Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
репликации, то должны были образоваться рестрикты, различающиеся по
размерам, в том числе такие, которые захватывали бы и репликативную
вилку. Фрагменты, содержащие разветвление, обладали бы иной подвижностью,
чем неразветвленные (см. задачу 9-19). В действительности подобной
аномальной подвижности фрагментов не наблюдается.
Литература: Spierer, A.; Spierer, P. Similar levels of polyteny in
bands and interbands of Drosophila giant chromosomes. Nature 307, 176-
178, 1984.
-15
A. ДНКаза I предпочтительно расщепляет активный хроматин. Эритроциты
экспрессируют глобин, и в результате обработки ядер эритроцитов ДНКазой I
снижается способность ДНК защищать глобиновую кДНК. Следовательно,
хроматин, с которого транскрибируется глобиновая РНК, предпочтительно
расщепляется ДНКазой I. Напротив, фибробласты не экспрессируют глобин, и
обработка ядер фибробластов ДНКазой I не влияет на способность их ДНК
защищать глобиновую кДНК. Таким образом, глобиновые гены в фибробластах
не более чувствительны, чем весь хроматин.
Б. При обработке ядер эритроцитов ДНКазой I деградации подвергаются
главным образом области активного хроматина. При сравнении степени
защищенности ДНК эритроцитов, меченной 3Н, препаратами суммарной ДНК
(95%) и ДНК, обработанной ДНКазой I (78%), оказалось, что около 17% (95-
78) ДНК эритроцитов чувствительны к ДНКазе I и, согласно этому критерию,
входят в состав активного хроматина.
B. Обработка нуклеосом трипсином влияет на их особую популяцию, а именно
на нуклеосомы из активного хроматина. Этот вывод сделан в результате
сравнения нуклеосом, обработанных трипсином, с ДНК эритроцитов,
обработанной ДНКазой I. При расщеплении микрококковой нуклеазой
нуклеосом, обработанных трипсином, получается ДНК, которая защищает
глобиновую к ДНК и ДНК эритроцитов (25 и 83% соответственно) в той же
степени, в какой это делает ДНК эритроцитов, обработанная ДНКазой I, (25
и 78% соответственно) (табл. 9-1).
(Если бы трипсин действовал на случайную популяцию нуклеосом, то
все последовательности ДНК, присутствующие в необработанных нуклеосомах,
обнаружились бы также в нуклеосомах, обработанных трипсином. В таком
случае обработанные и необработанные нуклеосомы не различались бы по
своей способности защищать глобиновую кДНК и ДНК эритроцитов.)
Г. Поскольку ДНК в составе отдельных нуклеосом в такой же степени
чувствительна к ДНКазе I, как и хроматин в ядре, то свойство активного
хроматина, отличающее его от суммарного хроматина, должно проявляться на
уровне отдельных нуклеосом. Эту точку зрения подтверждают данные о том,
что обработка нуклеосом трипсином делает нуклеосомы из активного
хроматина чувствительными к микрококковой нуклеазе. Отдельные нуклеосомы
из областей активного хроматина должны физически отличаться от других
нуклеосом.
Литература: Weintraub, Н.; Groudine, М. Chromosomal subunits in
active genes have an altered conformation. Science 193, 848-856, 1976
Репликация хромосом
9-16
A. S-фаза
Б. репликативная (репликационная) вилка, точка начала репликации
B. репликоны
Г. Т-антиген
Д. блокада повторной репликации
9-17
A. Неправильно. В клетках эукариот репликативные вилки передвигаются
примерно на порядок медленнее, чем в клетках бактерий. Более низкая
скорость, возможно, объясняется тем, что ДНК, упакованную в хроматин,
реплицировать труднее.
Б. Правильно.
B. Правильно.
Г. Неправильно. В отличие от синтеза большинства белков, который
происходит непрерывно на протяжении интерфазы, синтез гисто-нов
осуществляется главным образом в S-фазе, когда уровень гистоновой мРНК
повышается примерно в 50 раз в результате усиления транскрипции, а также
снижения скорости деградации мРНК.
Д. Правильно.
Е. Правильно.
Ж. Неправильно. Активная Х-хромосома реплицируется на протяжении всей
S-фазы, а инактивированная Х-хромосома, которая полностью состоит из
гетерохроматина, реплицируется на поздней стадии S-фазы.
3. Правильно.
И. Правильно.
К. Неправильно. В таких экспериментах по слиянию клеток синтез ДНК
стимулируется в ядрах, находящихся в фазе Gl5 а не в фазе G2. На стадии
G2 в точках начала репликации действует блокада повторного синтеза ДНК,
возникающая во время S-фазы.
9-18
А. Области треков с большим количеством гранул серебра соответствуют
тем фрагментам ДНК, которые реплицировались при высокой концентрации
метки. Области с меньшим содержанием гранул соответствуют тем участкам
ДНК, которые реплицировались при сниженной концентрации метки.
Б. Различие в расположении темных и светлых участков на треках
возникает вследствие того, что в двух экспериментах мечение
осуществлялось по-разному. В первом опыте (рис. 9-14, А) 3Н-тимидин
вводили сразу же после прекращения блокады синтеза ДНК, применяемой для
синхронизации. Следовательно, репликация в точках ее инициации начиналась
в присутствии метки, что приводило к возникновению темных участков по
