Подготовка биологического материала для молекулярно-генетических идентификационных исследований при массовом поступлении неопознанных тел - Корниенко И.В.
ISBN 5-7509-0904-2
Скачать (прямая ссылка):
2. Оперативная организация сбора, маркировки и консервации биологических образцов на месте происшествия.
3. Оперативная организация сбора, маркировки и консервации образцов крови прямых родственников разыскиваемых, транспортировка и хранение образцов крови в депозитарии. Организация и поддержание локального банка образцов крови прямых родственников разыскиваемых.
4. Транспортировка биологических образцов и образцов крови прямых родственников в депозитарий. Организация хранения и поддержание банка данных биологических образцов.
5. Экстракция суммарной ДНК из биологических образцов и ее документальная характеристика по следующим параметрам: количество, степень деградации полученного препарата ДНК, наличие/отсутствие ингибиторов ПЦР-реакции, тестирование работы ДНК-матрицы со стандартными праймерами в ПЦР-реакции. Передача препаратов ДНК с соответствующим паспортом для проведения экспертных работ и в депозитарий проб ДНК;
6. Проведение всех лабораторных этапов ДНК-идентификации личности с полученными препаратами ДНК, занесение первичных данных результатов ДНК-анализа в аналитиче-
скую базу данных; анализ и сопоставление результатов ДНК-типирования со всеми имеющимися по данному случаю данными.
7. Формулирование экспертного вывода и оформление его в виде акта исследования.
Сбор образцов биологических тканей
Служба ДНК-типирования координирует свою деятельность с техническими и другими экспертными группами, организациями и местными органами управления, принимающими участие в решении проблемы идентификации погибших. Производится ориентировочное определение объема экспертных работ и комплектация рабочей группы с необходимым количеством личного состава и инструментарием, достаточным для решения поставленной задачи по сбору биологических образцов и информации с места происшествия. Одновременно должны быть проверены и подготовлены резервные мощности хранилища для приема биологических образцов.
Отбор и подготовка образцов для хранения и экстракции ДНК — одна из наиболее важных процедур. В силу того, что ДНК-типирование на данный момент еще не является рутинной процедурой, многие лаборатории могут выполнять только часть полного ДНК-анализа, предоставляя выполнение более сложных методик специализированным центрам. Проведение ДНК-
типирования не всегда требуется для всех образцов, в то время как организация корректной процедуры сбора и хранения биологического материала является первоочередной задачей. Поэтому необходимо, чтобы даже небольшие центры имели средства, достаточные для сбора, характеристики и хранения биологических образцов.
Каждый отобранный образец должен иметь происхождение от индивидуального источника — это гарантия генетической однородности каждого биологического образца.
Коллекции должны быть запротоколированы по списку в порядке поступления и с указанием места сбора. Даже в случаях обгоревших или фрагментированных останков для проведения анализа необходимо отобрать хотя бы несколько микролитров крови или несколько миллиграммов ткани. При отсутствии образцов крови потерпевшего, для проведения ДНК-анализа требуется установить связь с соответствующими службами по идентификации и получить соответствующую информацию о возможных прямых родственниках и пробы их крови. На образцах крови несмываемым фломастером или шариковой ручкой должны быть указаны фамилия и инициалы донора, родственные отношения с погибшим, дата взятия биологического образца. Образцы крови родственников потерпевшего должны быть немедленно отправлены в службу ДНК-идентификации.
Отбираемый у неопознанных погибших биологический материал для проведения молекулярно-генетических исследований, как правило, представляет собой:
¦ кровь на марле (5x5 мм, высушить при комнатной температуре, избегая воздействия прямых солнечных лучей и загрязнения);
¦ кровь на FTA-картах;
¦ мышцы бедра, в том числе мумифицированные, 50 г;
¦ кожный лоскут, в том числе мумифицированный, 3 х 3 см;
¦ волосы с луковицами, при сроке нахождения трупа во внешней среде до трех лет, в количестве 50-60 штук;
¦ 2-3 ногтевые пластинки с пальцев стопы (кисти);
¦ 2-3 зуба;
¦ фрагмент диафиза бедренной или другой длинной трубчатой кости длиной до 5 см;
¦ при отсутствии компактного костного вещества надлежит забирать губчатое вещество кости в количестве приблизительно до 50 граммов.
¦ Ткани внутренних органов (приблизительно до 20 граммов).
Высушенные образцы могут содержать кровь, пятна семенной жидкости, зубную пульпу или костный мозг. Консервированные или не консервированные человеческие аутопсийные сб-
разцы, ткани из кишечника животных и замороженные мышцы также могут служить источниками ДНК.
Инструкция по сбору образцов крови для генетического анализа с использованием комплекта FITZCO/FTA Gene Guard system
В состав комплекта «FITZCO/FTA Gene Guard system» входят:
1. Два пластиковых конверта для хранения и транспортировки биологических образцов;
2. FITZCO-карточка для образцов крови (основная карточка);
3. FTA-карточка для образцов крови (контрольная карточка)