Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
37. Hidaka К-, Siminovitch L. Enhancement effect of amphotericin В on the DNA mediated gene 'transfer //Gann. Jap. J. Cancer Res. 1984. N 237. P. 228.
38. Yelle J., Dion М., Hamelin C. Efficient transfection of mammalian cells with viral DNA in optimal culture conditions//J. Virol. Meth. 1983. Vol. 7. P. 321—326.
39. Reeves R., Gorman С. М., Howard В. H. Construction and transfer into mammalian -cells of a vector containing insect histone genes // Genetic engineering in eukaryotes. New York; London, 1983. P. 73—88.
40. Yoakum G. H., Korba В. E., Lechner J. F. et al. Highfrequency transfection and cytopathology of the hepatitis В virus core antigen gene in human cells // Science. 1983. Vol. 222. P. 385—389.
41. Littlefield J. W. Selection of hybrids from mathings of fibroblasts in vitro and their presumed .recombinants // Science. 1964. Vol. 145. P. 709—710.
42. Mulligan R. C., Berg P. Selection for animal cells that express the Escherichia coli gene coding xanthine-quanine phosphoribosyltransferase j I Proc. Nat. Acad. Sci.USA. 1981. Vol. 78. P. 2072—2076.
43. Mulligan R. C., Berg P. Factor govering the expression of a bacterial gene in mammalian cells //Mol. Cell Biol. 1981. Vol. 1. P. 449—459.
44. Graf L. N., Kqplan P., Silagi S. Efficient DNA-mediated transfer of selectable genes and unselected sequences into differentiated and undifferentiated mouse melanoma clones //Somat. Cell Mol. Genet. 1984. Vol. 10. P. 139—151.
45. Ringold G. М., Dieckman B., Lee F. Coexpression and amplification of dihydrofolate reductase cDNA and the Escherichia coli XGPRT gene in Chinese hamster ovary cells//J. Mol. Appl. Genet. 1981. Vol. 1. P. 165—175.
46. Kaufman R. J., Latt S. A., Sharp P. A. Expression and amplification of DNA introduced into mammalian cells // Gene amplification. New York, 1982. P. 245—250.
47. Kaufman R. J., Sharp .P. A. Construction of a modular dihydrofolate reductase cDNA gene: analysis of signals utilized for efficient expression //Mol. Cell Biol. 1982. Vol. 2. R 1304—1319.
48. Kaufman R. J., Sharp P. A. Amplification and expression of sequences contransfected with a modular dihydrofolate reductase complementary DNA gene//J. Mol. Biol. 1982. Vol. 159. P. 601—622.
49. Jimenez A., Davies J. Expression of a transposable antibiotic resistance element in Saccharomyces //Nature. 1980. Vol. 287. P. 869—871.
50. Colbere-Garapin F., Horodniceanu F., Kourilsky P., Garapin A.-C. A new dominant hybrid selective marker for higher eukaryotic cells //J. Mol. Biol. 1981. Vol. 150 P. 1 — 14.
51. Colbere-Garapin F., Horodniceanu F., Kourilsky P., Garapin A.-C. Construction of a dominant selective marker nsefull for gene transfer studies in animal cells // Develop. Biol. Stand. 1982. Vol. 50. P. 323—326.
52. Southern P. J., Berg P. Transformation of mammalian cells to antibiotic resistance with a bacterial gene under control of the SV40 early region promotor //J. Mol. Appl. Genet. 1982. Vol. 1. P. 327—341.
.53. Southern P. J., Berg P. Mammalian cell transformation with SV40 hybrid plasmid vector // Eukaryotic virus vectors. New York, 1982. P. 41 — 45.
Трансформация нормальных клеток
онкогенными последовательностями ДНК
Т. В. Поспелова
Институт цитологии АН СССР, Ленинград
В начале 80-х годов было высказано предположение, что в клетке должны существовать последовательности ДНК, ответственные за превращение нормальных клеток в опухолевые. Данные Мак-Канна и Эймса [1] однозначно указывали на тесную корреляцию мутагенного и канцерогенного действия агентов различного происхождения и позволяли предполагать, что именно на уровне молекул ДНК разворачиваются центральные события канцерогенеза. Однако прямых доказательств существования последовательностей ДНК, ответственных за превращение нормальных клеток в опухолевые, не было. Значительный прогресс в понимании механизмов канцерогенеза был связан с изучением онкогенных ретровирусов и обнаружением у них специальных трансформирующих последовательностей, которые были названы вирусными онкогенами (v-onc), а также с открытием в клетках различных видов позвоночных и Metazoa существования сходных с ретровирусными высококонсервативных последовательностей, которые получили название клеточных онкогенов (с-опс) [2].
Принципиально новые возможности для изучения онкогенов и их роли в процессе канцерогенеза появились в связи с разработкой методов переноса генов с помощью кальцийфосфатного преципитата ДНК [3]. Присутствие онкогенных последовательностей в ДНК определялось по морфологической трансформации, которая выражалась в появлении «фокусов» роста или, как говорят, «фокусов» морфологической трансформации. «Фокусы» представляют собой очаги многослойного роста на монослое клеток, которые исходно имеют признак контактного торможения пролиферации в монослое, т. е. пролиферировать на монослое способны только трансформированные онкогенами клетки. Индукция таких «фокусов» препаратами ДНК из опухолевых клеток указывает на то, что в них присутствуют доминантно
