Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
157
Рис. VL24. Разделение фенолкарбоновых кислот [54].
Колонка: 30 см х 4 мм (внутр.); обращенная фаза: децнлснлан на меркосорбе Si 100, <1ръ 10 мкм;
элюент; вода - ледяная уксусная кислота (20%); и = 5,9 мм/с; Ар = 160 атм.
Проба: 1 - хинная кислота - метанол; 2 - хлорогеновая кислота; 3 - кофейная кислота; 4 - л-кумаро-вая кислота; 5 — .м-кумаровая кислота; 6 — о-кумаровая кислота; 7 —кумарин.
Карбоновые кислоты [30] (рис. VI.24) или их производные (рис. VI. 19) [58, 105], аминокислоты или их фенилгидантоинпроизводные [106, 107], пептиды [108], антибиотики [109, 110], просгагландин [111] и другие полярные вещества, например эрготамин, ЛСД [112], N-нитрозосоединения [113] и производные флуорескамина [114], были разделены на обращенных фазах или определены в лекарственных препаратах и в биологических растворах.
В системах с обращенной фазой сорбция возрастает с увеличением числа неполярных групп. Этим методом можно разделять соединения не только одного гомологического ряда, но и одного поли-мергомологического ряда. Проводя элюирование смесью метанол — хлористый метилен, можно разделить или выделить, если проводится препаративное разделение, отдельные члены ряда поли-
158
Глава VI
Рис. VI.25. Анализ эпоксидной смолы Ероп 1004 [116].
Колонка: 120 см х 2 мм (внутр.); неподвижная фаза: кораснл — бондапак Cu> dfsz 40 мкм; элюент: градиентное люнрованне с переходом от смесн вода - 30% ТГФ к смесн вода — 90% ТГф;
F = 1 мл/мнн.
стирола до молекулярной массы примерно 3000 [115]. На рис. VI.25 показано разделение на обращенной фазе эпоксидной смолы [116]; чтобы сократить длительность анализа, в процессе элюирования в данном случае в элюенте увеличивается содержание тетрагидрофу-рана (ТГФ).
Сильнополярные хорошо растворимые в воде соединения типа пентаэритрита [117] и олигосахаридов [116] также были разделены на обращенной фазе, причем моно- и дисахариды были разделены на химически модифицированной обращенной фазе - химически связанном 3-аминопропилсилане. На рис. VI.26 показано разделение моно-и дисахаридов на такой химически модифицированной фазе [116].
Химическая прививка к поверхности силикагеля иных, чем алкил-силаны, органических молекул всегда снижает адсорбционную активность твердого тела. Поэтому на таких неподвижных фазах, используя смеси элюентов со средней элюирующей силой, можно разделять полярные соединения. Кроме того, при замене алкилсиланов на другие органические соединения селективность неподвижной фазы меняется. Свойства подобных неподвижных фаз сильно зависят от
Адсорбционная хроматография
159
/
Рис. VI.26. Разделение сахаров [П6].
Колонка: 30 см х 4 мм (внутр.); непод внжная фаза: ^-бондапак-карбогндрат,
dp± 10 мкм; элюент: ацетоннтрнл — вода
(75:25).
Проба: I — фруктоза; 2 — глюкоза; 3 - сахароза; 4 —мальтоза.
степени их покрытия. Фазы с различными органическими радикалами и одинаковой степенью покрытия сравнивать очень трудно, соответственно очень трудно определить точно влияние функциональных групп. Наряду с амино- или углеводными фазами,
о которых уже говорилось выше, в продаже имеются еще фазы с ни-трильными и гликольными группами. Последние, по-видимому, предпочтительны в ситовой хроматографии пептидов при использовании в качестве элюента воды (см. гл. IX). Если элюирование ведется полярными растворителями, например вода — метанол, основное влияние на разделение оказывает обращенная фаза, тогда как в системах неполярный элюент — носитель с неэкранированными сила-нольными группами на селективность разделения влияют и полярные функциональные группы (см. рис. VI22).
В. Полиамидные смолы
По полярности полиамидные фазы (см. гл V, разд. Б, гл. VI. разд. Б. 4) стоят между силикагелем и системами с обращенной фазой. Однако из-за медленной диффузии в неподвижную фазу полимера мас-сообмен на них все же хуже, чем на силикагеле или на неподвижных фазах типа «щеток». Этот вид носителя занимает как бы промежуточное положение между химически модифицированными твердыми фазами и распределительными системами.
На полиамидных смолах можно проводить разделение хинонов, фенолов, сульфонамидов, консервантов пищевых продуктов [118-120], денсиламинокислот [121] и металлопорфиринов [122].
160
Глава VI
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Snyder L. R., Principles of Adsorption Chromatography. New York, Dekker, 1968.
2. Unger K., Angew. Chemie, 84, 331 (1972).
3. Пег K., The Colloid Chemistry of Silica and Silicates. Ithaca, University Press, 1965.
4. Uihlein М., Dissertation Saarbrucken, 1971.
5.. Sebestian /., Brust E. 0., Halasz I., in Perry S. G. (Ed.), Gas Chromatography 1972. Ec. Applied Science, Barking, Essex, 1973.
6. Brust E. O., Sebestian I., Halasz I., J. Chromatogr., 83, 15 (1973).
7. Sebestian I., Halasz I., Chromatographia, 7, 371 (1974).
8. Hesse G., Z. Anal. Chem., 211, 5 (1965).
9. Hesse G., Chromatographisches Praktikum. Frankfurt/Main, Akadem. Ver-lagsgesellschaft, 1968.
10. VMlecchia R., Thiebaud М., Frei R. W., J. Chromatogr. Sci., 10, 411 (1972).
11. Karger B. L., Guiochon G., Martin М., Loheac J., Anal. Chem., 45, 496 (1973).
