Генетика бактерий - Девис Р.
Скачать (прямая ссылка):
это отражает интересы авторов и их квалификацию. Однако оказалось, что
использование этой бактерии имеет большие преимущества. Особенности
генетики Salmonella и Escherichia coli одинаковы, но работать с
транспозонами с Salmonella легче и быстрее (особенно в случае
экспериментов с использованием трансдукции). Но, что более существенно,
клонирование генов Salmonella в клетках Е. coli служит надежной моделью
для всех видов молекулярного клонирования. Вполне возможно, что
клонированные гены будут фукционировать (подобно некоторым генам
дрожжей), однако гомология настолько ограничена, что рекомбинация между
клонированными генами и генами клетки-хозяина не осложняет работы. Кроме
того, эти эксперименты наглядно иллюстрируют связь между генетическими
манипуляциями in vitro с геном, клонированным в клетках Е. coli, и
генетическим анализом структуры и функции того же самого гена in vivo в
том организме, из которого он происходит. Как нам кажется, преимущества
изучения тех организмов, с которыми возможны генетические манипуляции,
могут стать еще большими с развитием методов рекомбинантных ДНК-
Мы признательны Питеру Уенсенку и 'Джеффри Миллеру, которые вместе с нами
вели первые варианты этого курса в лаборатории в Коулд-Спринг-Харборе.
Курс этот (как и его содержание) никогда бы не увидел свет, не будь
поддержки многочисленных наших помощников, каждое лето трудившихся над
курсом и его переработкой. Это Джон Карлсон, Форрест Чамли, Питер
Джерген, Марк Джонстон, Дуглас Кошланд, Стивен Лэм, Барбара Мейер, Пол
Риггс, Марк Роуз, Том Сент-Джон, Стюарт Шерер, Молли Шмидт, Дэн Стинчкомб
и Фред Уинстон.
Сотрудники лаборатории в Коулд-Спринг-Харборе были полны энтузиазма и
оптимизма, особенно во многих кризисных ситуациях. Рей Джестеланд, а
затем и Джик Хикс заслуживают наибольшей благодарности. Энн Бушнелл
оказала бесценную помощь при нашем обучении электронной микроскопии. Энн
Стреферн мы приносим особую благодарность за подбор штаммов. Ненси Форд и
ее сотрудники были замечательно терпимы и внимательны при подготовке
рукописи. Надин Дам-сер и Мэри Мосчитта заслуживают быть отмеченными
особо в связи с их усилиями при издании и подготовке окончательного
варианта рукописи, который здесь и воспроизведен.
Мы признательны Александру Кону за разрешение воспроизвести некоторые его
карикатуры, которые мы разбросали по
8
Предисловие
всей книге. Эти изобретательные эскизы, украшающие стены ДавенпортовЬкой
лаборатории, уже ряд лет забавляют как студентов, так и преподавателей.
Вацлав Шибальский любезно снабдил их подписями.
Нам приятно также выразить признательность компаниям, предоставляющим
бесплатно материалы' для использования при обучении на этих курсах:
Bethesda Research Laboratories, Inc., Rockville; Maryland; Boehringer-
Mannheim Biochemicals, Indianapolis, Indiana; New England Biolabs,
Beverly, Massachusetts; New England Nuclear, Boston, Massachusetts и
Schleicher and Schuell, Keene New Hampshire.
Наконец, мы признательны Джиму Уотсону за его поддержку генетики бактерий
как науки, значение которой' в современной молекулярной биологии не
теряет своей силы.
Р. Девис, Д. Ботстайн, Дж. Рот
Введение
Структура книги и содержание
Данное руководство состоит из трех разделов: "эксперименты", "методики" и
"приложения". В тринадцати взаимосвязанных экспериментах описаны в общих
чертах их назначение, основной подход и методики, использованные для
решения конкретных задач. Методики подробно расписаны по этапам, причем в
одном эксперименте может быть использовано несколько методик. В
приложения вынесена общая информация, извлеченная из двух первых разделов
книги. Разделы, в которых описываются эксперименты и методики, включают
также специально выделенные обсуждения, в которых объясняются отдельные
стадии, а также содержатся предложения по поводу дальнейших экспериментов
и контролей.
Курсы по генетике в лаборатории Коулд-Спринг-Харбор на протяжении более
35 лет проводились в здании Давенпортовской лаборатории, построенном в
1927 г. Первые такие курсы, посвященные вирусам бактерий, вел в этом
здании в 1945 г. Макс Дельбрюк. Эти курсы проводили такие замечательные
ученые, как Сеймур Бензер, Герман Калькар, Аарон Новик, Лео Сцилард и
Гюнтер Стент. На фотографии (начала 50-х годов) показано старое здание,
возведенное по проекту Генри Сейлора, архитектора из Хантингтона, Лонг-
Айленд.
10
Раздел "Эксперименты" составлен таким образом, чтобы разные эксперименты
дополняли друг друга и оказались взаимозависимыми. Например, в
эксперименте 7 строится генетическая карта делеций. В эксперименте 10 эта
карта сопоставляется с физической картой; при этом используются материалы
экспериментов 8, 9 и 12. Эти эксперименты не обязательно проводить
последовательно. В трехнедельном курсе, преподаваемом в Коулд-Спринг-
Харборе, они выполнялись в значительной мере одновременно.
Подразумевается, что методики служат для выполнения этих экспериментов,
