Электрофорез в разделении биологических макромолекул - Гааль Э.
Скачать (прямая ссылка):
Последние разделы первой части книги касаются выявления, количественного определения и характеристики макромолекул на электрофореграммах. Здесь обстоятельно описаны самые различные практические приемы, причем авторы придают важное значение некоторым, казалось бы, второстепенным деталям, таким, как высушивание и разрезание электрофоре-грамм.
Если первую часть книги можно рассматривать как раздел* посвященный общим вопросам электрофореза, то три последу* ющие части представляют собой изложение основ «частного» электрофореза, т. е. описание принципов и техники электрофоретического разделения макромолекул разных типов: белков
(часть II), нуклеиновых кислот (часть III) и гликозаминогли-канов (часть IV). Во всех этих частях приведены исчерпывающие сведения об особенностях разделения каждого из перечисленных типов макромолекул и даны строго обоснованные рекомендации для выбора конкретных методик.
Большим достоинством книги является подробное описание многочисленных вариантов метода иммуноэлектрофореза, в котором высокая разрешающая способность, свойственная электрофорезу в гелях, сочетается со строгой специфичностью иммунных реакций.
В частях II—IV авторы во избежание повторений нередко отсылают читателя к предыдущим разделам, где даны более полные сведения, необходимые для понимания трактуемого вопроса.
Книга отличается четкой рубрикацией и хорошо иллюстрирована. В целом она представляет собой ясно и доступно изложенное фундаментальное руководство по электрофорезу, рассчитанное на специалистов различного профиля. Нет сомнения в том, что советские читатели с интересом встретят данную книгу и она окажется надежным помощником в их практической или научно-исследовательской работе.
Перевод книги выполнили Е. Б. Майзель (часть I), М. С. Морозова и С. Н. Хилько (части II—IV).
В. И. Розенгарт
Метод электрофореза широко используется при исследовании биологических макромолекул. Он отличается относительной простотой и дешевизной, что позволяет приспособить некоторые его варианты для массовых анализов, например, в клинических лабораториях. В этой книге мы попытались обобщить сведения о методах, основанных на движении макромолекул в электрическом поле. Такая попытка оправдана тем, что примерно за 40 лет существования электрофореза было создано огромное множество его разновидностей. Об этом свидетельствует хотя бы то, что выборочный список статей по электрофорезу, опубликованных только за период с 1968 по 1972 г. (J. Chromatography, Supplementary Volume, No. 4, 1975),
включает 8236 названий. Общее же число статей, несомненно, гораздо больше. Поэтому нашу задачу мы видели не в том, чтобы дать обзор всей литературы по электрофорезу, а в том, чтобы отгисать теоретические основы и практические аспекты наиболее важных его вариантов, а также привести характерные примеры использования этого метода при изучении белков, нуклеиновых кислот и гликозаминогликанов.
В процессе работы над книгой мы вскоре поняли, что критическая оценка преимуществ и недостатков отдельных методов принесет читателю больше пользы, чем простое перечисление лабораторных прописей. Тем не 'менее некоторые наиболее важные процедуры описаны весьма детально, что позволит легко воспроизвести их в экспериментальной работе. Для специальных же методик указаны лишь самые существенные моменты, а подробности читатель сможет найти в соответствующих оригинальных работах. В главах, посвященных методам выделения различных групп белков, нуклеиновых кислот и гликозаминогликанов, мы стремились показать, что применение того или иного приема фракционирования обусловлено свойствами разделяемых макромолекул данного типа. Во многих случаях выбор электрофоретического метода зависит от способов выделения и очистки анализируемого образца на стадиях, предшествующих электрофорезу, так как именно эти стадии сущест-
венны для получения при электрофорезе воспроизводимых результатов.
Фирмы, выпускающие оборудование и реактивы, указаны нами лишь в тех случаях, когда этого нельзя было избежать. Никакой систематической информации об источниках получения оборудования и реактивов мы не даем, поэтому следует подчеркнуть, что упоминание !или неупоминание какой-либо фирмы никак не связано с оценкой ее продукции.
Мы получили разрешение владельцев авторских нрав на воспроизведение рисунков и таблиц из различных публикаций, за что приносим им свою благодарность. Выражаем глубокую признательность всем коллегам, предоставившим нам оригиналы рисунков, приславшим препринты своих неопубликованных работ или оказавшим нам помощь ценными советами и критическими замечаниями. Наконец, но не в последнюю очередь, мы должны поблагодарить наших жен за терпение, проявленное ими при подготовке бесчисленных вариантов рукописи этой книги.
Э. Гааль Г. Медьеши JI. Верецкеи
Список сокращений
АНС — 8 -анилино-1-нафталинсульфоновая кислота Бис-акриламид — М^'-метиленбисакриламид БСА — бычий сывороточный альбумин ДАТД — диаллилтартардиамид ДМАПН — 3-диметиламинопропионитрил ДСН — додецилсульфат натрия ДФО — 2,5-дифенилоксазол ДФОБ — 1,4 -ди-2- (5-фенилоксазолил) бензол ДХН — дезоксихолат натрия ИЭТ — изоэлектрическая точка ИЭФ — изоэлектрическое фокусирование ЛВП — липопротеиды высокой плотности ЛДГ — лактатдегидрогеназа ЛНП — липопротеиды низкой плотности ЛОНП — липопротеиды очень низкой плотности СМЖ — спинномозговая жидкость ТЕМЭД — М^Ы^М'-тетраметилэтилендиамин ТХУ —трихлоруксусная кислота
