Новые методы культуры животных тканей - Фридлянской И.И.
Скачать (прямая ссылка):
Производят ткань, переплетение нитей в которой образует однородные отверствия (поры) размером около 2 мкм. Конечно, эти сита нельзя использовать для стерилизации, поскольку есть бактерии, размер которых меньше 0,25 мкм.
[МЕМБРАННЫЕ ФИЛЬТРЫ
В последние годы уапешно разрабатывается 'производство особого типа ситовых фильтров — мембранных фильтров. Размер пор мембранных
фильтров варьирует от 10 до 0,025 мкм. Создание и усовершенствование мембранных
фильтров сыграло особо важную роль для развития методов стерилизации фильтрованием. Впервые появились сита, размеры пор
которых не превышали размеров бактерий и даже вирусов. Мембранные фильтры, выпускаемые фирмой «Мил-лвпор» (Millipore), представляют собой тонкие пористые листы очищенных эфиров целлюлозы. Размеры пор этих фильтров, а также скорости протекания воды и прохождения воздуха в них указаны в табл. 2.2. Такие фильт-
Рис, 2.3, Фильтры-сита обычно состоят из одного слоя ¦металла ялк л ластика» переплетенных нитей ткани* .или металлической проволоки. Поры в таких фильтрах однородны н pflfc' пределеиЫ равномерно.
ры изготавливают и из других полимеров (нейлона, поливинилхлорида и PTFE). Пористость таких фильтров очень высока: около 84% их поверхности приходится на долю пор. Скажем для сравнения, что в обычных ситовых фильтрах из переплетенных нитей пустотами занято менее 50% поверхности. Эфиры целлюлозы, 'которые используются в производстве мембранных фильтров, биологически инертны и при имплантации человеку или животным не вызывают реакций со стороны тканей. Многочисленные и тщательные исследования, проведенные независимо в разных лабораториях, показали, что мембранные фильтры «Миллипор» не воспламеняются и не оказывают токсического действия. Они широко используются для имплантации тканей in vivo, а также для цитологических исследований на животных.
Мембранные фильтры, подобно всем другим ситовым фильтрам, задерживают частицы на поверхности, в свя-
Таблица 2.2
Скорость фильтрования воды и воздуха через мембранные фильтры
«Миллипор»
Тип фильтра Средний раз Скорость фильтрования при 25 °С и
мер пор, мкм 700 мм. рт. ст.
ВОДЫ, МЛ• МИН---1 • СМ---2 воздуха,
л мин---1-см---2
SC 8,0 850 55
SM 5,0 540 35
SS 3,0 400 20
RA 1,2 300 15
А А (черный) 0,8 212 11
DA 0,65 150 10
НА (черный) 0,45 64 4,5
PH 0,30 40 3,7
GS 0,22 21 2,5
VC 0,10 2 0,49
VM 0,05 1 0,31
VF 0,01 0,2 0,22
зи с чем, как уже упоминалось выше, их поглотительная способность ниже, чем глубинных. По этой причине, если фильтруют большие объемы жидкости или сильно загрязненную жидкость, лучше произвести предварительное фильтрование через глубинный фильтр. Свойство поверхностной адсорбции широко используется в аналитических исследованиях. Например, оно позволяет микробиологу-аналитику сконцентрировать все частицы или микроорганизмы, содержащиеся в пробе, на плоской поверхности, где их легко подсчитать, измерить или исследовать с помощью микроскопа. Материал, из которого изготавливают мембранные фильтры, выдерживает разность давления до 5 • 105 мм рт. ст. Практически пределы допустимого давления определяются не фильтром, а держателем фильтра. Эта характеристика ситовых фильтров выгодно отличает их от глубинных фильтров, для которых разность давления не должна превышать приблизительно 800 мм рт. ст.; при больших давлениях, как уже упоминалось выше, микроорганизмы могут проходить через фильтр.
Мембранные фильтры очень тонкие (около 150 мкм), поэтому в их матриксе задерживается очень мало жидкости. Эта характеристика особенно ценна в тех случаях, когда фильтруемая жидкость дорогостояща или ее очень мало. Опыт показывает, что при фильтровании через фильтры «Миллипор» почти не происходит потерь независимо от того, фильтруется несколько миллилитров или несколько тысяч литров жидкости. Поглощение мембранными фильтрами, как правило, незначительно. Свойства и титр фильтруемой жидкости обычно не меняются. Исключения наблюдаются при работе с вирусными частицами, размер которых составляет 0,1 мкм или больше. При пропускании же вакцины, содержащей мелкие вирусные частицы, такие, как вирусы полиомиелита, титр практически не меняется.
