Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
20 г аммония сульфата [(NH4J2SO4];
20 г натрия карбоната (Na2CO3) безводного.
Компоненты мелко измельчают в фарфоровой ступке в однородный порошок, который помещают в склянку из темного стекла с пробкой. Хранят 1—2 мес.
Ход определения. Исследуют свежеполученную мочу на ферме или в лаборатории. На фильтровальную бумагу на кончике скальпеля наносят реактив и смачивают несколькими каплями мочи, через 30 с учитывают результат. Появление сиреневой, красной или темно-фиолетовой окраски свидетельствует о наличии в моче повышенной или высокой концентрации ацетоновых тел.
Проба Ланге. Реактивы: раствор натрия нитропруссида 5 г/100 мл. Готовят перед употреблением;
уксусная кислота концентрированная;
25 %-ный раствор аммиака водного (NH4OH).
Ход определения. Исследуют мочу не позже чем через 3 ч после ее получения. В пробирку вносят 3—5 мл мочи, приливают 5—10 капель раствора натрия нитропруссида и 0,5 мл уксусной кислоты, смешивают и осторожно по стенке пробирки пипеткой наслаивают 2—3 мл водного раствора аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо.
Обнаружение кетоновых тел с помощью кетур-теста, мультитес-товых полосок или специальных таблеток проводят по инструкции, прилагаемой к набору.
Экспресс-метод заключается в том, что таблетку помещают на фильтровальную бумагу и смачивают несколькими каплями мочи. Через 2 мин окраску таблетки сравнивают с цветной шкалой. Наличие ацетона вызывает фиолетовое окрашивание разной интенсивности. Согласно шкале, реакцию оценивают как слабоположительную, положительную и резко положительную.
При использовании кетур-теста и мультитестовых полосок в моче обнаруживают ацетоуксусную кислоту в концентрации 5 мг/100 мл и выше, ацетон 40—70 мг/100 мл и более. Положительной пробой считают изменение окраски от бежевой до фиолетовой. Сравнение со шкалой дает ориентировочную оценку содержания ацетоуксус-ной кислоты, равного: (+) — около 5—40 мг/100 мл; (++) — около 40-100 мг/100 мл; (+++) — 100 мг/100 мл и выше.
Клиническое значение. Кетоновые тела не имеют почечного порога и выделяются с мочой в степени, пропорциональной нарастанию концентрации их в крови. Обнаружение кетоновых тел в моче является наиболее доступным и ранним тестом диагностики кетоза у коров, овцематок, буйволиц. При кетозе концентрация кетоновых тел в моче нарастает главным образом за счет ацетоуксусной кислоты и ацетона, которые вступают в реак-
18 — 4196
273
цию с натрия нитропруссидом. Наиболее высокая концентрация кетоновых тел в моче (около 800—1000 мг/100 мл) отмечается при остром тяжелом течении кетоза (И. П. Кондрахин). Кетоновые тела в моче в высокой концентрации обнаруживают при тяжелом течении сахарного диабета (кетоацидоз). Незначительное повышение кетоновых тел в моче можно установить при задержании последа, тяжелой хирургической инфекции и некоторых других патологических состояниях. При этом повышение кетоновых тел идет преимущественно за счет ?-оксимасляной кислоты.
Исследование мочевого осадка. Исследуют утреннюю порцию мочи. Готовят осадок путем центрифугирования 10 мл мочи 10 мин при 3000 мин . Надосадочную жидкость осторожно сливают, осадок переносят на предметное стекло и покрывают покровным, изучают вначале под малым увеличением микроскопа (8 X 10), а затем при большом увеличении (10 х 40), изучая форменные элементы крови, цилиндры, кристаллы солей.
Если исследование мочи нельзя провести в течение 20 мин после взятия, то в пробу добавляют консервант из расчета на 10 мл 0,5 мл уксусной кислоты, 1 кристалл тимола или 1 каплю 40%-но-го раствора формальдегида.
Выделяют организованный осадок, включающий эритроциты, лейкоциты, клетки эпителия, цилиндры и «неорганизованный» осадок, представленный кристаллическими образованиями (мочевая кислота, ураты, кислый мочекислый аммоний, кальция фосфат, гиппуровая кислота, магния-аммония фосфат, кальция карбонат, кальция оксалат, цистин, ксантин и др.).
Эритроциты. Неизмененные эритроциты имеют вид дисков зеленовато-желтого цвета, измененные, свободные от гемоглобина, —
бесцветные, в виде одноконтурных или двухконтурных колец (рис. 4, 2—4). В моче низкой относительной плотности встречаются бесцветные эритроциты, высокой плотности — сморщенные. В моче здоровых животных встречаются единичные эритроциты (0—2 в поле зрения). Появление большего количества их называют гематурией. Она может быть обусловлена выходом эритроцитов из почек — гематурия гломерулярного происхождения и из мочевыводящих путей при мочекаменной болезни, злокачественных опухолях в мочевом пузыре. При гломерулярной гематурии в моче часто содержится большое количество белка, при негломерулярной — его концентрация незначительна.
Рис. 4. Микроскопическая картина осадка мочи:
1 — лейкоциты; 2 — эритроциты неизмененные; 3 — эритроциты мало-измененные; 4 — эритроциты измененные (выщелоченные); 5 — клетка плоского эпителия
274
Лейкоциты. В моче щелочной реакции лейкоциты быстро разрушаются. В моче здоровых животных кислой реакции их количество от 0 до 2 в поле зрения. Лейкоциты имеют вид небольших зернистых клеток округлой формы (см. рис. 4, 1). Увеличение количества лейкоцитов в моче называют лейкоцитурией. Лейкоциты могут попадать в мочу из почек (пиелонефрит), мочевыводящих путей (цистит, уроцистит) или из всей мочевыводящей системы. Когда отмечают лейкоцитурию и выраженную протеинурию, говорят о ее почечном происхождении. Наибольшее количество лейкоцитов (50—100 и более в поле зрения микроскопа) отмечают при пиелонефрите, цистите. Однако степень лейкоцитурии при хроническом пиелонефрите не всегда соответствует тяжести поражения. При затухании процесса, отсутствии выраженного воспаления количество лейкоцитов в моче может оставаться в пределах нормы. Следует иметь в виду, что лейкоциты в мочу могут попадать из половых органов (вагинит, эндометрит, простатит и др.).
