Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
При необходимости пересчета в калия нитрат (мг/кг) найденное количество нитрат-ионов следует умножить на 1,6.
Для выражения нитратов в мг% (мг/100 мл) пользуются формулой
V1B-100
Обозначения те же, что указаны в предыдущей формуле; 100 — коэффициент для пересчета в проценты.
242
Пересчет результата на абсолютно сухое вещество проводят по формуле
г = х 100
1 100- И^'
где X] — содержание N-NO3, мг/кг сухого вещества; х — содержание N-NO3 в анализируемом материале, мг/кг; 100 — коэффициент для пересчета в проценты; W — влажность материала, %; 100 — W — сухое вещество анализируемого материала, %.
Если необходимо рассчитать содержание нитратного азота в процентах на абсолютно сухое вещество корма, пользуются формулой
V- jc- 100 „„„ X
(100- И0 ¦ 10 000 ' (100-И0-100'
где X1 — содержание N—NO3 в сухом веществе, %; х — содержание N-NO3 в анализируемом материале, мг/кг; 100 — коэффициент для пересчета в проценты; W — влажность анализируемого материала, %; (100 — W) — сухое вещество анализируемого материала.
Пример. В 1 кг зеленой массы кукурузы найдено 1000 мг нитратного азота. Влажность зеленой массы 75 %. В этом случае в 1 кг сухого вещества корма содержится
ш^ш = 4000 MrN-NO3
или в % на сухое вещество
1000¦ 100 25• 10 000
0,4 % N-NO3.
Эта методика дает возможность одновременно определить в одной и той же пробе как нитраты, так и нитриты.
Подготовка проб для анализа на нитраты и нитриты в обоих случаях аналогична применению водного извлечения или извлечения с помощью диализа. Из одного и того же фильтрата или диализата отбирают соответствующую часть для анализа — на нитриты по 10 мл, а на нитраты по 6 мл.
Определение нитритов в кормах, крови и патологическом материале с использованием реактива Грисса. Принцип. Метод основан на извлечении нитритов из проб дистиллированной водой и взаимодействии их с сс-нафтиламином и сульфаниловой кислотой в кислой среде с образованием азосоединения розово-красного цвета.
Реактивы: сульфаниловая кислота (ч. д. а.);
ос-нафтиламин (1-нафтиламин, ч. д. а.);
уксусная кислота концентрированная (х. ч.);
натрия нитрат (NaNO2, х. ч.);
реактив Грисса: а) 0,5 г сульфаниловой кислоты растворяют в 150 мл 12%-ного раствора уксусной кислоты; б) 0,1 г а-нафтила-
16*
243
мина растворяют при нагревании в 20 мл дистиллированной воды, фильтруют и смешивают со 150 мл 12%-ного раствора уксусной кислоты. Перед употреблением одну часть раствора «а» смешивают с равной по объему частью раствора «б». Растворы «а» и «б» хранят отдельно;
калибровочный раствор натрия нитрита основной. 0,15 г высушенного при температуре 70—80 0C NaNO2 растворяют віл дистиллированной воды. Раствор хранят в холодильнике, он устойчив в течение 1 мес. 1 мл этого раствора содержит 0,1 мг NO2;
рабочий калибровочный раствор натрия нитрита. 25 мл калибровочного раствора натрия нитрита основного переносят в мерную колбу на 500 мл и доводят объем до метки дистиллированной водой. Раствор_должен быть свежеприготовленным. 1 мл содержит 0,005 мг NO2. Этот раствор используют для построения калибровочной кривой.
Оборудование: фотоэлектроколориметр; химические пробирки; пипетки на 1 и 10 мл; мерные колбы на 500 и 1000 мл; конические колбы; химические стаканы; мешочки или пленка для диализа; цилиндры на 10, 50 и 100 мл.
Ход определения. Для исследования берут 10 г измельченного растительного или животного материала, цельной крови (молока). В качестве антикоагулянта крови используют 1%-ный раствор гепарина. Пробы растительного происхождения, образующие при извлечении нитритов неокрашенные растворы, переносят в конические колбы и заливают 50 мл дистиллированной воды. Нитриты извлекают в течение 1 ч, часто встряхивая содержимое колбы. Затем раствор фильтруют, пробу еще раз смывают 30 мл дистиллированной воды, объединяют эту часть раствора с первой, пропуская через тот же фильтр. Доводят объем до 100 мл и берут 10 мл для анализа на нитриты.
Извлечение нитритов из проб крови, молока, патологического материала и кормов растительного происхождения проводят методом диализа. Для этого измельченные пробы кормов, органов и тканей или пробы крови (молока) помещают в мешочки или пленку для диализа и погружают в сосуд с 50 мл дистиллированной воды на 2 ч. Затем диализат фильтруют в калиброванный сосуд, а мешочек с пробой еще раз погружают в 20 мл дистиллированной воды на 30 мин в тот же сосуд. Этот диализат, фильтруя, объединяют с первым, доводя объем фильтрата до 100 мл дистиллированной водой. 10 мл фильтрата отбирают в пробирку для анализа на нитриты.
В пробирку с 10 мл анализируемого фильтрата добавляют 0,5 мл реактива Грисса и через 15 мин определяют оптическую плотность анализируемого раствора на ФЭКе при длине волны 536 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против дистиллированной воды.
244
39. Приготовление стандартных растворов
Ns
пробирки
Раствор натрия нитрита, мл
Дистиллированная вода, мл
Содержание NO2", мг
