Трансформированная клетка - Эш Б.Б.
Скачать (прямая ссылка):
224
При попытке расчета уровня циклических нуклеотидов на основании данных о содержании белка, ДНК, РНК, а также о массе сухой или сырой ткани, могут возникнуть недоразумения. Например, если нормальные клетки диплоидны, а опухоли полиплоидны, сравнение уровней циклических нуклеотидов на основе данных о содержании ДНК неправомочно. Неправомочно оно и в том случае, если распределение клеток по стадиям клеточного цикла в нормальной и опухолевой тканях различно. Сравнение уровня циклических нуклеотидов в опухолевых тканях in vivo содержит много неясного. Опухолевая ткань может быть частично некротизирована. Участки жизнеспособной опухолевой ткани могут содержать значительное число инфильтрирующих клеток. Организация системы кровоснабжения опухоли отличается от таковой в нормальной ткани. В отсутствие каких-либо изменений размеров клеток между опухолью и нормальной тканью наиболее целесообразным представляется сравнение содержания циклических нуклеотидов на единицу массы белка.
7.3.2. Гепатома
Повышенное содержание цАМФ обнаружено также в малигни-вированных узелках печени крыс (Chayoth et al., 1970) и гепатоме Морриса с различной скоростью роста (Thomas et al., 1973).
7.3.3. Адренокортикальная карцинома
Высокий уровень цАМФ обнаружен в адренокортикальной карциноме человека in vivo (Ney et al., 1969).
7.4. ЦИКЛИЧЕСКИЕ НУКЛЕОТИДЫ И ЭКСПРЕССИЯ
НОРМАЛЬНОГО ФЕНОТИПА В ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ КЛЕТКАХ
Если низкий уровень цАМФ ассоциирован с малигнизацией и (или) трансформацией, то должна быть возможной реверсия трансформированного фенотипа к нормальному путем повышения внутриклеточного уровня цАМФ. Однако следует помнить, что опухолевые клетки, обычно используемые в эксперименте, гораздо «сложнее» первично трансформированных вследствие появления нескольких дополнительных мутаций в системе цАМФ или в других локусах. Поэтому в данной опухолевой ткани только определенная часть клеток полностью или частично способна к реакции на повышение уровня цАМФ. Ниже обсуждаются типы опухолевых клеток, способных экспрессировать нормальный фенотип после повышения уровня цАМФ.
7.4.1. Нейробластома
Повышение внутриклеточного уровня цАМФ в некоторых клонах культивируемых клеток мышиной и человеческой нейробластом сразу же индуцирует экспрессию морфологических и биохимичес-
16 5-132»
225
ких признаков дифференцировки, характерных для зрелых нейронов (Prasad, 1975; 1979; Prasad, Sinha, 1978). В числе этих признаков — формирование длинных нейритов, дающих потенциалы действия; увеличение размеров сомы и ядра; повышение уровней общего содержания РНК и белка, а также цАМФ-связываняцих белков и по-л и(А)-содержащей мРНК; остановка клеток в 01-фазе клеточного цикла, повышение активности ферментов тирозингидроксилазы, до-палшн-р-гидроксилазы, холин-ацетилтрансферазы, ацетилхолинэсте-разы, глютамат-декарбоксилазы, цАМФ-фосфодиэстеразы и цАМФ-зависимого фосфорилирования белков; снижение синтеза гистонов и фосфорилирования гистона Нх; повышение чувствительности аде-нилатциклазы к допамину и норэпинефрину; устранение злокачественности. В регуляции дифференцировки клеток нейробластомы цГМФ, по-видимому, не играет существенной роли. Однако имеется сообщение (Zwiller et al., 1977) о том, что клетки нейробластомы в культуре намного лучше дифференцируются при суммарном воздействии аналогов цАМФ и цГМФ, нежели при действии одним аналогом цАМФ. Это указывает на то, что аналог цГМФ усиливает морфологическую реакцию, индуцированную цАМФ. Полученные in vitro результаты о роли цАМФ в дифференцировке клеток нейробластомы были подтверждены in vivo. Обработка цАМФ-индуци-рующими агентами вызывала дифференцировку в нейробластомах мыши (Chang, Prasad, 1976) и человека (Helson, 1975). Кроме того, спонтанная ганглионеврома и симпатические ганглии содержали в 8 раз больше цАМФ, чем незрелая круглоклеточная нейробластома (Imashuku et al., 1977). Присутствие цАМФ-резистентных клеток в опухоли указывает на то, что либо в этих клетках имеются дефекты цАМФ-системы, либо злокачественность определяется другими механизмами, отличными от системы циклических нуклеотидов. Изучение таких клеточных вариантов должно способствовать пониманию механизмов действия цАМФ.
7.4.2. Глиома
Морфологическую дифференцировку как в первичных культурах, так и в клональных клеточных линиях глии крысы (Edstrom et al., 1973; Perkins et al., 1975; Zim et al., 1973; Klier et al., 1975; Melutyre et al., 1972; Moonen et al., 1975; 1976; Shubert, 1975; Sho-piro, 1973) вызывают цАМФ-индуцирующие агенты. Лишение сыворотки и добавление дибутирил-цАМФ вызывают морфологические изменения в культуре астробластов новорожденных крысят, однако лишь в культурах, обработанных дибутирил-цАМФ, наблюдается ультраструктурное усложнение, свидетельствующее об истинной дифференцировке (Lim et al., 1973). Глиальный фактор созревания вызывает 8—12-кратное повышение концентрации цГМФ в культурах глиобластов мозга 17-днетшътх крысиных эмбрионов. Это повышение сохраняется и после того, как митотическое деление прекращается и клетки вступают в биохимическую дифференцировку (Turriff and Lim^ 1979). Уровень цАМФ в культурах глиобластов после сти-
