Исследование биологических макромолекул электрофокусированием иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами - Остерман Л.А.
Скачать (прямая ссылка):
Рис. 64. Кривая коррекции туше* ния по методу отношения каналов
В — эффективность счета; ^ — отношение счета в каналах А и В; /*—8 — номера флаконов с возрастающим сод^р* жаинем тушителя
шая доля импульсов, образующих спектр амплитуд для этого флакона.
Подсчитанные указанным образом значения можно отложить на графике (рис. 64). Соединив точки графика плавной линией, получают так называемую «кривую коррекции тушения» по методу «отношения каналов». Суть дела заключается в том, что функция E=f{R) хотя и нелинейна, но однозначна и одинакова для любого тушителя, так как изменения обеих величин (Е и R) обусловлены одним и тем же физическим явлением — снижением эффективности генерирования световых импульсов пролетающей через сцинтиллятор р-частицей из-за присутствия в нем молекул тушителя. Заметим, что график нельзя экстраполировать за граничные точки 1 и 8.
Теперь можно просчитать рабочий препарат, обнаружить в нем присутствие тушителей и оценить эффективность счета. Не изменяя настройки, просчитывают препарат одновременно в каналах А и В. Точно так же, как и ранее, вычисляют значение «отношения каналов» R. Из графика по известному R определяют ? — эффективность счета в канале А. Наконец, опираясь на уровень счета в канале А, подсчитывают истинную радиоактивность препарата: D—NJE. О степени тушения, очевидно, можно судить по значению R для данного препарата.
Вообще говоря, описанные операции можно провести и на простом одноканальном счетчике, перестраивая канал каждый раз по мере необходимости с «варианта Л» на «вариант В» и обратно.
Метод отношения каналов в принципе можно использовать и для оценки эффективности счета радиоактивности на фильтрах (см. ниже), где снижение счета из-за самопоглощения излучения в слое осадка сопровождается сдвигом спектра амплитуд импульсов. Моделировать «тушение» при построении градуировочной кривой здесь можно изменением объема осадка путем добавления к известной радиоактивности разных количеств «балластного» осаждающегося материала. Однако точность коррекции самопоглощения в осадке получается невысокой ввиду большей сложности и плохой воспроизводимости этого явления.
Метод «внешнего стандарта». В этом случае для определения й коррекции тушения вводят два дополнительных канала (обоз-
Рис+ 65* Сдвиг спектра амплитуд комптоновских электронов» порождаемых у-облучением от внешнего стандарта, при наличии тушения
НП и ВП — положения порогов во вспомогательных каналах К и L при коррекции тушения методом внешнего стандарта; И — сдвиг границы максимальных амплитуд за счес тушения
Рис. 66* Кривая внешней стандартизации (кривая тушения)
Е — эффективность счета; R “ отношение внешнего стандарта
начим их К и L), отрегулированные на заводе. Ни их пороги, ни счетчики не выведены наружу. Заметим, что механизм тушения не зависит от природы изотопа. Процесс тушения, как и сцинтилляции, начинается с возбуждения молекул растворителя, например толуола, а энергия этого возбуждения неизменна. Поэтому в прибор можно ввести свой собственный источник радиоактивности. Чтобы не вносить его внутрь рабочих флаконов, пользуются источником сильного ^-излучения, например радиоактивным цезием или радием. Этот неизменный источник и называют «внешним стандартом».
Механическое устройство может извлекать внешний стандарт из его надежного свинцового укрытия и подносить к флакону, когда он опущен в рабочее положение между двумя ФЭУ. Проникающее внутрь флакона к-излучение вызывает появление в сцинтилляторе комптоновских электронов (см. выше). Каждый из них порождает импульс сцинтилляций, который регистрируется точно так же, как импульс обычной р-частицы. Спектры амплитуд этих импульсов похожи друг на друга. При наличии тушения счет комптоновских электронов уменьшается, а спектр их амплитуд сдвигается «влево» точно так же, как было описано для [J-частиц (рис. 65).
Каналы К и L на заводе настраивают так же, как каналы А и В в методе отношения каналов. Если в прибор один за другим устанавливать флаконы стандартного набора с одинаковой радиоактивностью, но различной степенью тушения, то в силу тех же, рассмотренных выше причин отношение счета в каналах К и L (R=Nk/Nl) будет уменьшаться по мере усиления тушения. В этом методе величину R называют «отношением внешнего стандарта». Прибор сам подсчитывает его значения и печатает их на ленте. Отметим, что для определения Н в наборе стандарт-
ных флаконов используется только изменение степени тушения, а находящийся в них радиоактивный материал является лишним. Прибор предварительно подсчитывает его радиоактивность в обоих каналах для каждого флакона до поднесения к нему *f-излучателя, а затем, при подсчете значений NK и NL значения этих «внутренних радиоактивностей» вычитаются. То же самое происходит и при просчете рабочего препарата. Таким образом, отношение R определяется только по радиоактивности внешнего стандарта и зависит только от степени тушения в сцинтилляторе.
«Внутренняя», точно известная радиоактивность вполне определенного изотопа должна находиться во флаконах набора стандартов с тушением для того, чтобы одновременно с подсчетом R (каналы К и L) в любом из рабочих каналов А, Б и С можно было подсчитывать и значения эффективности счета (Я) для каждого из флаконов. Заметим, что эффективность можно определять при любом выборе положений порогов в этих каналах. Между величинами Е и R опять существует однозначная зависимость, которую можно представить графически (рис. 66). Ее называют «кривой внешней стандартизации», или «кривой тушения». Каждому выбору положения порогов в рабочем канале отвечает своя кривая тушения. Просчитывая в том же сцинтилляторе и при неизменной регулировке порогов рабочий препарат, по значению R, которое «сообщает» прибор, можно из кривой тушения найти эффективность счета и определить по ней истинную радиоактивность препарата, как было описано для метода отношения каналов.
