Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
Валепотриаты были разделены на колонке с силикагелем
гексан/этилацетат (20:3) [52]. Адсорбционная хроматография использовалась
и для разделения квассиноидов из Quassia ата-га и Picrasma excelsa.
Элюентом служила смесь дихлорме-тан/метанол (98:2) [53].
В последнее время для разделения терпеноидов стала более широко
применяться обращенно-фазовая хроматография. Некоторые примеры разделения
терпеноидов различных типов приведены в табл. 14.2.
14.4. Терпеноидные и стероидные гликозиды
Для разделения терпеноидных гликозидов различных типов применяется
обращенно-фазовая хроматография с использованием С is- или Cg-фаз и
смесей метанол/вода или ацетонитрил/вода в качестве элюента.
14.4.1. Иридоидные и секоиридоидные гликозиды
Иридоидные гликозиды содержат всего один или два углеводных остатка и
также представляют собой эфиры бензойной, коричной или других подобных
кислот. Их можно легко разде-
Вторичные растительные метаболиты 655
Таблица 14.2. Применение обращенно-фазовой хроматографии для разделения
терпеноидов
Разделяемые Неподвижная фаза Элюент Обнару Лите
терпеноиды жение ратура
(нм)
Сесквитерпены Лихросорб RP-18 Ацетонитрил/Н20 УФ (200, 54
эфирных масел Лихросорб RP-8 (85 : 15) 220)
4СН>-70% ацетонитрн-
ла в воде, линей
ный градиент
Сесквитерпены |л.-Бондапак С18 Метанол/Н20 УФ (200) 5S
Solatium (70 : 30)
Ент-кауреновые Зорбакс ODS Метанол/Н20 УФ (230) 56
дитерпеноиды (45 : 55)
Тетранотритерпе- Лихросорб RP-J8 Метанол/Н20 УФ(217) 57
ноиды (80 : 20)
Слабополярные Зорбакс ODS Метанол/Н20 УФ (202) 51
тритерпеноиды
Полярные тритер Зорбакс ODS Метанол/Н20 УФ(200) 51
пеноиды (80 : 20), 0,05%
муравьиной кисло
ты (88%-ной)
Г ермакронолиды Не указана Ацетонитрил/Н20 58
(I : 1) 59
Метанол/Н20
(70 : 30)
лить методом обращенно-фазовой ВЭЖХ. Обнаружение осуществляется УФ-
детектором со сменной длиной волны. Один из методов количественного
определения гарпагозида, содержащегося в корнях Harpagophytum procumbens,
описан в работе [60]. Разделение проводится на ц-бондапаке С18 путем
элюирования смесью метанол/вода (1:1). Предел обнаружения при 278 нм
составляет примерно 0,2 мг/мл, относительное стандартное отклонение 2-5%.
В аналогичных условиях было проведено аналитическое и полупрепаративное
разделение иридоидных гликозидов Veronica officinalis [61], Scrophularia
lateriflora [62], Euphrasia salisburgensis [63] и др. Хотя элюированием
водно-метанольными смесями можно разделить до шестнадцати иридоидных
гликозидов, получаемые при этом пики иридоид-пых кислот разрешены
неполностью (не достигают нулевой линии). Эти довольно редко
встречающиеся соединения можно разделить методом ион-парной
хроматографии, используя фосфат тетрабутиламмония в качестве противоиона
при pH 7,5 [64].
Секоиридоидные гликозиды, придающие горький вкус корням Gentiana и
родственным растениям, были разделены [65] на колонке, заполненной фазой
С18, при элюировании смесью метанол/вода (1:1). Полное (до нулевой линии)
разделение амарогентина, амаропанина и амаросверина потребовало всего
656 Глаза 14
15 мин. Авторы работы [66] также определяли те соединения, которые
придают горький вкус различным видам Gentiana, проводя разделение на
колонке с обращенной фазой при градиентном элюировании смесью
метанол/фосфатный буферный раствор. Одновременное определение
амарогентина, амаросве-рина и гентиопикрозидов в Swertia japonica было
осуществлено на колонке с силикагелем, элюентом служила смесь
хлороформ/этанол [67]. Однако количественное определение сверти-амарина -
основного компонента лекарственных средств этой группы, выпускаемых в
Японии, было проведено на неподвижной фазе Cis путем элюирования смесью
метанол/вода (10:90) [68]. Соединения обнаруживались по поглощению при
238 нм после 15-мин элюирования с объемной скоростью 1,0 мл/мин.
Секоиридоидные гликозиды различных растений рода Genta-urium были
разделены на сферисорбе ODS при элюировании смесью метанол/вода (15:85)
