Фотосинтез С3 и С4 растений механизмы и регуляция - Эдвардс Дж.
Скачать (прямая ссылка):
lulysin)
Под названием (Onozuka RIO)
“онозука RIO”
Под названием “мейселаза” (Mei-celase)
Corp.
Hoechst U. K. Ltd. Hoechst House Salisbury Road Hounslow, Middx.
TW4 6JH England
Unwin and Co. Ltd. Prospect Place Welwyn, Bedfordshire, England
Meiji Seika Kaisha Ltd. 8-2 Chomc Kyobashi, ChuoJ<u Tokyo, Japan
Corp.
P.O.Box 12087 San Diego, CA 92112 USA
Пектиназа из Rkizopus sp. (содержит полигалактуроназу)
Под названием “мацерозим R10” (Macerozyme RIO)
Под названием ‘'мацераза” (Масе-rase)
Yakult Biochemical Unwin and Co., Ltd. Co., Ltd. (см. выше)
(см. выше)
Calbiochem-Behring Corp. (см. выше)
Пектиназа из Aspergillus sp.
Под названием "экстрактаза PC” (Extractase PC)
Под названием “рохамент Р” (Ro-hament Р)
Под названием “пектолиаза Y23-пектиназа” (Pectolyase Y23-Pecti-nase) из Aspergillus japonicus (активные компоненты—-полигалак-туроназа, пектинлиаза и неиден-тифицированный белковый фактор)
Fermco Biochemics, Inc. 2638 Delta Lane Elk Grove Village,
IL 60007 USA
Rohm G.m.b.H D-6100 Darmstadt Kirschenallee Postfach 4242 West Germany
Seishin Pharmaceutical Co., Ltd.
Noda, Chiba Japan
2. Нейлоновые сита Henry Simon, Ltd. Tetko, Inc.
P. О. Box 31 Precision Woven
Stockport, Cheshire, Screening Media
SK3 ORT 420 Saw Mill River
England Road, Elmsford
NY 10523 USA
3. Декстран
(Тм — средняя мол. масса 20 000) US Biochcmicals Pharmacia Fine
Corp. Chemicals.
(Тщ — средняя мол. масса 40 000) 21000 Miles Parkway ^eclcn
Cleveland, OH 44128 1ДекстРаи ‘«J
USA
(Декстран T20 и Т«)
ствовать другие ферменты. К гемицеллюлозам относится большая, очень сложная по составу гетерогенная группа полисахаридов, в которую входят ксилан, арабпнаиы, галактаны, мап-наны и глюкуроновая и галактуроновая кислоты. Различия в ¦составе гемицеллюлозы у разных видов могут очень сильно влиять на эффективность разрушения клеточной стейки под действием тех или ииых имеющихся в продаже препаратов ферментов.
А.6. Достоинства и недостатки методов механического и ферментативного разрушения клеток
В настоящее время эффективность получения фотоеинтети-чески активных хлоропластов с применением любого из этих двух способов во многом определяется тем, какое растение мы берем. При помощи механического разрушения клеток можно получить хлоропласты с очень высокой интенсивностью фотосинтеза, особенно если взять такие Сз-растения, как шпинат и горох.
В более поздних работах говорится также о том, что можно получить активно функционирующие хлоропласты и из протопластов мезофилла этих двух видов растений. В рутинных опытах использование протопластов для изучения ассимиляции С02 у шпината и гороха не дает никаких преимуществ. В то же время этот прием очень удобен, когда нужно определить внутриклеточную локализацию каких-либо ферментов, поскольку он позволяет получить большое (в процентном отношении) количество интактных органелл. Использование шпината в научных исследованиях, по-видимому, связано с теми же трудностями, что и применение томатов и табака, а именно с большой вариабельностью получаемого растительного материала, обусловленной колебаниями условий выращивания, которые М’Огут даже приводить к тому, что некоторые ткани становятся устойчивыми к ферментативной обработке.
Относительно интактиые и активные хлоропласты были выделены из протопластов мезофилла таких Сз-растений, как пшеница, ячмень, табак и подсолнечник. К тому же интактные хлоропласты, выделенные из протопластов мезофилла таких Q-растений, как Digitaria sanguinalis (росичка кровяная), Eleusine indica (елеузина индийская) и Urochloa panicoides, эффективно катализируют зависимые от света реакции, связанные с фотоеиитетическим метаболизмом в С4-ци«ле. Пригодность протопластов для изучения Сгфотосинтеза достаточно полно обсуждается в гл. 10 и 12. Ни механическое, ни ферментативное разрушение клеток не позволяют обычно получить такое хлоропласты. из САМ-растеннй, которые были бы способны ассимилировать СОг со скоростью, превышающей несколько мкмоль-(мгХл)_1-ч-1.,'Средняя скорость фиксации С02 в хлоропластах, изолированных из протопластов САМ-растепия Se-dutn praealtum, составляет около 20—30 мкмоль-(мгХл)-1 ¦ ч"1.
При исследовании внутриклеточной локализации ферментов в клетках мезофилла ферментативное разрушение клеток дает ряд преимуществ. Во-первых, устраняются митохондрии, микротельца и такие потенциальные источники посторонних ферментов, как проводящие и эпидермальная ткани. Во-вторых, можно получить высокое процентное содержание иитакт-ных органелл. А это несомненное преимущество, когда надо выяснить внутриклеточную компартмеитацшо ферментов. При механическом разрушении более вероятны такие явления, как агрегация органелл, неспецифическое связывание растворимых ферментов с органеллами и формирование комплексов между белками и таннинами. Вероятность такого рода событий намного уменьшается, если используют готовые протопласты.
