Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
2. Путем эксцентрической установки апертурной диафрагмы осветителя Аббе. Суженное отверстие диафрагмы должно лежать с наружной стороны кольца, ограничивающего апертуру объектива. Это
Рис. 106. Наблюдения за выходным зрачком объектива при установке освещения по методу темного поля с помощью децентрирован-ной апертурной диафрагмы конденсора. Представленные изображения можно видеть, если смотреть в тубус с удаленным окуляром.
а — изображение задней линзы при затянутой диафрагме конденсора ; 6 — изображение диафрагмы конденсора; в — изображение диафрагмы конденсора постепенно
исчезает.
апертурное кольцо ограничивает поверхность поперечного сечения конденсора, которая соответствует апертуре объектива (см. рис. 105). В этом случае опять-таки следует вынуть окуляр и смотреть в заднюю линзу объектива, устанавливая диафрагму конденсора так эксцентрично, чтобы ее внешний край выходил за пределы оправы задней линзы объектива, как показано на рис. 106.
Этого можно достигнуть также, помещая в держатель микроскопа самодельные децентрированные диафрагмы из картона или жести. При этом методе освещение имеет ограниченный азимут, вследствие чего легко возникают оптические искажения и яркость света относительно невелика.
Если луч падает на объект с различно ориентированными структурами, то светятся лишь те, которые лежат перпендикулярно к направлению падения лучей, т. е. те, на широкую сторону которых падает свет (азимут-эффект). При косом освещении по методу темного поля особенно отчетливо видно окаймление структур. Все остальное выглядит темным. Возникают сильные контрасты.
3. Путем косой установки вогнутого иди плоского зеркала с применением или без применения конденсора. Этот метод пригоден, однако, только для наблюдений с объективами, обладающими низкой апертурой. Отверстие предметного столика должно быть широким. В случае, если столик снабжен кольцами, то их, как и в методе 2, следует удалить. Этот метод, как и метод 2, не исключает возможности оптических ошибок вследствие азимут-эффекта.
4. С помощью конденсоров темного поля, которые освещают объект со всех сторон (азимут 360°), что позволяет избегать азимут-эффекта. Линзовые конденсоры темного поля называются диоптрийными,
Рис. 107. Азимут-эффект при боковом освещении квадратной решетки.
а — решетка; б — ее видимая часть при р 1f,o Пттянктпнный
падении света в направлении, указанном * ААуппш1
стрелкой. * Конденсор.
зеркальные — катоптрийными. У первых вследствие явлений флюоресценции в стекле поле зрения всегда несколько осветлено; у вторых, наоборот, возникает темное поле глубокого черного тона.
а) Диоптрийные конденсоры темного поля.
Состоят из систем линз с центральными диафрагмами'. Планктонный конденсор является диоптрийным конденсором темного поля, рассчитанным на слабые объективы с апертурой около 0,25.
Конденсор темного поля типа очкового Стекла обеспечивает большие поля зрения для лупных увеличений. Сменные конденсоры дают возможность путем удаления центральной диафрагмы переходить от освещения по методу темного поля к освещению по методу светлого поля (см. рис. 85).
б) Катоптрийные конденсоры темного поля.
Существуют параболоид-конденсоры и кардиоид-кон-
денсоры.
К а р д и о и д-к онденсоры являются самыми современными и наиболее широко применяющимися конден-
сорами темного поля. Впервые они были сконструированы Игнатопским и Зидентопфом. Свет в них отражается двумя сферическими зеркалами, из которых одно является выпуклым,
Рис. 110. Кардиоид-конденсор по Зидентоп-фу. Нижняя часть — центрирующее устройство — может отвинчиваться.
Рис. 109. Устройство катоптрийного конденсора темного поля (схематично).
j — параболоид-конденсор; 2 — кардиоид-конденсор; а — объект; б — зеркало; б—диафрагма; г — лучи, освещающие объект.
Рис. 111. Ход лучей в конденсорах темного поля фирмы Э. Лейтц с апертурой 1,20 (слева) и 0,80 (справа).
Другое — вогнутым. Освещение двумя зеркальными поверхностями значительно сильнее, чем одной, как в параболоид-конденсорах. Кардиоид-конденсоры имеют большей частью апертуру 1,2.
Благодаря системе зеркал катоптрийные конденсоры в отличие от диоптрийных исправлены ахроматически и апланатически. Однако они требуют очень точной центрировки по отношению к оптической оси микроскопа. Благодаря этому затемненная зона между внешней границей апертуры объектива и внутренней границей апертуры конденсора имеет небольшие размеры.
Это позволяет использовать для освещения большие значения апертуры. Кардиоид-конденсоры обычно снабжаются центрирующим устройством, позволяющим производить точную установку.
6.3. УСТАНОВКА КАРДИОИД-КОНДЕНСОРА
1. Источник света устанавливают на расстоянии 30 см от плоского зеркала и производят точную центрировку. Для этого сильно сужают отверстие диафрагмы поля, получают по Кёлеру изображение источника света на фланце конденсора или на зеркале и равномерно освещают поле диафрагмы.
