Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Рекомендации по предупреждению контаминации
клеточных культур мнкоплазмамн н вирусами
1. Приобретать клеточные линии, свободные от микоплазм и вирусов, из надежных источников, гарантирующих отсутствие микоплазм. Проводить криоконсервацию клеток на первом пассаже.
2. Проводить регулярный контроль контаминации (не реже 1 раза в месяц). Контаминированные линии по возможности уничтожать.
3. Применять карантинное отделение клеточных линий, не проверенных на микоплазмы, и особенно для тех клеточных линий, в которых микоплазмы обнаружены. С такими культурами необходимо работать в отдельных боксах или, если это невозможно, после работы с чистыми линиями, в частности, не использовать один и тот же флакон со средой для культивирования чистых и контаминированных линий; разливать среды и сыворотки небольшими объемами, которые можно быстро использовать.
4. По возможности использовать для культивирования клеток питательные среды без антибиотиков.
5. Тщательно проверять на контаминацию микоплазмами все ингредиенты сред и рабочие растворы, особенно сыворотку и трипсин.
6. При пересеве клеток сначала разлить свежую питательную среду по чистым флаконам, а потом уже сливать культуральную среду из флаконов с клеточными культурами. Разливать среды и клеточную суспензию только с помощью пипеток, а не через край. Использованные пипетки помещать в стакан с 3 %-ным раствором
хлорамина или карболовой кислоты; культуральную жидкость сливать в стакан с дезинфицирующим раствором.
7. После работы провести тщательное дезинфицирование (растворами хлорамина, карболовой кислоты или 70 %-ным этанолом) рабочей поверхности стола, боковых стенок бокса и всех предметов, находящихся в боксе. Ввести строгие меры по содержанию в чистоте соседних с боксом помещений.
Литература
1. Пилле Э. Р. Обязьяны как источник вирусных заболеваний человека / Вопр. вирусологии. 1985. Т. 30. С. 138—144.
2. Дзагуров С. Г. Проблема безопасности профилактических препаратов // Между-народ. симп. по стандартизации медицинских биологических препаратов. М., 19.76. С. 1—4.
3. Новохатский А. С. Тканевые и клеточные культуры в вирусологии и молекулярной биологии. М., 1979. 156 с. (Итоги науки и техники. Сер. Вирусология / ВИНИТИ; Т. 8).
4. Stanes Van G. Cellular changes, probably virus induces in primary rabbit kidney cells // Woint roho/labs Symposium on the standardization of cell substrates for the production of virus vaccines. 1976. P. 15.
5. Welke G. Die Ververndung von Diploidzellinien als Vermehrungssubstrat fur die Virusimpfstoffproduction // Zbl. gesamte Hyg. 1980. Bd 26. P. 365—372.
6. Gravell М., London W., Hamilton R. et al. Transmission of simian AIDS with type D retrovirus isolate//Lancet. 1984.-N 8372. P. 334—335.
7. Cowen R. Virus identified as possible cause of simian AIDS // Res. Resour. Rept. 1984. Vol. 8. P. 1—6.
8. Miyoshi I., Fyjistrita М., Yoshimoto Sh. et al. Transmission of monkey retrovirus similar to human T-cell leukemia virus by blood transfusion // Jap. J. Cancer. Res.
1984. Vol. 75. P. 479—481.
9. Letvin N., Hunt R., Finberg R. Animal models of AIDS // Simian Oncol. 1984. Vol. 11. P. 18—28.
10. Chronic infections // Symp. Royal College of Pathologists /Ed. G. Dick. London, 1972. P. 1.
11. Aderca J. Infectii cronice eu virusuri ARN in culture celiulare. Evolutie, mecanism de persistenta // Stud, si cerc. inframicrobiol. 1971. Vol. 22. P. 315—329.
12. Астахова А. В. Некоторые биологические и физико-химические свойства вируса, выделенного из культуры клеток почек куриного эмбриона // Вопр. вирусологии.
1977. № 3. С. 345—351.
13. Голубев Д. Б., Соминина А. А., Медведева М. И. Руководство по применению клеточных культур в вирусологии. М., 1976. 314 с.
14. Гаврилов В. И., Семенов Б. Ф., Жданов В. М. Хронические вирусные инфекции и их моделирование. М., 1974. 256 с.
15. Миллер Г. Г. Особенности морфогенеза вирусов в условиях смешанных инфекций. М., 1980. 114 с. (Итоги науки и техники. Сер. Вирусология / ВИНИТИ; Т. 9).
16. Анджапаридзе О. Г., Богомолова Н. Н., Борискин Ю. С. Персистенция вирусов. М., 1984. 256 с.
17. Barile М. F. Mycoplasma infection of cell cultures // Isr. J. Med. Sci. 1981. Vol. 17. P. 555—562.
18. McGarrity G. J., Vanaman V., Sarama J. Cytogenetic effects of mycoplasmal infection of cell cultures: a review //In Vitro. 1984. Vol. 20. P. 1 —18.
19. Stanbridge E. /., Doersen С. /. Some effect that Mycoplasmas have upon theip infected host //Mycoplasma infection cell cultures. New York, 1978. P. 119—134.
20. Barile M. F. Mycoplasma — tissue cell interactions // The mycoplasmas. New York,
1979. Vol. 2. P. 465.
21. O’Brien S. I., Simonson /. М., Grabowski M. W., Barile M. F. Analysis of multiple isoenzyme expression among twenty two species of Mycoplasma and Acholeplasma //
J. Bacteriol. 1981. Vol. 146. P. 222—232.
22. McGarrity G. /., Carson D. A. Adenosine phosphorylase-mediated nucleoside toxicity. Application toward the detection of mycoplasma infection in mammalian cell cultures//Exp. Cell Res. 1982. Vol. 139. P. 199—207.
