2717, 1987. Norman, СRunswick,
М.; Pollock, R.; Treisman, R. Isolation and properties of cDNA clones
encoding SRF, a transcription factor that binds to the c-fos serum
response element. Cell, 55, 989-1003, 1988.
10-13 Две модели позволяют сделать два разных прогноза относительно
активности мутантных рецепторов. Если ДНК-связывающий домен возникает при
взаимодействии с гормоном, то мутантные рецепторы, у которых отсутствует
домен связывания гормона, будут неспособны активировать экспрессию CAT.
Напротив, если при связывании гормона открывается предсуществующий ДНК-
связывающий домен, то некоторые мутантные репрессоры смогут конститутивно
активировать экспрессию CAT (в присутствии или в отсутствие гормона)
благодаря делеции той области белка, которая закрывает ДНК-связывающий
домен.
Хотя для окончательного утверждения необходимо провести более
детальные исследования на молекулярном уровне, все же экспериментальные
данные подтверждают предположение о том, что предсуществующий домен
связывания с ДНК маскируется доменом связывания гормона. Потери
аминокислот в случае четырех мутантов с наиболее длинными С-концевыми
сегментами (самыми короткими делециями), слишком велики для того, чтобы
обеспечить связывание гормона, однако недостаточны для демаскировки ДНК-
связывающего домена. У следующих четырех мутантов, которые конститутивно
активируют экспрессию CAT, ДНК-связывающий домен не закрыт и это не
зависит от связывания гормона. Два мутанта с самыми протяженными
делециями неактивны, поскольку у них полностью отсутствует домен,
взаимодействующий с ДНК.
Литература: Godowski, P.J.; Rusconi, S.; Miesfeld, R.; Yamamoto,
K.R. Glucocorticoid receptor mutants that are constitutive activators of
transcriptional enhancement. Nature 325, 365-368, 1987.
Молекулярно-генетические механизмы образования различных типов клеток
10-14
A. фазовая вариация Б. спаривание
B. тип спаривания (mating type locus, MAT)
Г. белок-репрессор (cl-белок); сго-белок
Д. гетерохроматин
Е. эффект положения мозаичного типа Ж. участок, контролирующий домен
3. ДНК-гираза
И. 5-метилцитозин (5-метил-С)
К. CG-островки, "домашнее хозяйство"
JI. тканеспецифические
Контроль генной экспрессии 415
10-15
A. Неправильно. Фазовая вариация у Salmonella происходит в результате
инверсии гена, а у N. gonorrhoeae-за счет конверсии генов.
Б. Неправильно. Хотя исходный ген, присутствующий в локусе МАТ, в
процессе переключения типа спаривания удаляется, все же переключение
обратимо, поскольку информация, содержащаяся в генах как a-типа, так и а-
типа, хранится в другом месте в виде молчащих генов.
B. Неправильно. Молчащие гены содержат все необходимые для
транскрипции регуляторные сайты. Они не экспрессируются из-за того, что
последовательности ДНК, расположенные на некотором расстоянии за ними,
каким-то образом блокируют их транскрипцию.
Г. Правильно.
Д. Правильно.
Е. Неправильно. Конститутивный гетерохроматин находится в
конденсированном состоянии во всех клетках, а факультативный
гетерохроматин сконденсирован лишь в некоторых типах клеток.
Ж. Правильно.
3. Неправильно. С помощью диффундирующих белков-регулято-ров нельзя
объяснить наследование гетерохроматинизации определенных областей
хромосомы, поскольку идентичные последовательности ДНК в активных и
неактивных хромосомах в одном и том же клеточном ядре регулируются по-
разному.
И. Правильно.
К. Правильно.
Л. Неправильно. Топологические эффекты, возникающие при расплетании
ДНК в одном специфическом сайте, могут ощущаться по всей петле домена, но
не по всей хромосоме. Те же механизмы, которые участвуют в активации
одной петли, изолируют ее от топологического воздействия соседних
доменов.
