Клетки в морфогенезе - Исаева В.В.
ISBN 5-02-005760-6
Скачать (прямая ссылка):
Характерный для дифференцированного мышечного волокна комплекс ультраструктурных признаков с многократно описанной типичной пространственной организацией всех структур найден лишь при определенных условиях в крупных клеточных агрегатах, центральная часть которых занята х он дрот i топо лобным и клетками и внеклеточным мат-риксом с коллагеновыми волокнами. Именно на таком коллагеновом с\6страте располагаются наиболее дифференцированные миосимпласты нарулного слоя агрегата, характеризующиеся хорошо выраженной сарко*
мерной организацией, развитыми тубулярной и саркоплазматическои
системами, удлиненными и упорядоченно расположенными митохондриями ’’мышечного” типа, удлиненными ядрами с хорошо выраженным примембранным хроматином и ориентацией всех структур вдоль длинной оси миосимпласта (см.: Керкис, Исаева, 19816).
I аэная степень дифференциации пучков миофиламентов и орган»'
з^ш.и их в саркомеры, вплоть до развития упорядоченной саркомерьс* зоны С сопутствующим развитием Т-системы и саркоплазматическои сети
наблюдалась не только в шогоядерных симпластах, но и в одноядерны* .л ^ах аг регатов. Таким образом, в суспензионной культуре наблюдав
, ,04 Неупорядоченность пространственной организации ыиофибрилп в миосимп
лгсте суспензионной культуры(Ксркис, Исаева. 1983)
ВШШгЯШИИВ**'*' • ; Z^-симиласта сус-
плоение филаментов в цито Рис. 105. Кольцеобразное Р«П0П“**“ ^83)
пенэионной культуры (Керкис,
псти мио
ся и нарушение яормапьио^Р^^^^еревцирован!»»! саркомер-
генеза: появление одноядернь ^ очеНЬ
ной зоной. из суспензии миКР°тРУ ть
В цитоплазме образу»» окопоядс«
малочисленны, промежуточ шмпластичсс*
(Исаева, Керкис, I9S8). пенз,юнной кУльТ^аюкя одноядерные
В крупных агрегатах из ) ^ jqO) pacnonata 129
ким наружным слоем (см. Р
Ч к
клетки двух-трех четко отличающихся друг от друга типов. В первую очередь следует упомянуть фибробластоподобные клетки, сходные с фиб* робластамк соединительной ткани. Они обладают комплексом морфологических черт, присущих активно секретирующим дифференцированным фибробластам: большое ядро с четким ядрышком, развитый аппарат Гольджи, гладкий и гранулярный эндоплазматический ретикулум большое число секреторных гранул, занимающих иногда значительную часть цитоплазмы. Сходство не ограничивается морфологией; как показали данные электронной радиоавтографии, такие клетки интенсивно включают 3Н-пролин, являющийся полуспецифическим индикатором синтеза коллагена, волокна которого часто хорошо видны вокруг таких клеток (см.: Керкис, Исаева, 19816).
В центральной части агрегата располагаются клетки, сходные с хонд-робластами, причем можно обнаружить целый ряд клеток с промежуточной морфологией - от фибробластоподобных до хоидроцитоподобных. Центр агрегата между этими клетками заполнен межклеточным веществом, основным компонентом которого являются коллагеновые волокна. В него вкраплены отдельные клетки, морфологически сходные с хондро-цитами дифференцированного хряща. Клетки с мышечной морфологией в этой зоне агрегата не встречаются. Для центральной части крупных агрегатов весьма характерны и клетки, напоминающие адипоциты (Керкис, Исаева, 19816).
В течение первых суток после перевода из суспензии в условия вторичной однослойной культуры миосимпласты прикрепляются к стеклу, распластываются и движутся с образованием на переднем, ведущем крае сим л ласта псевдоподиальных выростов (см. рис. 101). При электронно-микроскопическом исследовании таких движущихся миосимпластов не обнаружено характерных для миотуб черт ультраструктурной организации, Морфологически многоядерные симпласты вскоре после прикрепления к субстрату представляют собой распластанный мультиполярный синцитий с фибробластоподобной ультраструктурой. Ядра в таком синцитии, как правило, сосредоточены в центральной части, иногда очень близко друг от друга.
На ведущем крае движущихся миосимпластов найдены пучки филаментов, сходные со стресс-фибриллами и подмембранными пучками мик-рофиламентов фибробластов, однако отличающиеся от типичных стресс-фибрилл тем, что в них появляются уплотнения, являющиеся, по-видимому, первым этапом формирования Z-дисков. В удлиненной части мио-симпласта, примыкающей к ведущему краю и также лишенной ультра-структурных черт дифференцированной миотубы, выявлены подмемб-
ранные пучки филаментов, многочисленные продольно-ориентированные микротрубочки, здесь же параллельно микротрубочкам располагаются ряды промежуточных филаментов. В зоне скопления ядер появляются пучки миофиламентов с электронно-плотными телами формирующихся
Z-дисков (см.: Исаева, Керкис, 1988).
Р, течение последующих 2-3 суток культивирования миосимпласты do вторичной однослойной культуре удлиняются и дифференцируются п
миотубы с типичной ультраструктурой.
130
Суспензионная культура миогенных клеток представляет собой весь-Ма привлекательную модень для изучения дифференцировки клеток г, трехмерных агрегатах, допускающих большую по сравнению с однослойной культурой полноту клеточных взаимодействий и частичную и-ита-и11Ю тканевой организации. Миогенные клетки образуют в суспензионной культуре агрегаил с тканеподобным, упорядоченным расположение* * клеток, существенно отличающихся по фенотипу как друг от друга так г оТ исходных клеток (Керкис, Исаева, 19816). Клеточный агрегат суспензионной культуры миогенных клеток можно рассматривать как своеобразную саморегулирующуюся систему. Упорядоченная тканеспецифическая рассортировка клеток в агрегатах, образовавшихся из диссоциированных эмбриональных клеток разных типов, описана в классических работах Москоны (Moscona, 1956) и Гольтфретера (Hollfreter, 1965). Степень гистотипической организованности в подобных клеточных агрегатах может быть очень высока. Проведенный нами электронно-микроскопический анализ агрегатов суспензионной миогенной культуры также показал большое морфологическое разнообразие клеток, составляющих агрегаты, однако в данном случае различные типы клеток возникают из относительно однородной исходной клеточной популяции.
