Молекулярная биология. Структура и функция белков - Степанов В.М.
ISBN 5-06-002573-Х
Скачать (прямая ссылка):
N02
I
NOj
I
«С.
ЯС^ ХсИ НС С" 01 | ||
"Чс/™2 ^
I
I II , ' П
I rUn. ; I «Ъ.
I ' I
+ гш2—СН—C00H NH—сн—соон
I
сн2
I
он
^,^-Динитрофтор- Серии ?, ^-Динитрофенил-
бенэол серии (ДНФ-серин);
имеет характерную желтую окраску,
(Атах и ЗбО.нм)
Реакция аминогруппы с альдегидами приводит к образованию непредельного соединения — так называемого основания Шиффа, в котором основность азота существенно понижена. Эта реакция обратима, и в кислой среде альдегид отщепляется с регенерацией аминокислоты. Для основания Шиффа характерна близость двойной связи к асимметрическому центру, что может способствовать рацемизации аминокисло-
13
ты за счет миграции двойной связи к о-атому углерода. Гидрирование двойной связи в основании Шиффа, например боргидридом натрия, стабилизирует связь С~N:
^СНз С^з ^СНз
СН СН
I I NaBH-
R—CH=0 +NH2—СН—СООН —> R-CH=N—СН—СООН - ¦ *
Альдегид Валин Основание Шиффа
СДз ^СН3 СН
I
R-€H2~NH—СН—СООН
I
N-Ал кил-вал и н
К аналитически важным реакциям с карбонильными соединениями относят взаимодействие аминокислот с трикетогидргтдетидратом (нингидрином):
слл I
2 I || СО + NH2-CH-C00H —> R—СНО + С02 +
СН\ с У
^СН^ ^СО' Альдегид
Нингидрин
/0(V'°4h
+ I II y.Wi_CNv II I
CH>v А У /С\ /СН
^CH^ ^co^ ^c^ XCH^
L
0
Фиолетовый Руеманна (^max = 570 нм)
На этой реакции основано как качественное, так и количественное определение аминокислот (в том числе в автоматических анализато-
14
pax).1 Флуоресцирующие производные образуются при реакции <*-аминокислот с о-фталевым альдегидом в Присутствии меркаптоэтанола. Эта реакция позволяет определять очень малые, порядка пикомолей, количества аминокислот:
1 .
СН^ЙХС-СН0 | ИЧПт ™
L | II t- ща~сн—соон ,
CHn. ^с-сно Ччлк
о-Фталевый альдегид
СН2-СН2-0Н
I
S
СТК с=с ,
. | , | у-сп-тп
/•си- с=сн
Продукт реакции, производное' изоиндола; интенсивно флуоресцирует Атах = 455 нм (Атах возбуждения равна 360 нм)
1.2.2. Реакции карбоксильных групп
Эти реакции аминокислот в определенной мере соответствуют реакциям алифатических карбоновых кислот. Этерификация протекает в безводных спиртах в присутствии кислотных катализаторов. Так, фенилаланин этерифицируется почти количественно в безводном метаноле в присутствии соляной кислоты или (лучше) тионилхлорида:
С бЩ С бЩ
I , I
сн2 сн2
I СПП„ I
NH2-CH—СООН + СН30Н - ? > +NH3-CH-€00CH3-Cl-
Метиловый эфир фенилаланина (хлоргидрат)
15
Эфиры аминокислот — важные исходные вещества дЛя пептидного синтеза — могут гидролизоваться, в особенности в щелочной среде (реакция омыления):
СН3-СН-С00СН3 СН3—СЙ-СООН + СНзОН
I I
РШ2 nh2
/
Обработка эфиров аминокислот безводным аммиаком превращает их в амиды:
СбН5 C6Hs
I I
сн2 ся2
I I
NH2-CH—СООСНз + кн3 —¦ nh2-cb—co-nh2
