Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Было показано, что в отличие от таких экстрагированных факторов инду-цир,ованные in vitro Ts (Т-клетки, культивируемые в присутствии высокой дозы антигена в течение 4 дней) высвобождают антиген-специфический TsF при повторной стимуляции тем же антигеном [132]. Авторы этой работы получили супернатанты культур, содержавшие TsF, специфичные к «обычным» антигенам (KLH, КГГ), гаптену (NP) и синтетическим сополимерам аминокислот (GAT, (Т, G)-A — L) [208].' Хотя TsF, индуцированный in vitro, обладал такой же исключительной специфичностью к антигену и детерминантами, контролируемыми областью /, между экстрагированным и секретированным факторами существует ряд различий. Секретированный CTsF нерестриктирован по 1-3 и может продуцироваться клетками селезенки как отвечающих, так и неотвечающих линий; непосредственной мишенью CTsF являются обычные хелперные Т-клетки (CThI) [208—210].
Ямаучи и др. [211, 212] также получили секретированные супрессорные факторы, действующие на другие клетки-мишени. Один из них представляет собой антиген-специфический фактор, секретируемый in vitro I-J+, Lytl+-T-raieT-ками мышей, примированных к БЭ, в отсутствие антигена [Lytl TsiF (фактор, индуцирующий Т-супрессоры)]. Супернатант этих культур содержит медиатор, действующий на Т-клетки Lytl_2+ I-J", и индуцирует окончательный супрессорный эффект. Lyt-1 TsiF состоит из двух цепей: одна несет антиген-связываю-щий участок, но не детерминанты I-J, а другая — I-J-контролируемые детерминанты [213]. Ямаучи и др. [213] обнаружили, что Lyt-1 TsiF действует на Т-клетки Lyt-2+, заставляя их индуцировать второй фактор [Lyt-2 TseF (фактор Т-супрессоров-эффекторов)], подавляющий хелперную функцию Т-клеток Lyt-1+. Таким образом, установлено, что супрессия является многоэтапным лроцессом, в котором Tsi-клетки Lyt-1+, I-J+ (индукторы) высвобождают TsiF, активирующий Tse-клетки Lyt-2+, I-J+ (эффекторы), активность которых
опосредуется TseF, супрессирующим хелперные Т-лимфоциты Lyt-1+ (рис. 18.10). Этот фактор также обладает антигенной специфичностью, но не экспрессирует детерминант I-J. Было сделано два наблюдения: Lyt-1 TsiF действует на акцепторные Т-клетки Lyt-2+ только в случае совпадения их TgFH-локусов, несмотря на то, что a) TsiF несет детерминанты I-J на одной из полипептидных цепей и б) Lyt-2 TseF может супрессировать только Lyt-1+ Т-хелперные клетки линий, совместимых по Н-2, хотя этот последний фактор и не несет детерминант I-J. Из всего этого можно сделать вывод о том, что взаимодействие двух этих факторов необходимо для проявления конечного супрессорного эффекта [214].
I-J-положительная полипептидная цепь Lyt-1 TsiF, не связывающая антиген, соединяется с антиген-связывающей цепью Lyt-2 TseF в результате взаимодействия между I-J и «анти-I-J«-подобной структурой. Эта комплексная молекула приобретает теперь две активности: антиген-связывающий участок, полученный от Lyt-2 TseF, и IgVu-рестрикцию по отношению к клетке-мишени, которая свойственна I-J+-полипептидной цепи Lyt-1 TsiF. Комплексная молекула может оказывать супрессорное действие на соответствующие клетки-мишени, реагируя на антиген и собственные антигенные детерминанты (структура, сцепленная с IgFu). Эта модель, по-видимому, объясняет сложные взаимодействия клеток и факторов различных типов, выполняющих супрессорную функцию. Однако для окончательного подтверждения этой гипотезы необходимо провести соответствующие биохимические исследования.
В связи с этим требованием создается все большее число функциональных Т-гибридом и клонированных Т-клеточных линий, секретирующих антиген-специфические супрессорные факторы, что позволяет точнее анализировать различные TsF [215, 216]. Хотя мы не можем рассмотреть все TsF гибридомного происхождения, некоторые наиболее важные их свойства будут обсуждены в этом разделе. Танигучи и соавт. [217] получили ряд KLH-специфических Т-клеточных гибридом, из которых им удалось экстрагировать TsF, KLH-свя-зывающий I-J. Это привело к нескольким важным наблюдениям. Во-первых, TSF состоит из двух полипептидных цепей: одна несет детерминанты I-J, а другая — антиген-связывающий участок. Во-вторых, антиген-связывающий полипептид экспрессирует детерминанты, сцепленные с генетическим локусом IgVn [218]. В-третьих, эти два полипептида независимо транслируются in vitro в ооцитах лягушки двумя независимыми мРНК, экстрагированными из Т-клеточной гибридомы [219]. В-четвертых, антиген-связывающий полипептид опре-
I TseF
1 TseF
Антиген -специфический Н-2-рестриктированный
Рис. 18.10. Регуляторная цепь, построенная при анализе первичного антительного ответа на БЭ. Детали Lyt-1-2+ см. в тексте. (По [211, 212].) I-J+
Контрсупрессия
деляет специфичность супрессии, а 1-1+-полипептид участвует в генетической рестрикции, причем для супрессорной функции необходима ассоциация этих двух цепей.
Существует ряд других гибридом, продуцирующих TsF, специфичные к БЭ [220], гаптену [221, 222], синтетическим кополимерам аминокислот [223] с несколько различающимися свойствами. БЭ-специфический TsF гибридомного происхождения имеет мол. массу около 200 кДа и несет детерминанты, контролируемые областью, расположенной правее области I-J, но не областью /-/. Этот фактор действует непосредственно на В-лимфоциты. Гаптен ^Р)-специфи-ческий TsF несет I-J-ассоциированный основной перекрестный идиотип (NPb) в сочетании с детерминантами I-J. Интересен и GAT-специфический TsF, который, по-видимому, представляет собой один полипептид с мол. массой 24 к Да [224]. Все антиген-связывающиеучастки,идиотипы и детерминанты I-J выявляются на этой единственной полипептидной цепи. Трансляция in vitro мРНК из этой гибридомы подтвердила характеристику данного TsF [225]. Авторы работы считают, что этот TsF играет роль эффектора в GAT-специфическом супрессорном цикле.
